Otolog trombin ve kalsiyum glukonat ile aktive edilen plateletten zengin plazmanın çoklu ilaç direncine (ÇİD) sahip acinetobacter baumannii mikroorganizmasına karşı antibakteriyel etkinliğinin in vitro araştırılması
In vitro antibacterial activity of platelet rich plasma (PRP) activated by autologous thrombin and calcium gluconate on multi-drug resistant (MDR) acinetobacter baumannii
- Tez No: 464919
- Danışmanlar: PROF. DR. İSMAİL YAŞAR AVCI
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Klinik Bakteriyoloji ve Enfeksiyon Hastalıkları, Clinical Microbiology and Infectious Diseases
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2016
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Sağlık Bilimleri Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kan Bankacılığı ve Transfüzyon Tıbbı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 101
Özet
Diyabetik ayak enfeksiyonu (DAE) olan hastalarda damar kan akımının azalması nedeniyle azalmış doku beslenmesine ilaveten konak hücre savunmasında önemli rol alan lökosit, lenfosit, nötrofil ve trombositlerin bu bölgelere yeterli oranda ulaşamaması nedeniyle gelişen enfeksiyonların iyileşme süreci uzamakta ya da enfeksiyonlar baskı altına alınamamaktadır. Bu enfeksiyonların tedavisinde antibiyotik kullanımı çok önemlidir. Antibiyotik tedavisine ilaveten yara debridmanı, hiperbarik oksijen tedavisi, vakum aspirasyon uygulamaları ve bunlara ilaveten trombositten zengin plazma (TZP) uygulanılması son yıllarda önem arz etmektedir. Acinetobacter baumannii DAE'ye yol açabilen en önemli mikroorganizmalardan birisi olup beraberinde uzun süre canlılığını koruyabilen, kolaylıkla çapraz bulaşa yol açıp fırsatçı enfeksiyonlara sebep olabilen önemli bir patojendir. Geniş spektrumlu bir β-laktam antibiyotik grubu olan karbapenemlerin de dâhil olduğu çok sayıda ilaca direnç göstermesi, bu patojenle olan enfeksiyonların tedavisinde ciddi problemlerin yaşanmasına neden olmaktadır. Bu çalışmada, Gülhane Askeri Tıp Akademisi Haydarpaşa Eğitim Hastanesi Tıbbi Mikrobiyoloji Servisi Bakteriyoloji Laboratuvarı'nda diyabetik ayak enfeksiyonu olan bir hastadan izole edilen Çoklu İlaç Direcine (ÇİD)'e sahip A. baumannii izolatı üzerinde, Gülhane Askeri Tıp Akademisi Haydarpaşa Eğitim Hastanesi Kan Bankası Müdürlüğü'ne kan bağışında bulunan bağışçılardan elde edilen TZP'nin in-vitro etkinliğinin ortaya konulması amaçlanmıştır. Çalışmamızda, Ulusal Kan ve Kan Ürünleri Rehberindeki kan bağışçısı seçim kriterlerlerine uygun 8 gönüllünün her birinden TZP elde edilmesi amacıyla Magellan PRP™ kiti kullanılmıştır. Toplamda 6 ml ACD-A, 54 ml tam kan otomatize kapalı sistemli MagellanPRP™ cihazı ile 3 ml TZP ve 20 ml Trombositten Fakir Plazma (TFP) elde edildi. Otolog trombin elde edilmesi amacıyla bağışçılardan Vacuette® serum pıhtı aktivasyon tüpüne alınan 9 ml tam kanın üzerine 1 ml %10 kalsiyum glukonat ilave edilerek çeşitli santrifüj aşamaları sonrası trombin içeren serum elde edildi. Elde edilen TZP ve TFP'nin ÇİD'e sahip A. baumannii izolatı üzerindeki antimikrobisidal etkinliklerinin, var ise etkinlik sürelerinin araştırılması için otolog trombin ile aktivasyon yapıldı. planlandı. Bu amaçla diyabetik ayak enfeksiyonu olan bir hastadan izole edilen, versiyon 6,0 EUCAST kriterlerine göre; Tobramisin, Kolistin ve Tigesiklin antibiyotiklerine hassas diğer antibiyotiklere dirençli (ÇİD) A. baumannii izolatı kullanıldı. TZP grubu için; koloni sayıları ayarlanmış (1X105) 100 µl A. baumannii çalışma tüplerine eklendi. Bunun üzerine 700 µl buyyon, 160 µl TZP son olarak 40 µl trombin eklendi. Çalışma tüplerinde son bakteri konsantrasyonu 1x104 kob/ml haline getirildi. Tüpler 37°C' de etüvde 200 rpm'de çalışan ajitatör üzerinde inkübasyonda bekletilirken 1., 2., 5., 10. saattlerde %5'lik Koyun Kanlı Agarın yüzeyine ekim yapıldı. 18-24 saatlik 37°C de inkübasyon sonrası koloniler sayım için değerlendirildi. TZP 'deki Beyaz Küre sayısı; 60,35 x 103 µl, Trombosit sayısı 1998,875 x 103 µl olarak saptandı. TZP'deki trombosit ve WBC verimliliğinde yaklaşık 10 kat artış saptandı. TZP grubunun saatlere göre koloni ortalamaları sırasıyla 1.saat için 16,8; 2. saat için 20; 5. saat için 50,8; ve son olarak 10. saat için 933,8 olarak bulundu. TFP grubunun koloni ortalamaları ise 1.saat için 54,7; 2. saat için 81,4; 5. saat için 343; ve son olarak 10. saat için 977,5 olarak bulundu. Kontrol (PBS) grubunun koloni ortalamaları sırasıyla 1.saat için 47,5; 2. saat için 247,1; 5. saat için 944; ve son olarak 10. saat için 1000 olarak bulundu. TZP grubunda 1, 2. ve 5. saatlerdeki üreyen kolonilerin kontrol grubuna göre kıyaslandığında yüzdesel olarak 5. saatte tepe noktasına ulaştığı, 10. saaatte trombositlerin antimikrobisidal etkinliğini kaybettiği görüldü. İki grup arasındaki bu fark istatiksel olarak da önemliydi (p
Özet (Çeviri)
It takes long time and it's hard to recover from diabetic foot infections because there is a lack of tissue nutrition due to decreased blood supply, so that leucocytes, lymphocytes, neutrophils which has an important role on host cell defence and platelets have difficulties to reach the infected sites. Antibiotics have the primary role on the treatment of infected wounds. Wound debridement, hyperbaric oxygen treatment, vacuum aspiration practices and platelet rich plasma (PRP) implementation are the other important treatment modalities of these infections in recent years. Acinetobacter baumannii is one of the most important causes of diabetic foot infections. It can stay alive for a long time in environment and cause opportunistic infections easily. Owing to the fact that it has resistance to most β-lactam antibiotics including carbapenems, it's hard to treat these infections. In this study, we aimed to reveal the in-vitro effectivity of PRP obtained from blood donors in Gulhane Medical Academy Haydarpasa Training Hospital Blood Banking Center on a MDR A. baumannii strain obtained from a patient with diabetic foot infection in Gulhane Medical Academy Haydarpasa Training Hospital Medical Microbiology Laboratory. To obtain PRP, we got 54 ml of blood from brachial vene of each of eight volunteers that meet the selection criteria of National Blood and Blood Products Guide with a 60–ml-syringe in Magellan PRP™ kit which contained 6 ml ACD-A. We obtained 3 ml of PRP and 20 ml of PPP at the end of the procedure. We put 9 ml of whole blood and 1 ml of calcium gluconate into Vacuette® serum clot activation tube and then after various centrifugation processes we got the serum including autologous trombin. PRP and PPP were activated by autologous trombin to search for antimicrobial activity and duration of activity on MDR A. baumannii. A MDR A. baumannii, isolated from infected wound of a patient with a diabetic foot infection and resistant to tobramycin, colistin and tigecycline according to EUCAST criteria version 6,0 were used for this purpose. For the PRP group, having regulated colony counts (1X105) of 100 µl of A. baumannii were put into the sample tubes. 700 µl of liquid medium, 160 µl of PRP and then 40 µl of trombin were added into these tubes. Finally, we had 1x104 CFU/ml of bacteria concentration. These tubes were incubated in an incubator on an agitator which runs on 200 rpm at 37°C, and these bacteria concentrates were inoculated on 5% sheep blood agar at the 1st, 2nd, 5th and 10th hours of incubation. The colonies were counted after 18-24 hours of incubation at 37°C. The number of white blood cells (WBC) and platelets in PRP were detected as 60,35 x 103 µl and 1998,875 x 103 µl, respectively. We had 10 times increase on productivity of WBC and platelet. Mean values of colony counts of PRP group were 16.8, 20, 50.8, and 933.8 for 1st, 2nd, 5th. and 10th hours, respectively. Mean values of colony counts of PPP group were 54.7, 81.4, 343, and 933.8 for for 1st, 2nd, 5th. and 10th hours, respectively. Mean values of colony counts of PBS group were 47.5, 247.1, 944, and 1000 for 1st, 2nd, 5th and 10th hours, respectively. When 1st, 2nd and 5th hour colony counts are compared with control group, we observed that antimicrobial effect of platelets reached its peak point at 5th hour in terms of growth percentage, and it disappeared at 10th hour in PRP group. This difference between two groups were also statistically significant (p
Benzer Tezler
- Tüm antibiyotiklere dirençli klebsıella pneumonıae mikroorganizmasına karşı otolog trombin ile aktive edilen trombositten zengin plazmanın ın vıtro antimikrobiyal etkinliğinin araştırılması
In vitro antibacterial activity of thrombocyte rich plasma (PRP) activated by autologous thrombin on pandrug-resistant (PDR) klebsiella pneumonia
DENİZ ERAY GÖKÇE
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2017
Klinik Bakteriyoloji ve Enfeksiyon HastalıklarıSağlık Bilimleri ÜniversitesiEnfeksiyon Hastalıkları ve Klinik Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. RIZA AYTAÇ ÇETİNKAYA
- Trombositlerin Candida albicans üzerine antifungal etkinliğinin araştırılması
Investigation of antifungal activity of platelets on Candida albicans
BERKSAN ŞİMŞEK
Yüksek Lisans
Türkçe
2018
MikrobiyolojiSağlık Bilimleri ÜniversitesiKan Bankacılığı ve Transfüzyon Tıbbı
DR. ÖĞR. ÜYESİ RIZA AYTAÇ ÇETİNKAYA
- Deneysel sıçan siyatik sinir ezilme tarzı yaralanma modelinde sinir rejenerasyonunda trombositten zengin plazmanın etkileri
The effects of platelet rich plasma on sciatic nerve regeneration in experimental rat cruhed sciatic nerve injury model
ALİYE CEYLA ÖZBAYOĞLU
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2008
Plastik ve Rekonstrüktif CerrahiEskişehir Osmangazi ÜniversitesiPlastik ve Rekonstrüktif Cerrahi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. CENGİZ ÇETİN
- Periost grefti plateletten zengin plazma ile beraber kullanıldığında kemik defekt iyileşmesini artırır mı? Tavşan zigomatik arkta deneysel çalışma
Periosteal graft improves healing of bone defects when used together with platelet-rich plasma? Experimental study in rabbits zygomatic arch
ARZU TÜRKSEVEN TOPAÇOĞLU
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2014
Plastik ve Rekonstrüktif CerrahiDüzce ÜniversitesiCerrahi Tıp Bilimleri Bölümü
PROF. DR. DERYA ÖZÇELİK
- İnternal meme arteri ve radiyal arterde endotel kaynaklı nitrik oksit, endotelin-1 ve süperoksit üretimi
Endothelial nitric oxide, endothelin-1 and superoxide radical production in radial artery and internal mammary artery
FEHİME BENLİ AKSUNGAR