Investigation of cancer development on human newborn foreskin cells and human melanocytes via exosomes containing Rab27a and Met oncogene isolated from human malignant melanoma cancer cell lines
İnsan melanoma hücrlerinden salınan Rab27a ve Met genlerini taşıyan ekzozomlarının insan yenidoğan sünnet derisi hücreleri ve insan melanositleri üzerindeki kanser oluşturucu etkilerinin incelenmesi
- Tez No: 472601
- Danışmanlar: PROF. DR. FİKRETTİN ŞAHİN
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Biyoteknoloji, Genetik, Biotechnology, Genetics
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2017
- Dil: İngilizce
- Üniversite: Yeditepe Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 142
Özet
Ekzozomlar endositik merkezden köken alan 40-100 nm büyüklüğündeki küçük veziküllerdir. Verici hücreden alıcı hücreye taşınması amacıyla içlerinde DNA parçaları, mRNA parçaları, mikroRNA ve proteinleri taşırlar. Mezankimal kök hücreler, immün sistem hücreleri, kanser hücreleri vb. ekzozom salınımı yaparlar. Çalışmalar kanser kök hücrelerinden salınan şekillenen ekzozomların tömör oluşumuna özgü çevresel düzenlemeyi sağlayacak bir çok yeniden programlama faktörlerini oluşturduklarını göstermektedir. Referans niteliğindeki çalışmaların başında melanoma kanser hücrelerinden tomurcuklanan ekzozomların c-Met ve Rab27a gibi melanomaya spesifik işaretleyici genlerin ve proteinlerin iletimini sağladıklarına dair bilimsel yayın gelmektedir. Serum ekzozomlarında artan c-Met ekspresyonu hastalığın gelişmesinde önemli bir etken olarak düşünülmektedir. Rab27a ise ekzozomların hücrelerden salınımında önemli bir gen olarak belirlenmiştir. Deri kanseri hücrelerinde azalan Rab27a ekspresyonunun ekzozom salınımı sekteye uğrattığı yapılan çalışmalar ile gösterilmiştir. Bu projede Rab27a ve c-Met ekspresyonlarının deri kanseri hücreleri ve dolayısıyla ekzozomlarında arttırılıp ve azaltılıp, sağlıklı insan yenidoğan sünnet derisi kök hücreleri ve insan fibroblastlarına uygulandıklarında nasıl bir etkilerinin olduğunun anlaşılması amaçlanmıştır. Bu süreçte hücrelere gen transfeksiyonları, akış sitometrisi ile transfeksiyonların etkilerinin bakılması, Annexin-V ile kontrollü hücre ölümü analizi, hücre göçünün miktarı, ELISA testleri ve gen anlatımı düzeylerinin analizi yapılmıştır. Deri kanseri hücreleri ekzozomlarının insan fibroblast görünümlü kök hücreler ve insan deri yetişkin hücreleri üzerinde kanser hücreline benzeyen davranışları arttırdığı ve azalttığı c-Met ve Rab27a ekspresyonlarının artışı ve azaltılışı üzerinden bu çalışma ile gösterilmiştir. Melanoma kanser hücrelerinden salınan ekzozomların içeriğinin belirlenmesi ve moleküler uygulamalar üzerinden gelecekteki çalışmalar için incelenmesi çok önemli bir terapi yöntemi olarak düşünülmektedir.
Özet (Çeviri)
Exosomes are small membrane derived vesicles originating from endocytic core with 40100 nm. Exosomes transmit DNA constituents, mRNAs, microRNAs and proteins that are relocated from a donor cells to a receiver cell. Many divergent cells comprising mesenchymal cells, immune cells and cancer cells discharge exosomes. Studies show that cancer cell exosomes create the entry and reprogramming of essentials connected to tumor environment. A reference study established that melanoma-derived exosomes convey diverse proteins such as c-Met and Rab27a, which indicate a melanoma mark. Increased Met expressions in serum exosomes have thought to be a predictor of disease progression. Meanwhile, Rab27a has identified to be important in exosome discharge. Decreased expressions of Rab27a in human melanoma cells determined to diminish exosome release. This project aims to examine the effects of downregulation and upregulation of Rab27a and c-Met in human melanocyte and recently identified stem cells isolated from human newborn foreskin tissue by utilizing the isolated exosomes from malignant melanoma cell lineages. Throughout the analysis of cancer-like formation; different protocols covering gene transfections, flow cytometry analysis of the transfection efficiency, Annexin-V apoptosis assays, cell migration assays, tube formation assays, ELISA assays and gene expression profiling were performed. According to the results, exosomes derived from cancer cells conveyed information to healthy fibroblastic like stem cells from human newborn prepuce and healthy melanocytes/keratinocyte and induce cellular reaction with Met and Rab27a overexpression and silencing may be beneficial approaches for future treatment possibilities. The developing molecular contextual of melanoma exosomes and their implications for improved management of melanoma patients can be an astonishing therapeutic methodology for future actions.
Benzer Tezler
- Denizel canlı kaynaklardan izole edilen glikozaminoglikanların insan glioblastoma U87MG hücreleri üzerindeki etkilerinin araştırılması
Investigation of the effects of glycosaminoglycans isolated from marine living resources on human glioblastoma U87MG cells
NEBAHAT BUŞRA AKSOY
Yüksek Lisans
Türkçe
2023
Biyolojiİstanbul ÜniversitesiMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. MURAT PEKMEZ
- Leptin'e maruz bırakılan pc-3 prostat kanseri hücrelerinde sinnamaldehit etkisinin pı3k/mapk sinyal iletim yolakları üzerinden araştırılması
Investigation of the effect of cinnamaldehyde on leptin-exposed pc-3 prostate cancer cells via pi3k/mapk signal transduction pathways
AMRA HALUGIC ŞEN
Yüksek Lisans
Türkçe
2023
Histoloji ve EmbriyolojiMuğla Sıtkı Koçman ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. FERAL ÖZTÜRK
- Alfa-linolenik asitin kolon kanseri üzerindeki etkisinin moleküler mekanizmasının araştırılması
Investigation of the molekuler mechanism of the effect of alpha-linolenic acid on colon cancer
ARZU EMEKSİZ
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2022
GastroenterolojiÇukurova ÜniversitesiTıbbi Farmakoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ERGİN ŞİNGİRİK
- Scorpıo fuscus venomunun karakterizasyonu ve insan kolon kanseri üzerine moleküler düzeyde etkilerinin incelenmesi
Characterization of scorpio fuscus venom and investigation of its effects on human colon cancer at the molecular level
HALİME ŞEYMA AKALIN
Yüksek Lisans
Türkçe
2023
BiyokimyaSelçuk ÜniversitesiBiyokimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SERDAR KARAKURT
- Oksidatif strese bağlı kromozom hasarlarının oluşumunda nörotransmitterlerin koruyucu etkilerinin araştırılması
Investigation of the protective effects of neurotransmitters in the oxidative stress induced chromosomal damage
GÖZDE KILIÇ