Geri Dön

Nucleofection effects on human T cells as a non-viral transfection technique

Viral olmayan transfeksiyon tekniği olarak nükleofeksiyonun insan T hücreleri üzerindeki etkileri

  1. Tez No: 473242
  2. Yazar: SEMİNAY GÜLER
  3. Danışmanlar: YRD. DOÇ. DR. AYTEN NALBANT ALDANMAZ
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Allerji ve İmmünoloji, Allergy and Immunology
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2016
  8. Dil: İngilizce
  9. Üniversite: İzmir Yüksek Teknoloji Enstitüsü
  10. Enstitü: Mühendislik ve Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 53

Özet

Hücreler üzerine uygulanan immünolojik yaklaşımların hızla arttığı bu dönemde nükleik asitlerin hücre içine gönderilmesi önemli bir işlem haline gelmiştir. Elektroporasyona dayalı bir metod olan nükleofeksiyon, transfeksiyonu zor olan hücreler için güvenilir bir teknolojidir. Bu çalışmada naive CD4 T hücreleri ve Jurkat hücreleri transfeksiyon verimliliği ve hücre yaşayabilirliği yönünden karşılaştırıldı. Naive CD4 T hücreleri ve Jurkat hücreleri farklı zaman dilimlerinde pmax GFP ile transfekte edildi. 5 farklı nükleofeksiyon programından bir tanesi naive CD4 T hücreleri için tanımlandı ve yapılan deneylerle doğrulandı. Ayrıca Jurkat hücreleri de onlara özgü nükleofeksiyon programı uygulanarak transfekte edildi. Akım sitometrisi analizleri sonucunda hem naive CD4 T hücrelerinde hemde Jurkat hücrelerinde GFP ifadesinin transfeksiyondan 48 saat sonra önemli derecede arttığı gözlemlendi. Bu çalışmada T helper 17 hücrelerinin ve aktifleştirilmiş Jurkat hücrelerinin nükleofeksiyonu da araştırıldı. Bu hücrelerin de GFP'yi verimli bir şekilde hücre içine aldıkları görüldü. Böylece, nükleofeksiyonun transfeksiyonu zor olan hücrelerin transfeksiyonunda kullanılabilecek yararlı bir metod olduğu saptandı.

Özet (Çeviri)

In times of quickly developing ways of immunological approaches applying on cells, nucleic acid delivery becomes a fundamental process. The ways of delivering nucleic acids mainly affects the consequence of immunological response. The nucleofection technology which is a modified form of electroporation is reliable method for transfection of hard to transfect cells. In the current study, we compared naive CD4 T cells and Jurkat cells in terms of nucleofection efficiency and cell viability. Naive CD4 T cells and Jurkat cells were transfected with pmax GFP at different time points. Out of 5 different nucleofection programs, one for naive CD4 T cells was identified. Jurkat cells were also transfected with one nucleofection program. Flow cytometric analyses of nucleofected naive CD4 T cells and Jurkat cells indicated that transfection efficiency significantly increased at 48h post transfection. We also differentiated naive CD4 T cells into T helper 17 cell phenotype by using certain stimulants and we activated Jurkat cells by using PMA and Ionomycin. We found that GFP was efficiently taken up by both T helper 17 cells and activated Jurkat cells. Therefore, nucleofection significantly holds important place in transfecting of hard to transfect cells including primary human CD4 T cells.

Benzer Tezler

  1. Role of DNA topoisomerase IIβ in osteogenic differentiation of human mesenchymal stem cells

    İnsan mezenkimal kök hücrelerinin osteogenik farklılaşmasında DNA topoizomeraz IIβ'nın rolü

    AYSEL KARAGÖZ

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2017

    Genetikİstanbul Üniversitesi

    Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. BEDİA PALABIYIK

  2. Investigation of the effect of C-MYC transcription factoron transcriptional regulation of ATP13A2 gene

    ATP13A2 geninin transkripsiyonel regülasyonunda C-MYCtranskripsiyon faktörünün etkisinin incelenmesi

    ASLI BERİL TİRYAKİLER

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2023

    Biyolojiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ARZU KARABAY KORKMAZ

  3. Regulation of tau on septin3 in neuronal branching

    Septin3' ün nöronal dallanma üzerindeki etkisinin tau tarafından düzenlenmesi

    DİDEM BARAN

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2017

    Biyolojiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ARZU KARABAY KORKMAZ

  4. Optimizing the transfection conditions for the generation of stable transgenic cell lines

    Stabil hücre hatlarının geliştrilmesi için transfeksiyon koşullarının optimize edilmesi

    KARİN KREEKMAN

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2020

    Bilim ve Teknolojiİzmir Yüksek Teknoloji Enstitüsü

    Biyoteknoloji ve Biyomühendislik Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. ENGİN ÖZÇİVİCİ

    DOÇ. DR. NUR BAŞAK SÜRMELİ ERALTUĞ

  5. Pluripotent stem cell (IPSCs)-derived hepatic organoids for modeling liver cancer

    Karaciğer kanserinin modellenmesinde indüklenebilir pluripotent kök hücre (IPSCs) kaynaklı hepatik organoidler

    MUSTAFA KARABİÇİCİ

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2022

    BiyolojiDokuz Eylül Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ŞERİFE ESRA ERDAL BAĞRIYANIK