Nucleofection effects on human T cells as a non-viral transfection technique
Viral olmayan transfeksiyon tekniği olarak nükleofeksiyonun insan T hücreleri üzerindeki etkileri
- Tez No: 473242
- Danışmanlar: YRD. DOÇ. DR. AYTEN NALBANT ALDANMAZ
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Allerji ve İmmünoloji, Allergy and Immunology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2016
- Dil: İngilizce
- Üniversite: İzmir Yüksek Teknoloji Enstitüsü
- Enstitü: Mühendislik ve Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 53
Özet
Hücreler üzerine uygulanan immünolojik yaklaşımların hızla arttığı bu dönemde nükleik asitlerin hücre içine gönderilmesi önemli bir işlem haline gelmiştir. Elektroporasyona dayalı bir metod olan nükleofeksiyon, transfeksiyonu zor olan hücreler için güvenilir bir teknolojidir. Bu çalışmada naive CD4 T hücreleri ve Jurkat hücreleri transfeksiyon verimliliği ve hücre yaşayabilirliği yönünden karşılaştırıldı. Naive CD4 T hücreleri ve Jurkat hücreleri farklı zaman dilimlerinde pmax GFP ile transfekte edildi. 5 farklı nükleofeksiyon programından bir tanesi naive CD4 T hücreleri için tanımlandı ve yapılan deneylerle doğrulandı. Ayrıca Jurkat hücreleri de onlara özgü nükleofeksiyon programı uygulanarak transfekte edildi. Akım sitometrisi analizleri sonucunda hem naive CD4 T hücrelerinde hemde Jurkat hücrelerinde GFP ifadesinin transfeksiyondan 48 saat sonra önemli derecede arttığı gözlemlendi. Bu çalışmada T helper 17 hücrelerinin ve aktifleştirilmiş Jurkat hücrelerinin nükleofeksiyonu da araştırıldı. Bu hücrelerin de GFP'yi verimli bir şekilde hücre içine aldıkları görüldü. Böylece, nükleofeksiyonun transfeksiyonu zor olan hücrelerin transfeksiyonunda kullanılabilecek yararlı bir metod olduğu saptandı.
Özet (Çeviri)
In times of quickly developing ways of immunological approaches applying on cells, nucleic acid delivery becomes a fundamental process. The ways of delivering nucleic acids mainly affects the consequence of immunological response. The nucleofection technology which is a modified form of electroporation is reliable method for transfection of hard to transfect cells. In the current study, we compared naive CD4 T cells and Jurkat cells in terms of nucleofection efficiency and cell viability. Naive CD4 T cells and Jurkat cells were transfected with pmax GFP at different time points. Out of 5 different nucleofection programs, one for naive CD4 T cells was identified. Jurkat cells were also transfected with one nucleofection program. Flow cytometric analyses of nucleofected naive CD4 T cells and Jurkat cells indicated that transfection efficiency significantly increased at 48h post transfection. We also differentiated naive CD4 T cells into T helper 17 cell phenotype by using certain stimulants and we activated Jurkat cells by using PMA and Ionomycin. We found that GFP was efficiently taken up by both T helper 17 cells and activated Jurkat cells. Therefore, nucleofection significantly holds important place in transfecting of hard to transfect cells including primary human CD4 T cells.
Benzer Tezler
- Role of DNA topoisomerase IIβ in osteogenic differentiation of human mesenchymal stem cells
İnsan mezenkimal kök hücrelerinin osteogenik farklılaşmasında DNA topoizomeraz IIβ'nın rolü
AYSEL KARAGÖZ
Doktora
İngilizce
2017
Genetikİstanbul ÜniversitesiBiyoteknoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. BEDİA PALABIYIK
- Investigation of the effect of C-MYC transcription factoron transcriptional regulation of ATP13A2 gene
ATP13A2 geninin transkripsiyonel regülasyonunda C-MYCtranskripsiyon faktörünün etkisinin incelenmesi
ASLI BERİL TİRYAKİLER
Yüksek Lisans
İngilizce
2023
Biyolojiİstanbul Teknik ÜniversitesiMoleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ARZU KARABAY KORKMAZ
- Regulation of tau on septin3 in neuronal branching
Septin3' ün nöronal dallanma üzerindeki etkisinin tau tarafından düzenlenmesi
DİDEM BARAN
Yüksek Lisans
İngilizce
2017
Biyolojiİstanbul Teknik ÜniversitesiMoleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ARZU KARABAY KORKMAZ
- Optimizing the transfection conditions for the generation of stable transgenic cell lines
Stabil hücre hatlarının geliştrilmesi için transfeksiyon koşullarının optimize edilmesi
KARİN KREEKMAN
Yüksek Lisans
İngilizce
2020
Bilim ve Teknolojiİzmir Yüksek Teknoloji EnstitüsüBiyoteknoloji ve Biyomühendislik Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ENGİN ÖZÇİVİCİ
DOÇ. DR. NUR BAŞAK SÜRMELİ ERALTUĞ
- Pluripotent stem cell (IPSCs)-derived hepatic organoids for modeling liver cancer
Karaciğer kanserinin modellenmesinde indüklenebilir pluripotent kök hücre (IPSCs) kaynaklı hepatik organoidler
MUSTAFA KARABİÇİCİ
Doktora
İngilizce
2022
BiyolojiDokuz Eylül ÜniversitesiMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ŞERİFE ESRA ERDAL BAĞRIYANIK