Geri Dön

Assessment of immune protective capacities of the recombinant outer membrane protein Q, iron superoxide dismutase and putative lipoprotein from Bordetella pertussis

Bordetella pertussis'e ait rekombinant dış membran protein Q, demir süperoksit dismutaz ve putatif lipoproteinin immün koruyucu kapasitelerinin değerlendirilmesi

PDF İndir

  1. Tez No: 474981
  2. Yazar: ÇİĞDEM YILMAZ
  3. Danışmanlar: PROF. DR. GÜLAY ÖZCENGİZ
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Biyoloji, Mikrobiyoloji, Biology, Microbiology
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2017
  8. Dil: İngilizce
  9. Üniversite: Orta Doğu Teknik Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 170

Özet

Boğmaca, yenidoğanlarda ve çocuklarda yaygın şekilde görülen ve insan patojeni olan Bordetella pertussis'in neden olduğu bulaşıcı bir hastalıktır. Hâlihazırda tam-hücre (wP) ve aselüler (aP) olmak üzere iki çeşit boğmaca aşısı bulunmaktadır. wP aşısının yan etkilerinden dolayı aşılama için aselüler aşılar yaygın olarak tercih edilmektedir. Yüksek aşılama oranına rağmen, hastalığın gençler ve yetişkinler arasındaki yüksek görülme sıklığına dair raporlar mevcuttur; ayrıca boğmaca hastalığının yeniden ortaya çıkması birçok ülkede endişe konusudur. Ana nedenin mevcut aP aşılarının düşük etkinliği nedeni ile koruyucu bağışıklığın erkenden kaybolması olduğu düşünülmektedir. Bu nedenle, yeni antijenlerin bulunması ve yeni adjuvan sistemlerinin geliştirilmesi mevcut aP aşılarının etkinliğini güçlendirmede umut verici yöntemler olarak görülmektedir. Mevcut çalışmada, rekombinant dış membrane protein Q (OmpQ), putatif lipoprotein (Lpp) ve demir süperoksit dismutaz (FeSOD) proteinlerinin koruyucu kapasiteleri B. pertussis ile enfekte edilmiş fare modellerinde değerlendirilmiştir. İlgili genler B. pertussis Tohama I genomundan klonlanmış ve E. coli BL21(DE) hücrelerine aktarılmıştır. Saflaştırma sonrasında, rekombinant proteinler alum veya monofosfolipit A (MPLA) ile formüle edilmiş ve dişi BALB/c farelerine intraperitonal yolla üç hafta aralıklarla iki kere uygulanmıştır. Fare dalakları antijene özel IFN-γ seviyelerinin değerlendirilmesi amacıyla alınırken, fare akciğerleri kolonizasyon değerlendirmesi için B. pertussis Saadet hücreleri ile bağışıklanmadan sonra çıkarılmıştır. IgG1, IgG2a ve IL-10 seviyelerinin ölçülmesi için serum örnekleri toplanmıştır. Rekombinant proteinlerin üçü de yüksek antikor cevabını tetiklemiştir. MPLA formülasyonlarında IgG2a tipi cevap daha yüksek iken, alum formülasyonları daha yüksek IgG1 üretimini tetiklemiştir. Rekombinant OmpQ ve putatif Lpp proteinleri hem alum hem de MPLA ile yapılan formülasyonlarda antijene özel IFN-γ ve IL-10 üretimini arttırmamıştır. FeSOD-MPLA ile yapılan aşılama yüksek seviyede IFN-γ ve IL-10 üretimi sağlarken, FeSOD-Alum formülasyonunda önemli bir artış bulunamamıştır. Ayrıca, sadece FeSOD-MPLA aşılaması fare akciğerlerinde bakteri kolonizasyonunu azaltabilmiştir. Bu sonuçlar göz önüne alındığında, FeSOD ve MPLA'nın yeni jenerasyon aP aşıları geliştirilmesi için sırasıyla umut verici bir antijen ve adjuvan adayı olabileceği görülmektedir.

Özet (Çeviri)

Pertussis is a contagious disease which is commonly seen among infants and children and caused by a human pathogen known as Bordetella pertussis. There are currently two vaccine types available against the disease; whole-cell (wP) and acellular pertussis (aP) vaccines. Due to the side effects of wP vaccine, aP vaccines are commonly preferred for vaccination. Despite high vaccination coverage, high incidence rates among adolescents and adults have been reported causing the resurgence of pertussis to be the focus of interest in many countries. Main reason is thought to be early waning immunity due to low efficiency of current aP vaccines. Thus, discovery of new antigens and development of new adjuvant systems are promising approaches to improve the efficacy of current aP vaccines. In the present study, protective capacities of recombinant outer membrane protein Q (OmpQ), putative lipoprotein (Lpp) and iron superoxide dismutase (FeSOD) proteins were evaluated in mice models infected with B. pertussis. The genes of interest from B. pertussis Tohama I were cloned and introduced into E. coli BL21(DE) cells. After purification, recombinant proteins were formulated with alum or monophospholipid A (MPLA) and intraperitoneally introduced to female BALB/c mice twice at intervals of three weeks. While spleens of mice were obtained for evaluation of antigen-specific IFN-γ levels, the lungs of mice were excised after bacterial challenge with B. pertussis Saadet strain to evaluate colonization. Sera were also collected to measure IgG1, IgG2a and IL-10 levels. All three recombinant proteins induced high level of antibody responses. While IgG2a-type response was slightly higher in MPLA formulations, Alum-adjuvanted formulations induced higher IgG1 production. Recombinant OmpQ and putative Lpp could not trigger antigen-specific IFN-γ and IL-10 production in both alum- and MPLA-adjuvanted formulations. FeSOD-MPLA vaccination resulted in production of higher level of IFN-γ and IL-10, while there was no significant increase induced by FeSOD-Alum. Moreover, only FeSOD-MPLA vaccination was able to reduce bacterial colonization in mice lungs. In view of these results, recombinant FeSOD adjuvanted with MPLA represents a promising formulation for development of new generation aP vaccines.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    304961

    Assessment of immune protective capacity of the recombinant iron superoxide dismutase (FeSOD) from bordetella pertussis

    Bordetella pertussis?e ait rekombinant demir süperoksit dismutaz (FeSOD) proteininin immün koruyucu kapasitesinin değerlendirilmesi

    AYCAN APAK

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2011

    BiyolojiOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Biyoloji Bölümü

    PROF. DR. GÜLAY ÖZCENGİZ

  2. Tez No

    921986

    Türkiye'de üretilmiş sumak bitkisinin (Rhus coriara L.) spektroskopik olarak antioksidan aktivite/kapasite tayini

    Spectroscopic determination of antioxidant activity/capacity of sumac plant (Rhus coriara L.)

    ZEHRA ULUTAŞ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2025

    Kimyaİstanbul Teknik Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. BİRSEN ÖZTÜRK

    DR. KADRİYE IŞIL BERKER ÇETİN

  3. Tez No

    949205

    Molecular genetic assessment of immune modulators in eosinophils and t cells both in silico and in vitro utilizing photoacoustic imaging approaches

    Fotoakustik görüntüleme yaklaşımlarını kullanarak eozinofiller ve t hücrelerinde bağışıklık modülatörlerinin in siliko ve in vitro moleküler genetik değerlendirmesi

    ZÜLAL ÇELİK

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2025

    Allerji ve İmmünolojiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. CEREN ÇIRACI MUĞAN

  4. Tez No

    933063

    Modulation of amyloid plaques by phytohemagglutinin in Alzheimer's disease

    Alzheimer hastalığında fitohemaglütinin tarafından amiloid plakların modülasyonu

    PELİN PAT

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2025

    GenetikÜsküdar Üniversitesi

    Nörobilim Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ CİHAN TAŞTAN

  5. Tez No

    645396

    Investigating the potential of Bacillus calmette-Guerin vaccine Russia strain, CpG oligonucleotides and intravenous immunoglobulin to induce trained immunity in the context of antiviral immunity

    Bacillus calmette-guerin aşısı Rusya suşu, CpG oligonükleotidler ve intravenöz immünoglobülinin antiviral bağışıklık bağlamında eğitilmiş bağışıklığı indükleme potansiyellerinin araştırılması

    İLAYDA BAYDEMİR

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2020

    Allerji ve İmmünolojiOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MAYDA GÜRSEL

Geri Dön