Geri Dön

Karaturp peroksidaz enziminin saflaştırılması ve benzohidrazidlerle inhibisyon kinetiğinin incelenmesi

Purification of black rudish peroxidase (POD) enzyme and investigation of inhibition kinetic with benzohydrazides

PDF İndir

  1. Tez No: 483605
  2. Yazar: SERPİL GERNİ
  3. Danışmanlar: PROF. DR. HASAN ÖZDEMİR
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyokimya, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2017
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Atatürk Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Biyokimya Bilim Dalı
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

Bu çalışmada karaturp peroksidaz enziminin (POD), inhibitörleri olan 3-Amino benzohidrazid ve türevi moleküller kullanılarak tek basamakta saflaştırılması hedeflendi. Bu amaçla, literatürde bulunan bitki POD saflaştırma çalışmalarına katkı sağlamak için 3-amino benzohidrazid ve onun türevleri olan 5-amino 2-metil benzohidrazid, 3-amino 5-metil benzohidrazid, 3-amino 4-nitro benzohidrazid ve 3-amino 2-metil benzohidrazid molekülleri sentezlendi ve POD enziminin saflaştırılmasında kullanıldı. Türev moleküllerin metilbenzoat formlarından hidrazin sentezleri yapılarak, karaturp POD enzimi üzerine inhibisyon etkileri incelendi. Dönüşümlü inhibisyon gösteren moleküller Sepharose-4B-L-Tirozin jel materyaline bağlanarak elde edilen afinite jelleri ile tek kademede karaturp POD enzimi saflaştırılması gerçekleştirildi. 3-Amino benzohidrazid molekülü kullanıldığında karaturp POD enzimi, %11,9 verimle 246,6 kat, 5-amino 2-metil benzohidrazid ile %43 verimle 733,5 kat, 3-amino 5-metil benzohidrazid ile %6,09 verimle 221,2 kat, 3-amino 4-nitro benzohidrazid ile %14,6 verimle 249,6 kat ve 3-amino 2-metil benzohidrazid ile %21,4 172,5 kat saflaştırma yapıldı. Bu kolonlardan saflaştırılan enzimin molekül ağırlığı ve saflığı SDS-PAGE ile kontrol edildi. Karaturp POD enziminin molekül ağırlığı için 43-47 kDa'da tek bant gözlendi. Tüm kolonların saflaştırma sonuçları karşılaştırıldı ve en iyi kolon materyali olan Sepharose-4B-L-Tirozin-5-amino-2-metil benzohidrazid kolonu için kolon tutma kapasitesi, karaturp POD enzimi için değişik pH, sıcaklık, iyonik şiddetlerde çalışıldı. Karaturp POD enzimi için optimum şartlar: pH 7,0, sıcaklık 15°C, iyonik şiddet ise 0,4 M olarak belirlendi.

Özet (Çeviri)

In this study, it was aimed to establish a purification procedure in one step for black rudish Peroxidase (POD) enzymes by using 3-amino benzohydrazide and its derivatives. which are the inhibitors of the POD enzymes. In this aim, in order to contribute to the purification studies in the literature of plant peroxidase enzymes, 3-amino benzohydrazide and its derivatives which are 5-amino 2-methyl benzohydrazide, 3-amino 5-methyl benzohydrazide, 3-amino 4-nitro benzohydrazide and 3-amino 2-methyl benzohydrazide molecules were synthesized and firstly used at the study of purification of POD enzyme. The inhibition effects on POD enzyme were investigated by making hydrazine synthesis from the methyl benzoate forms of the 3-amino benzohydrazide derivative molecules. The purification of the single-stranded black rudish Peroxidase (POD) enzyme with affinity gels obtained by binding Sepharose-4B-L-Tyrosine gel material of molecules which have alternating inhibition effect was performed. The black rudish POD enzyme is purified using 3-amino benzohydrazide molecule with a yield of 11.9%, 246.6 fold, using 5-amino 2-methyl benzohydrazide molecule with a yield of 43%, 733.5 fold, using 3-amino 5-methyl benzohydrazide with a yield of 6.09%, 221.2 fold, using 3-amino 4-nitro benzohydrazide with a yield 14.6 fold 249.6 fold, using 3-amino 4-nitro benzohydrazide with a yield of 14.6%, 249.6 fold and using 3-amino 2-methyl benzohydrazide molecule with a yield of 21.4%, 172.5 fold. The molecular weight and enzyme purity of the POD enzymes purified from all the column materials were controlled by SDS-PAGE. Single band were observed at 43-47 kDa for the black rudish peroxidase enzyme. The purification results of all the column material were compared and the column holding capacity for Sepharose-4B-L-Tyrosine-5-amino-2-methyl benzohydrazide showing the result of being the best column, for POD were studied different pH, temperature and ionic strengths. Optimum parameter for radish POD were determined as 7.0 for pH, 15°C for temperature, 0.4 M for ionic intensity.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    55360

    Fark denklemi gösterimine dayalı zamanla değişen izgel kestirim

    Başlık çevirisi yok

    ESRA KARATÜRK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    1996

    Elektrik ve Elektronik MühendisliğiHacettepe Üniversitesi

    Y.DOÇ.DR. A. SALİM KAYHAN

  2. Tez No

    62675

    Öğretmenlerin ders teftişi etkinliklerinde müfettişlerden beklentileri müfettişlerce gerçekleştirilme düzeyleri (Niğde ili örneği)

    Teachers expectation from the inspectors, during their inspection of the lectures and the realization level of this expectation

    OĞUZ ÖZBEK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    1997

    Eğitim ve ÖğretimAnkara Üniversitesi

    Eğitim Yönetimi ve Planlaması Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. KASIM KARATÜRK

  3. Tez No

    72543

    Polisin insan hakları eğitimi

    Human rights education of the police

    BİLAL SEVİNÇ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    1998

    Eğitim ve ÖğretimAnkara Üniversitesi

    Eğitim Yönetimi ve Planlaması Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. KASIM KARATÜRK

  4. Tez No

    100054

    Yükseköğrenim görmek amacıyla Türk Cumhuriyetleri ile Türk akraba topluluklarından Türkiye`ye gelen öğrencilerin eğitim maliyeti ve yaşadıkları sorunlar

    Education cost and problems of students that have come to Turkey for having their higher education from Turkish republics and Turkish parent societies

    MUSA KODAL

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2001

    Eğitim ve ÖğretimAnkara Üniversitesi

    Eğitim Bilimleri Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. KASIM KARATÜRK

  5. Tez No

    196054

    Cruciferae familyasına ait bazı türlerde biyolojik aktivite çalışmaları

    Biological activity studies on some species of Cruciferae

    HAYRETTİN OTURGAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2007

    Eczacılık ve FarmakolojiMarmara Üniversitesi

    Farmakognozi Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. MELEK ULUSOYLU DUMLU

  6. Tez No

    213354

    Kıyı hidrodinamiğine ilişkin dalga denklemlerinin çözümlenmesinde kısmi diferansiyel denklem uygulamaları

    Application of partial differential equations to solving wave equations related to coastal hydrodynamics

    FUAT KARATURP

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2007

    İnşaat MühendisliğiCelal Bayar Üniversitesi

    İnşaat Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF.DR. ÜMİT GÖKKUŞ

Geri Dön