Santrifügasyon, dondurma çözdürme ve tekrar santrifügasyon işlemlerinin özellikli koagülasyon parametrelerine etkisi ve bu etkilerin prokoagülan fosfolipidlerle ilişkisi
Effects of centrifugation, freezing, thawing, and re-centrifugation as confirmed by pro-coagulant phospholipids on specific coagulation parameters
- Tez No: 493183
- Danışmanlar: PROF. DR. GONCAGÜL HAKLAR
- Tez Türü: Tıpta Uzmanlık
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Özellikli koagülasyon, prokoagülan fosfolipitler, preanalitik faktörler, Spesific coagulation tests, procoagulant phospholipids, preanalytical factors
- Yıl: 2017
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Marmara Üniversitesi
- Enstitü: Tıp Fakültesi
- Ana Bilim Dalı: Tıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Biyokimya Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: 52
Özet
Özellikli koagülasyon testleri maliyetleri yüksek olduğundan rutin olarak çalışılmamakta, yeterli örnek sayısına ulaşılana kadar plazmaları ayrılıp dondurularak saklanmaktadır. Bu örnekler için preanalitik faktörler göz önünde bulundurulmalıdır. Dolaşımdaki hücrelerden (trombosit, eritrosit, lökosit) ve damar endotelinden kaynaklanan prokoagülan fosfolipitler ise koagülasyon testlerinin sonuçlarını etkilemektedir. Çalışmamızda örnek hazırlama sırasındaki santrifügasyon ile dondurma sonrası çözdürme işlemlerinin ve prokoagülan fosfolipitlerin özellikli koagülasyon testlerine etkisini incelenmeyi amaçladık. Çalışmamıza yaş aralığı 25-35 olan, sigara ve koagülasyon parametrelerini etkileyecek ilaç kullanımı olmayan 30 sağlıklı gönüllü alındı. Sitratlı tüpe alınan örneklerden tek santrifüj grubu için 1500xg'de 15 dakika, çift santrifüj grubu 30 dakika santrifüj edilerek elde edilen plazma örnekleri porsiyonlandı. Örneklerin bir kısmı taze çalışıldı, -20 ºC'de 24 saat dondurulan diğer örnekler ise 37ºC su banyosunda 5 veya 15 dakikada çözdürüldü. Üçüncü alt gruba ise 5 dakikalık çözdürme işlemi sonrasında resantrifüj işlemi uygulanarak çalışıldı. Çalışmamızda belirlediğimiz faktör testlerinin (V, VIII, IX, X) prokoagülan fosfolipitlerden etkilenmediği görüldü. Labil olan faktör V ve faktör VIII'in santrifügasyon, dondurma ve çözdürme işlemlerinden etkilendiği, faktör IX, X, protein C, protein S ve trombin jenerasyon testlerinin değişken koşullarda stabil olduğu gözlemlendi. Faktör II testinde önerilen tek santrifüje göre çift santrifüjün daha uygun olduğu saptandı. APCR testi için çift santrifüj işlemi uygunken, lupus antikoagülan testinde özellikle önerilen çift santrifüj işleminin tek sanrifüj işlemine göre test sonuçlarında anlamlı fark yaratmadığı saptandı.
Özet (Çeviri)
Specific coagulation markers are generally aliquoted, stored and batch analyzed for economic efficiency. Preanalytical factors should be carefully considered for these samples. The presence of pro-coagulant phospholipids derived from circulating (platelets, white blood cells, red blood cells) and non-circulating (endothelial) cells within the vasculature may affect the results. In our study, we aimed to look for the effect of centrifugation, freezing, thawing conditions and procoagulant phospholipid concentrations on specific coagulation markers. Blood samples were drawn from 30 non-smoking healthy donors into citrated tubes. None of the donors had a known coagulation defect or were treated with drugs that might affect coagulation function. Samples were centrifuged at 1500xg for 15 minutes, once or twice and aliquoted. Some of the plasma samples were analyzed fresh or frozen at -20°C for 24 h. For observing the effects of thawing and re-centrifugation, frozen samples were thawed in a 37°C thermostat controlled water bath in a duration of 5 and 15 minutes and analyzed, whereas some were re-centrifuged before analysis. We observed that spesific coagulation test results (FV, FVIII, FIX and FX) were not affected from the procoagulant phospholipid concentrations. Centrifugation, freezing and thawing significantly affect FV and FVIII measurements, whereas factor IX, X, protein C, protein S and thrombin generation tests were stable. Double centrifugation seemed appropriate for factor II assay although single cenrifugation was suggested by manufacturer. Also for APCR, double centrifugation must be preffered. Finally, lupus anticoagulant test were found stable for each condition.
Benzer Tezler
- Atrisorb uygulanmış ve radikal süpürücü enzimler (superoxide dismutase (SOD) ve catalase (CAT) verilmiş köpeklerin dişeti dokularında radikal süpürücü enzimlerin (SOD, CAT ve glutathione peroxidase) aktivitelerinin zamana göre değişimi
The activity changes of SOD, CAT and glutathione peroxidase in atrisorb applied and radiacal scavenging enzymes 'superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT)' delivered periodontal tissues of dogs
ELDAR ALİYEV
- Bruselloz tanısında jel santrifügasyon yönteminin tanısal performansının değerlendirilmesi
Evaluation of the diagnostic performance of gel centrifugation method in the diagnosis of brucellosis
ERDİNÇ PİRLİ
Yüksek Lisans
Türkçe
2017
Klinik Bakteriyoloji ve Enfeksiyon HastalıklarıMarmara ÜniversitesiTıbbi Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. GÜNER SÖYLEDİR
- Migrasyon-sedimentasyon yönteminin semen hazırlamadaki etkinliğinin santrifügasyon kullanılan yöntemle karşılaştırılarak değerlendirilmesi
Efficacy of migration-sedimentation compared to methodswith centrifugation for sperm preparation
SEVİL KIRATLI
Yüksek Lisans
Türkçe
2016
Histoloji ve EmbriyolojiGaziantep ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MEHMET YÜNCÜ
DOÇ. DR. İSKENDER SİNAN ÖZKAVUKCU
- Açıklanamayan infertilite nedeniyle kontrollü ovaryan hiperstimülasyon ve intrauterin inseminasyon uygulanan hastalarda ıuı öncesi sperm hazırlama tekniklerinden swim up ve dansite gradient santrifugasyon yöntemlerinin gebelik başarısı üzerine etkilerinin araştırılması
The effects of swim up and density gradient centrifugation sperm preparation techniques on pregnancy success in patients with unexplained ınfertility who undergone controlled overian hyperstimulation and ıntrauterine ınsemination
ÖZGÜR KARA
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2011
Kadın Hastalıkları ve DoğumHacettepe ÜniversitesiKadın Hastalıkları ve Doğum Ana Bilim Dalı
PROF. DR. G. SERDAR GÜNALP
- Hindi (Meleagris gallopavo) karaciğer dokusundan tiyoredoksin redüktaz enziminin saflaştırılması, karakterizasyonu ve bazı metal iyonlarının enzim aktivitesi üzerine inhibisyon etkilerinin incelenmesi
Purification and characterization of thioredoxin reductase enzyme from Turkey (Meleagris gallopavo) liver tissue and investigation of the inhibition effects of some metals on enzyme activity
YUSUF TEMEL