FSH promotes progesterone synthesis and output in human granulosa cells without luteinization
FSH insan granüloza hücrelerinde lüteinizasyon olmadan progesteron sentezini ve salınımını uyarıyor
- Tez No: 502599
- Danışmanlar: DOÇ. DR. ÖZGÜR ÖKTEM
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyoloji, Kadın Hastalıkları ve Doğum, Moleküler Tıp, Biology, Obstetrics and Gynecology, Molecular Medicine
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2017
- Dil: İngilizce
- Üniversite: Koç Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Üreme Biyolojisi Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 58
Özet
Günümüz üremeye yardımcı tedavi (ÜYTE) uygulamalarında hipofiz bezini baskılamak için kullanılan GnRH analogları prematür LH piki görülme sıklığını IVF sikluslarında %2'nin altına düşürmüştür. Bununla birlikte, geç foliküler fazda LH piki öncesi serum progesteron seviyelerinde artış görülme sıklığı GnRH agonist ile stimüle edilen IVF sikluslarında %35'i ve GnRH antagonist ile stimüle edilen sikluslarda da %38'i bulmaktadır. Serum progesteron düzeylerinde ovülasyon öncesi görülen prematür artış IVF sikluslarında endometriyal histolojiyi ve endometriyal gen ekspresyonlarını değiştirerek reseptiviteyi azaltabilmektedir. Bunun sonucunda da taze embryo transferlerinde düşük implantasyon ve klinik gebelik oranlarıyla karşılaşılmaktadır. Prematür progesteron yükselmesinin doğal sikluslara oranla stimüle sikluslarda görülmesi ve stimülasyonun derecesiyle kuvvetli korelasyon göstermesi bu prematür yükselmeden FSH stimülasyonun direkt olarak sorumlu olduğunu düşündürmektedir (hCG günü estradiol düzeyi, antral folükül sayısı ≥ 14mm ve elde edilen oosit sayısı). Bu hipotezi araştırmak amacıyla düzenlenen deneysel dizaynda cevap aranılan sorular şunlardır: 1) FSH uygulaması granüloza hücrelerinde progesteron üretimini 3β-HSD geninin ekspresyonunu yükselterek mi stimüle etmektedir? 2) FSH uygulaması ile ovaryan seks steroidogenez enzimlerinin ekspresyonlarında görülen yükselme korelasyon göstermekte midir? Bu amaçla lüteinze olmayan mitotik granüloza hücreleri ve over kortikal örnekleri DMEM-F12 kültür medyumu kullanılarak mililitre başına 12.5, 25 ve 50 mIU olmak üzere üç farklı FSH dozu ile farklı zaman aralıklarında inkübe edilmiştir. İnkübasyon periyotları sonunda steroidogenik enzimlerde FSH'a bağlı meydana gelen değişimler mRNA düzeyinde qRT-PCR ile ve protein düzeyinde western blot ile incelenmiştir. In vitro E2 ve Progesteron düzeylerini elektrokemiluminesans (ECLIA) methoduyla ölçülmüştür. Son olarak da 3β-HSD'nin protein ekspresyonunun yanı sıra işlevini de gösterebilmek için spektrofotometrik method ile enzimatik aktivitesine bakılmıştır. Bu tez, gonadotropin stimülasyonu uygulanan sikluslarda foliküler faz sırasında açıklanamayan P yükselmesine moleküler bir açıklama sağlamaktadır. Sunulan bulgular, IVF tedavisi gören kadınlarda prematür P artışını önlemeye yönelik potansiyel mekanizmaları ortaya çıkartmak için yapılacak çalışmalara örnek oluşturabilir.
Özet (Çeviri)
In the modern era of assisted reproductive technologies, pituitary suppression with gonadotropin releasing hormone (GnRH) analogues has drastically reduced the incidence of premature luteinizing hormone (LH) surge to less than 2% per stimulated in vitro fertilization (IVF) cycle. Nevertheless, subtle elevations in serum progesterone (P) level during late follicular phase may still occur without LH surge in up to 35% and 38% of the stimulated IVF cycles with GnRH agonist and antagonist protocols, respectively. The premature rise in serum P before ovulation trigger may reduce the success of pregnancy in stimulated IVF cycles by advancing endometrial histology and impairing endometrial receptivity when fresh embryo transfer (ET) is performed. It is well-documented that serum P level at the time of human chorionic gonadotropin (hCG) administration is significantly correlated with the magnitude of ovarian response to stimulation (antral follicle count ≥ 14mm, estradiol level at the time of hCG administration and the number of eggs retrieved). Even though the underlying mechanism of this event is obscure its almost exclusive occurrence in stimulated but not in natural IVF cycles raises a fundamental question as to whether FSH stimulation itself might be responsible for P output from granulosa cells without luteinization. To address this issue we designed an experimental study and investigated 1) whether FSH stimulates granulosa cell progesterone output by upregulating the expression of 3β-hydroxysteroid dehydrogenase (3β-HSD); the enzyme that converts pregnenolone to progesterone, and 2) whether FSH induces proportional increases in the expression of ovarian steroidogenic enzymes (StAR, SCC, 3β-HSD, 17α-OH, 17β-HSD and aromatase). To this end, non-luteinizing, mitotic and FSH-responsive human granulosa cells (HGrC1) and human ovarian tissue samples were stimulated with recombinant FSH at different concentrations and time points. To mimic the ovarian micro-environment in the ovary in stimulated IVF cycles, FSH was used at concentrations corresponding to its endogenous levels in the sera of IVF patients undergoing ovarian stimulation with rec-FSH. FSH induced changes in the enzymatic activity of 3β-HSD were measured, and the expression of the ovarian steroidogenic enzymes were analyzed by quantitative real-time PCR and western blot. FSH responsiveness of these enzymes was further investigated after FSH receptor was up-regulated with activin-A, and down-regulated with shRNA technology. This thesis provides a molecular explanation for the largely unexplained phenomenon of P rise during the follicular phase of gonadotropin stimulated IVF cycles prior luteinization. Presented findings may pave the research to uncover potential mechanisms for preventing premature P rise that appears to be associated with inferior outcomes in women undergoing IVF.
Benzer Tezler
- Study of inhibin A and 17-α hydroxyprogesterone concentration with AMH, FSH, LH during the menstrual and pregnant women in iraq
Irak'ta regl ve hamile kadınlarda AMH, FSH, LH ile ınhıbın A ve 17-α hidroksiprogesteron konsantrasyonunun çalışması
ALI HUSSEIN ALI AL-RUBAYE
Yüksek Lisans
İngilizce
2024
BiyokimyaÇankırı Karatekin ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SALİHA ALYAR
DR. ÖĞR. ÜYESİ HUSSEIN ALI NAYYEF
- Sıçanlarda oluşturulan polikistik over modelinde YAP/TAZ inhibitörü verteporfin'in etkisi
The effect of the YAP/TAZ pathway inhibitor verteporfin on a letrozol inducued rat model of polycystic ovarian syndrome
YİĞİTCAN ÇİFTÇİ
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2022
Histoloji ve EmbriyolojiAdnan Menderes ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. KEMAL ERGİN
- Klinefelter hastalarında PAI-1 geni varyantlarının trombofili gelişimi üzerindeki etkisinin incelenmesi
The observation of PAI-1 gene variants on development of thrombophilia in klinefelter patients
BURÇİN ERKAL
- Investigation of clinical significance of AMH, IL10 and IL-6 and some biochemical tests as prognostic factors in patients with prostate cancer in Al-Anbar city, Iraq
Irak'ın Al-Anbar şehrindeki prostat kanserli hastalarda prognostik faktör olarak bazı biyokimyasal testlerle AMH, IL10 ve IL-6 ve klinik önemi
FOUAD KHALAF KHUDHUR AL-KHULAIFAWI
Yüksek Lisans
İngilizce
2023
BiyokimyaÇankırı Karatekin ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SALİHA ALYAR
- Puberte Prekoks tanılı kız çocuklarında paraoksonaz enzim aktivitesinin değerlendirilmesi
Evaluation of paraoxonase enzyme activity in girls diagnosed with Puberty Precox
TUĞÇE ŞEN
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2023
Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıBalıkesir ÜniversitesiÇocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ALİ ATAŞ