Geri Dön

Eğirdir (Isparta)'de yetiştirilen elmalardan polifenol oksidaz enziminin saflaştırılması, karakterizasyonu ve polifenol oksidaz enziminin saflaştırılması için alternatif bir yöntem geliştirilmesi

Characterization, purification of polyphenol oxidase enzyme from apples which are grown in eğirdir (Isparta) and development an alternative method for purification of polyphenol oxidase enzyme

  1. Tez No: 505941
  2. Yazar: ESRA ÇELİK
  3. Danışmanlar: DR. ÖĞR. ÜYESİ DUDU DEMİR
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Ziraat, Agriculture
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2018
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Süleyman Demirel Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Tarımsal Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 70

Özet

Yumuşak çekirdekli meyveler içerisinde yer alan elma (Malus communis L.) gerek dünyada gerekse Türkiye'de en çok üretilen ve tüketilen meyve türleri arasında yer almaktadır. Dünya elma üretiminde Türkiye dördüncü sıradadır. Türkiye'de ise Isparta ili elma üretiminde ilk sıradadır. Türkiye'de elma üretiminde Isparta ilinin Eğirdir İlçesi önemli bir yere sahiptir. İlçede ağırlıklı olarak Golden Delicious, Starking Delicious ve Granny Smith elma çeşitleri yetiştirilmektedir. Polifenol oksidaz enzimi (PPO) aktif merkezinde bakır bulunduran oksidoredüktaz sınıfında yer alan bir enzimdir. PPO, fenolaz, tirozinaz, katekolaz, katekoloksidaz, o-difenoloksidaz, mono fenoloksidaz ve kresolaz olarak da bilinmektedir. PPO'lar substrat spesifikliklerine ve etki mekanizmalarına göre başlıca üç tip sınıflandırılmışlardır. Bunlar; tirozinaz (EC 1.14.18.1), katekolaz (EC 1.10.3.1) ve lakkaz (EC 1.10.3.2)'dır. Bu çalışmada; Eğirdir ilçesindeki Golden Delicious, Starking Delicious ve Granny Smith elma çeşitlerinden Sepharose 4B-L-tirozin-p-aminobenzoik asit afinite jeli kullanılarak PPO enzimi saflaştırılmıştır. Golden Delicious, Starking Delicious ve Granny Smith elma çeşitlerinden sırası ile 45.92, 128.95 ve 25.60 saflaştırma derecesine ulaşılmıştır. Ayrıca, PPO enzimini saflaştırmak için alternatif bir yöntem de geliştirilmiştir. PPO enzimini saflaştırmak için geliştirilen yeni afinite jeli, Siyanojen Bromür (CNBr) ile aktifleştirilen Sepharose-4B'ye, L-tirozin uzantı kolu bağlandıktan sonra ligand olarak o-aminobenzoik asitin L-tirozine kenetlenmesi sonucu sentezlenmiştir. Bu jel kullanılarak da PPO enzimi aynı kaynaklardan saflaştırılmıştır. Golden Delicious, Starking Delicious ve Granny Smith elma çeşitlerinden sırası ile 12.81, 101.59 ve 22.69 saflaştırma derecesine ulaşılmıştır. Saflaştırılan PPO enzimlerinin katekol substratına karşı KM ve Vmax değerleri Linewear-Burk yöntemi ile Golden Delicious, Starking Delicious ve Granny Smith elma çeşitleri için sırasıyla; 50 mM ve 5000 U/mLdak; 20 mM ve 25000 U/mLdak; 40 mM ve 20000 U/mLdak olarak belirlenmiştir.

Özet (Çeviri)

Apple (Malus communis L.), a pome fruit is among the most widely produced and consumed fruit species both around the world and in Turkey. Turkey is the fourth largest apple producer in the world. Isparta is number one apple producing province of Turkey. Eğirdir district has an important place in apple production in Turkey and Golden Delicious, Starking Delicious and Granny Smith varieties are grown widely in Eğirdir district. Polyphenol oxidase (PPO) is a member of oxidoreductase enzymes with a copper in its active site. PPO is also known as phenolase, tyrosinase, catecholase, catecholoxidase, o-difenoloxidase, mono phenoloxidases and kresolase. PPOs are classified in to three groups including tyrosinase (EC 1.14.18.1), catecholase (EC 1.10.3.1) and laccase (EC 1.10.3.2) based on their subsrate specificities and action mechanisms. In this study, polyphenol oxidase enzyme was purified from Golden Delicious, Starking Delicious and Granny Smith apple varieties grown in Eğirdir. Using affinity gel prepared from Sepharose 4B-L-tyrosine-p-aminobenzoic acid, 45.92, 128.95 and 25.60 purification folds were achieved in Golden Delicious, Starking Delicious and Granny Smith varieties respectively. In addition, an alternative method was developed to purify the PPO enzyme. A novel affinity gel was synthesized by coupling L- tyrosine to Sepharose-4B by Cyanogen bromide (CNBr) activated, then o-aminobenzoic acid was coupled to L-tyrosine as a ligand for purifing PPO enzyme. By using the new gel PPO enzyme was also purified from the same sources. 12.81, 101.59 and 22.69-fold purifications were achieved from Golden Delicious, Starking Delicious and Granny Smith varieties, respectively. The KM and Vmax values of purified PPO enzyme towards catechol substrate determined by Lineweaver–Burk method were found to be 50 mM and 5000 U/mLmin; 20 mM and 25000 U/mLmin; 40 mM and 20000 U/mLmin for Golden Delicious, Starking Delicious, Granny Smith varieties, respectively.

Benzer Tezler

  1. Eğirdir gölü balıklarında hipofiz bezinin anatomik ve histolojik yapısı üzerinde bir araştırma

    Başlık çevirisi yok

    M. RÜŞTÜ ÖZEN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    1990

    BiyolojiAkdeniz Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. GÜLŞEN TİMUR

  2. Elmada 'Kaşel 37xdelbarestivale' f1 populasyonunda bazı meyve kalite kriterlerinin karakterizasyonu

    Characterization of some of the fruit quality characteristics on apple 'Kasel 37xdelbarestivale' f1 population

    MURAT AYDIN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    BiyoteknolojiÇukurova Üniversitesi

    Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. NESİBE EBRU KAFKAS

  3. Eğirdir ekolojisinde yetiştirilen erkenci yerli armut tiplerinin (Pyrus communis L.) fenolojik, pomolojik ve morfolojik özelliklerinin belirlenmesi

    Determination of phenological, pomological and morphological characteristics of some early-season domestic pear (Pyrus communis L.) genotypes grown Egirdir ecological conditions

    RÜVEYDA BAĞBOZAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    ZiraatSüleyman Demirel Üniversitesi

    Bahçe Bitkileri Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. MEHMET POLAT

  4. Eğirdir (Isparta) ekolojisinde yetiştirilen geççi yerli armut (Pyrus communis L.) tiplerinin pomolojik, morfolojik ve fenolojik özelliklerinin belirlenmesi

    Determination of pomological morphological and phenological characteristics of some late-season domestic pear (Pyrus communis L.) genotypes grown Egi̇rdi̇r (Isparta) ecological conditions

    ÖZNUR AZ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    ZiraatSüleyman Demirel Üniversitesi

    Bahçe Bitkileri Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. MEHMET POLAT

  5. Isparta ili tarım ve tarım dışı topraklarından entomopatojen fungusların izolasyonu ve tanısı

    Occurance and pathogenicity of entomopathogenic fungi in cultuvated and uncultuvated soils from Isparta province in Turkey

    RECEP BAYDAR

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    ZiraatSüleyman Demirel Üniversitesi

    Bitki Koruma Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. İSMAİL KARACA

    YRD. DOÇ. DR. ÖZLEM GÜVEN