Sağlıklı ve melanoma deri hücrelerinin birlikte kültürü ile geliştirilen in vitro hücre modellerinde UV ile uyarılan genotoksik etkinin comet analiz yöntemi ile belirlenmesi
Determination of UV induced genotoxic activity by comet assay with in vitro skin models developed by co-culture of healty and melanoma cell lines
- Tez No: 536784
- Danışmanlar: DR. ÖĞR. ÜYESİ SULTAN GÜLÇE İZ
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyomühendislik, Bioengineering
- Anahtar Kelimeler: DNA Hasarı, Comet, Mikronükleus, Comet Analiz, UV Radyasyonu, β-karoten, UVA, Floresan Mikronükleus, Genotoksisite, Tanı, DNA damage, comet, comet assay, fluorescence micronukleus, micronucleus, UV radiation, UVA, genotoxicity
- Yıl: 2018
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Ege Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyomühendislik Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 115
Özet
UV radyasyonuna maruz kalmanın, açık havada çalışan yetişkinler için %10 ve toplam mevcut yıllık UV radyasyonunun (yatay düzlemdeki) kapalı alanda çalışan yetişkinler için %3 olduğu tahmin edilmektedir. Güneş yanığı, ışığa bağlı yaşlanma (fotoaging), bağışıklık sistemi bozuklukları, DNA hasarı ve deri kanseri gibi potansiyel zararlı sağlık etkileri göz önüne alındığında UV ışınlarının oluşturduğu genetik hasarların belirlenmesine ihtiyaç vardır. Bitirme tezi kapsamında UV radyasyon kaynaklı oluşan genetik hasarların in vivo yöntemlere alternatif olarak in vitro yöntemler olan comet analiz ve floresan mikronükleus testleri ile belirlenmesi amaçlanmıştır. Aynı zamanda UV radyasyona karşı koruyuculu bilinen ve dermokozmetik ürünlerde sıklıkla kullanılan β-karoten etken maddesinin etkinliğinin test edilmesi de yapılan bitirme tezinin amaçlarından biridir. Yapılan yüksek lisans tezi ile UV radyasyonun genotoksik etkisinin yadsınamaz ölçüde olduğu, güneş kremleri ve kozmetik ürünlerde bulunan β-karoten etken maddesinin ise UV radyasyonuna maruz kalınmadan önce uygulandığı takdirde oluşan genetik hasarı daha çok önlediği görülmüştür (Comet analiz; birlikte kültür sisteminde, HaCat hücre hattı: UV: %85,638, β- Karoten + UV: %18,67, UV + β- Karoten: %38,18, SK-MEL 30 hücre hattı: UV: %91,13, β- Karoten + UV: %23,67, UV + β- Karoten: %27,77, Detroit 551 hücre hattı: UV: %27,19, β- Karoten + UV: %5,35, UV + β- Karoten: %9,03- diğer deney setlerinde, HaCat hücre hattı: UV: %85,638, β- Karoten + UV: %16,92, UV + β- Karoten: %22,39, SK-MEL 30 hücre hattı: UV: %81,68, β- Karoten + UV: %16,86, UV + β- Karoten: %45,35, Detroit 551 hücre hattı: UV: %87,74, β- Karoten + UV: %29,29, UV + β- Karoten: %37,43, Floresan mikronükleus testi; birlikte kültür sisteminde, HaCat hücre hattı ile UV: %2, β- Karoten + UV: %0, UV + β- Karoten: %1; SK-MEL 30 hücre hattı ile; UV: %5; β- Karoten + UV: %3, UV + β- Karoten: %3- diğer deney setlerinde HaCat; UV: %30, β- Karoten + UV: %7, UV + β- Karoten: %16, Detroit-551; UV: %25, β- Karoten + UV: %7, UV + β- Karoten: %13 SK-MEL 30; UV: %20, β- Karoten + UV: %3, UV + β- Karoten: %8). Çalışma kapsamında comet analiz ve floresan mikronükleus yöntemleri kullanılmış ve bu yöntemlerden çıkan sonuçların birbirini destekler nitelikte olduğu görülmüştür. Uygulanan yöntemlerin optimizasyonu ile birlikte kültür sisteminde UV radyasyonu gibi ışınsal genotoksik maddelerin insert yüzeyinden geçemediği için birlikte kültürün alt tabakasındaki hücreleri etkilemediği fakat ortak besin ortamı ile birlikte kullanılan β-karoten gibi maddelerde birlikte kültür sisteminin etkili bir sistem olduğu görülmüştür. Çalışma sonuçlarının istatiksel analalizi Graphpad Prisim 5.0 programı ile tek yönlü varyans testi (ANOVA) uygulanarak yapılmıştır.
Özet (Çeviri)
It is estimated that exposure to UV radiation, in particular, is 10% for adults working in the open air and 3% for the total available annual UV radiation (horizontal plane) for indoor adults. Given the potential of harmful health effects such as sunburn, eye damage, photoaging, immune system disorders, DNA damage, and skin cancer, it is necessary to determine the genetic damage caused by UV rays. In the scope of the project, determination of genetic damage caused by UV radiation done by in vitro genotoxicity methods, comet assay and fluorescence micronucleus assay, as an alternative to in vivo methods. At the same time, testing the efficiancy of β-carotene, which is frequently used in UV protection in dermocosmetic products, is one of the aims of the thesis. In this study, we determined that UV rays cause genetic damage and β-carotene active ingredient, which is commonly used in sun creams and cosmetic products, is a protective factor against this damage especially when applied before exposure to UV rays. (Comet assay: in co-culture system, HaCat cell line: UV: 85,638%, β- Carotene + UV: 18,67%, UV + β- Carotene: 38,18%, SK-MEL 30 cell line: UV: 91,13%, β- Carotene + UV: 23,67%, UV + β- Carotene: 27,77%, Detroit 551 cell line: UV: 27,19%, β- Carotene + UV: 5,35%, UV + β- Carotene: 9,03%- in other experiment sets, HaCat cell line: UV: 85,638%, β- Carotene + UV: 16,92%, UV + β- Carotene: 22,39%, SK-MEL 30 cell line: UV: 81,68%, β- Carotene + UV: 16,86%, UV + β- Carotene: 45,35%, Detroit 551 cell line: UV: 87,74%, β- Carotene + UV: 29,29%, UV + β- Carotene: 37,43%, Fluorescence micronukleus assay; in co-culture system, Detroit 551 cell line with HaCat cell line: UV: 2%, β- Carotene + UV: 0%, UV + β- Karoten: 1%; Detroit 551 cell line with SK-MEL 30 cell line: UV: 5%; β- Carotene + UV: 3%, UV + β- Carotene: 3%- in other experimental sets: HaCat cell line; UV: 30%, β- Carotene + UV: 7%, UV + β- Carotene: 16%, Detroit-551 cell line; UV: 25%, β- Carotene + UV: 7%, UV + β- Carotene: 13%, SK-MEL 30 cell line: UV: 20%, β- Carotene + UV: 3%, UV + β- Carotene: 8%). With the optimization of the applied methods, it has been observed that the co-culture system does not provide full efficiency, it did not pass through the insert surface of the radically genotoxic substances such as UV radiation, it did not affect the cells in the lower layer of the culture, but it is an effective system in β-carotene which is used together with the common nutrient medium. Also in this study comet analysis and fluorescence micronucleus methods were used and the results obtained from these methods were found to support each other.
Benzer Tezler
- Biyoaktif bileşenler içeren terapötik nanoformülasyonüretimi, karakterizasyonu ve melanoma hücre hattıüzerinde antikanser etkinliğinin değerlendirilmesi
Production and characterisation of therapeuticnanoformulation containing bioactive components andevaluation of anticancer activity on melanoma cell line
ASLI EKENER
Yüksek Lisans
Türkçe
2024
BiyomühendislikYıldız Teknik ÜniversitesiBiyomühendislik Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. YASEMİN KILINÇ
- Dermoskopik görüntülerden melanomanın derin evrişimsel sinir ağları ile teşhisi
Diagnosis of melanoma in dermoscopic images with deep convolutional neural networks
ENES AYAN
Doktora
Türkçe
2019
Bilgisayar Mühendisliği Bilimleri-Bilgisayar ve KontrolKırıkkale ÜniversitesiBilgisayar Mühendisliği Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. HALİL MURAT ÜNVER
- Elektroporasyon yöntemiyle melanoma tedavisinde kullanılan dakarbazinin sitotoksisitesinin arttırılması üzerine çalışmalar
Studies on the enhancing of cytotoxicides of dacarbazine used treatment of melanoma by electroporation method
ALAADDİN COŞKUN
Doktora
Türkçe
2017
BiyofizikGazi ÜniversitesiBiyofizik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. AYŞE GÜLNİHAL CANSEVEN KURŞUN
- Deri kanseri tedavisine yönelik pirol katkılı amiloid tabanlı nanofibröz doku iskelesinin kullanımının araştırılması
Investigation of the use of pyrrole doped amyloid based nanofibrous scaffold for skin cancer therapy
AHMET ERSİN MEYDAN
Yüksek Lisans
Türkçe
2021
BiyomühendislikTOBB Ekonomi ve Teknoloji ÜniversitesiBiyomedikal Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. FATİH BÜYÜKSERİN
- Bronzlaştırıcı olarak kullanılan bazı bitkisel uçucu yağların sağlıklı ve kanserli deri hücreleri üzerinde sitotoksik ve apoptotik etkilerinin araştırılması
Investigation of cytotoxic and apoptotic effects of some herbal essenti?al oils used for tanning, on normal and cancer skin cells
HANDAN EMİŞOĞLU