Geri Dön

Onobrychis Tournefortii (Wild.) Desv.'in tohumundan lipolitik bir fraksiyonun saflaştırılması ve temel kinetik özelliklerinin belirlenmesi

Purification and determination of basic kinetic properties of a lipolytic fraction from the seed of Onobrychis Tournefortii (Wild.) Desv.

  1. Tez No: 542366
  2. Yazar: HİLAL KARAKAŞ
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. SALİH GÖRGÜN
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyokimya, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2018
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Sivas Cumhuriyet Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 76

Özet

Bu çalışmada, sırasıyla Q sefaroz anyon değişim ve Sefakril S-200 HR kolon kromatografilerini kullanarak, Onobrychis tournefortii (Desv.)'in tohumundan esteraz aktivitesine sahip olan lipolitik bir fraksiyon 1.361 μmol/dk.mg protein spesifik akti-vite ve 7.08 kat saflıktaki saflaştırma parametreleriyle kısmi olarak saflaştırılmıştır. Nativ-poliakrilamid jel elektroforezi (Nativ-PAGE) çalışmaları yerine getirilerek, ho-mojenat örnekleri molekül kütlelerinin 95 kDa, 59 kDa ve 42 kDa olduğu üç esterolitik band göstermiştir. Kısmi saflaştırılmış tohum esteraz fraksiyonu, 59 kDa ve 42 kDa'luk molekül kütlelerine sahip olan esteraz bantlarını içermiştir. Bu fraksiyonun sıcaklık ve pH optimumları sırasıyla 40 °C ve 8.0 olarak belirlenmiştir. Esterolitik ak-tivite üzerine dört farklı substratın (p-nitrofenil asetat; p-NPA, p-nitrofenil butirat; p-NPB, p-nitrofenil dodekanoat; p-NPD, p-nitrofenil palmitat; p-NPP) etkisi karşılaştı-rıldığında, en yüksek aktivite p-NPB üzerinde sergilenmiştir. Substrat olarak p-NPB kullanılarak, Vmax ve Km değerleri sırasıyla 0.2635 μmol.ml-1dk-1 ve 0.0808 mM olduğu bulunmuştur. Sonuçlarımız bu bitki türünün tohumundan daha saf bir esteraz enzimi elde etmek için, daha fazla kromatografik adımın gereksinildiğini önermektedir.

Özet (Çeviri)

In this study, a lipolytic fraction having esterase activity from the seed of Onobrychis tournefortii (Desv.) was partially purified with purification parameters of 1.361 μmol/dk.mg protein specific activity and 7.08 fold purity, using Q sepharose anion exchange and Sephacryl S 200 HR column chromatographies, respectively. Homoge-nate samples showed three esterolytic bands in which molecular masses are 95 kDa, 59 kDa and 42 kDa, carrying out Native-polyacrylamide gel electrophoresis (Native-PAGE) studies. Partially purified seed esterase fraction consisted of the esterase bands having molecular masses of 59 kDa and 42 kDa. Temperature and pH optimums of this fraction were determined as 40 °C and 8.0, respectively. When compared to the effects of four different substrates (p-nitrophenyl acetate; p-NPA, p-nitrophenyl butyrate; p-NPB, p-nitrophenyl dodecanoate; p-NPD, p-nitrophenyl palmitate; p-NPP) on the esterolytic activity, the highest activity was exhibited on p-NPB. Using p-NPB as a substrate, Vmax and Km values were found to be 0.2635 μmol.ml-1dk-1, and 0.0808 mM, respectively. Our results have suggested that more chromatographic steps are needed to obtain the more pure esterase enzyme from the seed of this plant species.

Benzer Tezler

  1. Bazı yabani korunga (Onobrychis sp.)türlerinin kromozom sayılarının tespiti ve karyotip analizi

    Determination of chromosome number and karyotype analysis in some wild type sainfoins

    ESRA AKÇELİK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2009

    BiyolojiAnkara Üniversitesi

    Tarla Bitkileri Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. CENGİZ SANCAK

  2. Bazı endemik onobrychis türlerinin kolon kanseri hücreleri üzerindeki etkilerinin incelenmesi

    Investigation of the effects of some endemic species of onobrychis on colon cancer cells

    MUHAMMET VOLKAN BÜLBÜL

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2017

    Histoloji ve Embriyolojiİstanbul Medipol Üniversitesi

    Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. İLKNUR KESKİN

  3. Onobrychis cinsine ait bazı türlerin görüntü işleme ve makine öğrenmesi tabanlı araştırılması

    Research on image processing and machine learning of some species of Onobrychis genus

    MEHMET SELİM KIZGIN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2024

    BiyolojiFırat Üniversitesi

    Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. ZAFER ÇAMBAY

  4. Türkiye'de doğal olarak yetişen Hymenobrychis seksiyonuna ait bazı Onobrychis türlerinin karyolojik özellikleri

    Karyological characteristics of some Onobrychis species belonging to Hymenobrychis section naturally growing in Turkey

    YASEMİN ABUŞ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2013

    ZiraatEskişehir Osmangazi Üniversitesi

    Tarla Bitkileri Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. SÜLEYMAN AVCI

  5. Engizek dağı (Kahramanmaraş) vejetasyonu

    Vegetation of Engizek mountain (Kahramanmaraş)

    HAYRİ DUMAN

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    1990

    BotanikGazi Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. MECİT VURAL