Geri Dön

Ubikuitini aktive edici enzim E1'in kan ve plasentadan saflaştırılması, antikor üretilmesi ve doku dağılımının incelenmesi

The Purification of E1 (Ubiquitin activating enzyme) from blood and placenta, antibody production and the tissue distribution of E1

PDF İndir

  1. Tez No: 54657
  2. Yazar: AHMET KIZILTUNÇ
  3. Danışmanlar: PROF.DR. YAŞAR NURİ ŞAHİN
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Biyokimya, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 1996
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Atatürk Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 58

Özet

II ÖZET Ubikuitin 76 amino asitlik, sadece ökaryot hücrelerin zarında, sitoplazmasında ve çekirdeklerinde bulunan bir proteindir. Bu proteinin bir çok fonksiyonu yanında en iyi bilineni hücre içerisinde anormal, kısa ömürlü ve düzenleyici proteinlerin yıkımında görev almasıdır. Bu amaçla Ub, ATP'nin varlığında multienzim yolunun ilk enzimi olan Ub aktive edici enzimle (E1) aktive edilip fonksiyon kazanarak, Ub taşıyıcı enzim (E2) ve Ub-ligaz (E3) enzimleri üzerinden hedef proteine bağlanmaktadır. E1 enziminin plasenta dokusunda ki varlığını araştırmak gayesi ile kan ve plasentadan sataştırıldı ve doku dağılımı incelendi. Enzim DEAE-selüloz ve afinite kromatoğrafisi teknikleri ile materyallerden saflaştırıldı. Saflaştırılan E1 enziminin saflığı SDS-PAGE de test edildi. ELISA ve Immünohistokimyasal çalışmalarda kullanılmak üzere E1 enzim proteinine karşı tavşanlarda antikor üretildi. Üretilen antikorun spesifikliği ELISA yöntemi ile test edildi. Plasenta doku kesitlerinde E1 enziminin varlığını araştırmak için üretilen antikor ile doku kesitleri immünohistokimyasal olarak boyandı. Boyama sonucu plasenta desidual hücrelerinin bazılarının sitoplazmalarının boyandığı tesbit edilerek plasenta dokusunda E1 enziminin var olduğuna karar verildi.

Özet (Çeviri)

SUMMARY THE PURIFICATION OF E1 (UBIQUITIN ACTIVATING ENZYME) FROM BLOOD AND PLACENTA, ANTIBODY PRODUCTION AND THE TISSUE DISTRIBUTION OF E1 Ubiquitin with 76 amino acid residues is only found in cytoplasmic membranes, cytoplasms and nuclei of eukaryotic cells. In addition to its many functions, the most known one is that it plays a role in degradation of abnormal, short-lived and regulatory proteins. For this purpose, Ub in the presence of ATP, is activated by E1, which is the first enzyme of multienzyme pathway, and binds to target proteins via E2 (Ub carrying enzyme) and E3 (Ub-ligase). Ub was purified from both placenta and blood, and its tissue distribution was investigated. The enzyme was purified by DEAE-cellulose and affinity chromatography from the materials inquestion. The purify of the purified E1 enzyme was tested by SDS- PAGE. An antibody against E1 enzyme was produced for the use in ELISA and immunohistochemical studies. The spesificity of the antibody produced was tested with ELISA. Tissue sections were stained immunohistochemically with the antibody produced for the investigation of the presence of E1 enzyme in placental sections. It was concluded that E1 enzyme is present in placental tissue, since some of the placental decidual ceil cytoplasms showed staining.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    270432

    Tagging proteins: Sumoylation mechanism by molecular modeling and molecular dynamics simulations

    Proteinlerin etiketlenmesi: Moleküler modelleme ve moleküler dinamik simulasyonları ile sumolanma mekanizması

    ELİF NİHAL KORKMAZ

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2010

    BiyofizikBoğaziçi Üniversitesi

    Kimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. TÜRKAN HALİLOĞLU

  2. Tez No

    202901

    Çeşitli ubiquitin aktive edici E1 enziminlerinin ubiquitin benzeri domainlerinin klonlanması, ekspresyonu, saflaştırılması ve izotopik olarak işaretlenmesi

    Clonning, expression, purification and isotopic labeling of ubiquitin-like domains of various ubiquitin activating E1 enzymes

    NAZLI SÖKMEN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2007

    KimyaMuğla Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. EMİNE SONAY ELGİN

  3. Tez No

    521377

    The ubiquitin/proteasome system related role of Bag-1L in breast cancer

    Bag-1L'in ubikuitin/proteazom sisteminde rolünün meme kanserinde incelenmesi

    SEVİLAY ACAR

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2018

    Biyolojiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. GİZEM DİNLER DOĞANAY

  4. Tez No

    318281

    ISG15 aktive edici e1 enzimi Ube1L-uf domaıninin NMR solüsyon yapısının belirlenmesi ve bazı insan ubiquitilasyon E3 enzimleri ve RIG-1-CARDs'ın klonlanması, ekspresyonu ve saflaştırılması

    NMR solution structure of ISG15 activating enzyme Ube1L uf-domain and cloning, expression, purification of some ubiquitin E3 enzymes and RIG-I CARDs

    ÇAĞDAŞ DAĞ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2012

    BiyokimyaMuğla Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. EMİNE SONAY ELGİN

  5. Tez No

    334415

    RIG-I-CARD1, RIG-I-CARD2, RNF125-Ring finger ve TRIM25-SPRY domainlerinin yapısal çalışmalarda kullanılmak amacıyla üretilmesi ve NMR ile karakterizasyonu

    Production and nmr characterization of RIG-I-CARD1, RIG-I-CARD2, RNF125-Ring finger and TRIM25-SPRY for structural studies

    GÜL DEMİR

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2013

    BiyokimyaMuğla Sıtkı Koçman Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. EMİNE SONAY ELGİN

Geri Dön