Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis enfeksiyonu teşhis edilen koyunların gama-interferon, interlöykin-10 ve neopterin düzeyleri
Gamma-interferon, interleukin-10 and neopterin levels of sheep diagnosed with Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis infection
- Tez No: 548910
- Danışmanlar: PROF. DR. HÜLYA TÜRÜTOĞLU
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Veteriner Hekimliği, Veterinary Medicine
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2019
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Burdur Mehmet Akif Ersoy Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Mikrobiyoloji (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 190
Özet
Paratüberküloz, Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis (Map) tarafından oluşturulan, kronik, granülomatöz enterit ile karakterize bir hastalıktır. Hastalığın evrelerine göre tanıda farklı testler kullanılmaktadır. Bu çalışma ile koyunlarda interferon gama (IFN-γ) ELISA, antikor ELISA, Ziehl-Neelsen (ZN) boyama, polimeraz zincir reaksiyonu (PZR) ve kültür yöntemleri ile hastalığın araştırılması ve pozitif ve negatif olarak belirlenen koyunlarda antikor, IFN-γ, interlöykin-10 (IL-10) ve neopterin (NP) düzeylerinin karşılaştırılması amaçlandı. Bu amaçla, Burdur ilinde 15 koyun sürüsünde 2 yaş ve üzerindeki onar hayvandan olmak üzere toplam 150 kan ve gaita örneği alındı. Kan serumu örnekleri Map'e karşı gelişen antikorlar, plazma örnekleri ise IFN-γ yönünden ELISA ile incelendi. Gaita örnekleri ise ZN boyama, PZR ve kültür için kullanıldı. Dekontaminasyon sonrası gaita örneklerinin HEYM ve modifiye Middlebrook 7H10 agar besiyerlerine ekimleri yapıldı. Aynı gaitalardan izole edilen DNA örnekleri Map'e spesifik iki primer çifti (P90/P91 ve 150C/921) kullanılarak klasik ve nested PZR ile incelendi. Gaita ve Map izolatlarından elde edilen DNA örnekleri IS1311 gen bölgesine yönelik uygulanan PZR işleminden sonra restriksiyon endonükleaz analizi (REA) ile tiplendirildi. Pozitif ve negatif olarak belirlenen kırkar koyunun antikor, IFN-γ, IL-10 ve NP düzeyleri ortalama optik dansite (OD) değerlerine göre karşılaştırıldı. Çalışmadaki 150 koyundan 73'ünün enfekte olduğu belirlendi. PZR-REA ile enfeksiyona neden olan Map'in koyun tipi olduğu tespit edildi. Testlerin hepsinde pozitif sonuç veren bir koyun tespit edilemedi ve en yüksek pozitiflik oranları ZN boyama (%27,33) ve PZR (%26,66) ile saptandı. Bunu sırasıyla IFN-γ ELISA (%22), antikor ELISA (%10,67) ve kültür (%3,33) yöntemleri izledi. Kültür sonuçları ile karşılaştırıldığında; ZN boyama, PZR, IFN-γ ve antikor ELISA testlerinin sensitivite ve spesifiteleri sırasıyla %80-%74, %60-74, %20-%77, %20-%89 olarak hesaplandı. Paratüberküloz yönünden pozitif ve negatif olarak değerlendirilen hayvanların yaş grupları arasında istatistiksel olarak bir fark (p>0,05) saptanmazken, diyare bulgusu ve vücut kondüsyon skorları arasındaki fark (p0,05) aksine, antikor, IFN-γ ve NP düzeyleri farklı bulundu (p
Özet (Çeviri)
Paratuberculosis is a disease caused by Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis (Map) and characterized by chronic granulomatous enteritis. Different tests are used in the diagnosis according to the stage of the disease. The purpose of the present research was to investigate paratuberculosis infection in sheep by interferon gamma (IFN-γ) ELISA, antibody ELISA, Ziehl-Neelsen (ZN) staining, polymerase chain reaction (PCR) and culture methods and to compare the antibody, IFN-γ, interleukin -10 (IL-10) and neopterin (NP) levels between animals determined as positive and negative for paratuberculosis. Two years and older sheep were included in the study. Ten sheep from each of 15 sheep farms were selected randomly in Burdur province and total 150 blood and fecal samples were collected. Blood serum samples were examined for antibodies against Map and plasma samples were analyzed by ELISA for IFN-γ. Stool samples were used for ZN staining, PCR and culture. After decontamination, stool samples were planted on HEYM and modified Middlebrook 7H10 agar media. The DNA samples extracted from the fecal samples were analyzed by classical and nested PCR using two Map specific primer pairs (P90/P91 and 150C/921). DNA samples obtained from stool samples and Map isolates were typed by restriction endonuclease analysis (REA) after PCR procedure for IS1311 gene region. The levels of antibody, IFN-γ, IL-10 and NP in 40 sheep determined as positive and 40 sheep determined as negative were compared based on the mean optical density (OD) values. Of the 150 sheep in the study, 73 were found to be infected. The type of Map was determined to be sheep type by PCR-REA. None of 73 sheep were positive for all of the tests and the highest rate of positivity was determined by ZN staining (27,33%) and PCR (26,66%). This was followed by IFN-γ ELISA (22%), antibody ELISA (10.67%) and culture (3.33%). According to the culture results; the sensitivity and specificity of the ZN staining, PCR, IFN-γ and antibody ELISA tests were calculated as 80-74%, 60-74%, 20-77%, 20-89% respectively. There was no statistically significant difference (p>0,05) between the age groups of animals determined as positive and negative for paratuberculosis, whereas the difference between diarrhea and body condition scores was significant (p0,05), the difference was determined in antibody, IFN-γ and NP levels (p
Benzer Tezler
- Erzurum ilinde süt sığırları ve risk grubu insanlarda mycobacterium avium subspecies paratuberculosis'in izolasyonu ve MİRU-VNTR yöntemiyle genotiplendirilmesi
Isolation and genotyping of mycobacterium avium subspecies paratuberculosis in dairy cattle and risk group humans in Erzurum province and genotyping by MİRU-VNTR method
YASEMİN ERDOĞAN
Doktora
İngilizce
2022
MikrobiyolojiAtatürk ÜniversitesiTıbbi Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. HAKAN USLU
- Peynir ve tereyağlarında Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis varlığının araştırılması
Investigation of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis in cheese and butter
AYŞE NİZAMLIOĞLU
Doktora
Türkçe
2023
Veteriner HekimliğiSelçuk ÜniversitesiBesin Hijyeni ve Teknolojisi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. AHMET GÜNER
- Trakya bölgesinde kesime sevk edilen sığırların ileum lenf yumrularında mycobacterium avium subsp. Paratuberculosis varlığının PCR ile araştırılması
Investigation on presence of mycobacterium avium subsp. Paratuberculosis by PCR in ileal lymph nodes of slaughtered cattle in thrace district
ERHAN YALÇIN
Doktora
Türkçe
2020
Mikrobiyolojiİstanbul Üniversitesi-CerrahpaşaMikrobiyoloji (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SERKAN İKİZ
- Süt işletmelerinde Mycobacterium avium ssp. paratuberculosis (MAP) varlığının real time PCR yöntemiyle tesbiti ve halk sağlığı riski yönünden değerlendirilmesi
Detection of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP) by real time PCR in dairy herds and evaluation of risk assessment for public health
YUNUS KURT
Yüksek Lisans
Türkçe
2012
Gıda Mühendisliğiİstanbul Aydın ÜniversitesiGıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. HAYDAR ÖZPINAR
- Uşak yöresi sütçü sığırlarda subklinik paratüberkülozun prevalansı
Prevalence of subclinical paratuberculosis in dairy cattle in uşak area
DENİZ YILDIRIM
Yüksek Lisans
Türkçe
2011
Veteriner HekimliğiAfyon Kocatepe Üniversitesiİç Hastalıkları (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. TURAN CİVELEK