Geri Dön

Poli(akrilamit-ko-akrilik asit) hidrojellerine lakkaz enzimi immobilizasyonu

Immobilization of laccase onto poly(acrylamide-co-acrylic acid) hydrogels

PDF İndir

  1. Tez No: 550557
  2. Yazar: GÖKNİL ŞAHİN
  3. Danışmanlar: DR. ÖĞR. ÜYESİ HAYDAR ALTINOK
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Kimya, Chemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2018
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Kırıkkale Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 124

Özet

Bu çalışmada, Lakkaz enzimi (EC 1.10.3.2), poli(akrilamit-ko-akrilik asit) hidrojellerine, epiklorhidrin (ECH), N-hidroksisüksinimit (NHS) ve karbodiimit (CDI) ile aktifleştirilerek kovalent bağlanma yöntemiyle (P(AAm-ko-AAc)/ECH, P(AAm-ko-AAc)/CDI ve P(AAm-ko-AAc)/NHS) şeklinde immobilize edilmiştir. Serbest enzim için Michaelis-Menten sabiti (Km) ve maksimum tepkime hızı (Vmak) değerleri sırası ile 8,69x10-3 mM, 7,19x10-3 mM.dak-1 olarak bulundu. İmmobilize enzimler (P(AAm-ko-AAc)/ECH, P(AAm-ko-AAc)/NHS ve P(AAm-ko-AAc)/CDI için ise Km değerleri 0,50x10-3 mM, 1,17x10-3 mM ve 7,35x10-3 mM, Vmak değerleri 0,85 x10-3 mM.dak-1,1,43x10-3 mM.dak-1, 4,65x10-3 mM.dak-1 olarak bulundu. Serbest enzim ve immobilize enzimler (P(AAm-ko-AAc)/ECH, P(AAm-ko-AAc)/CDI ve P(AAm-ko-AAc)/NHS) için optimum pH değerleri sırasıyla 5,0-5,0-5,5 ve 5,5 ve optimum sıcaklık değerleri serbest enzim ve immobilize enzimler (P(AAm-ko-AAc)/ECH, P(AAm-ko-AAc)/CDI ve P(AAm-ko-AAc)/NHS) için sırasıyla 40ºC ve 45ºC olarak bulundu. Serbest enzim 64 gün sonunda 4 0C' da aktifliğinin %29' unu koruduğu gözlendi. P(AAm-ko-AAc)/ECH, P(AAm-ko-AAc)/CDI ve P(AAm-ko-AAc)/NHS hidrojellerine immobilize edilen lakkaz için sırasıyla 35. günde %51' ini, 38. günde %66' sını, 37. günde %69' unu koruduğu gözlendi. İmmobilize enzimlerin 5 kez kullanım sonunda ve enzim aktifliklerini %17-52 aralığında koruduğu bulundu. P(AAm-ko-AAc)/CDI ve P(AAm-ko-AAc)/NHS hidrojellerine immobilize edilen lakkazlar için 40˚C ve 50˚C' da inaktivasyon sabitleri sırasıyla 0,0108-0,0165, 0,0190-0,0252 olarak bulundu. Serbest lakkazın 30˚C' da 6 saat sonunda metil oranjın başlangıç rengini %31 oranında giderdiği gözlendi. P(AAm-ko-AAc)/ECH, P(AAm-ko-AAc)/CDI, P(AAm-ko-AAc)/NHS hidrojellerine immobilize edilen lakkazın ise sırasıyla %21, %29 ve %32 oranında giderdiği gözlendi.

Özet (Çeviri)

In this study, Laccase (E.C 1.10.3.2) was covalently immobilized onto poly(acrylamide-co-acrylic acid) hydrogels by activating with epichlorohydrin (ECH), N-hydroxysuccinimide (NHS) and carbodiimide (CDI). Michaelis-Menten constant (Km) and maximum reaction rate (Vmax) values were found as 8,69x10-3 mM, 7,19x10-3 mM.dak-1 for free enzyme, respectively. Km and Vmax values were found as 0,50x10-3 mM, 1,17x10-3 mM, 7,35x10-3 mM and 0,85 x10-3 mM.dak-1,1,43x10-3 mM.dak-1, 4,65x10-3 mM.dak-1 for immobilized enzymes, respectively. Optimum pH were observed as 5,0 for free enzyme and 5,0-5,5 and 5,5 for P(AAm-co-AAc)/ECH, P(AAm-co-AAc)/CDI, P(AAm-co-AAc)/NHS immobilized enzymes. Optimum temperature were observed as 40oC and 45oC for free enzyme and immobilized enzymes, respectively. After 64 days of storage at 4oC free enzyme retained 29% of its original activity and immobilized enzymes, P(AAm-co-AAc)/ECH, P(AAm-co-AAc)/CDI, P(AAm-co-AAc)/NHS, were retained 51-69% of their original activities, after 35-37 days of storage at 4oC. İmmobilized enzymes were used repeatedly 5 times, were retained 17-52% of their original activities. Inactivation rate constants (ki) of immobilized enzymes, P(AAm-co-AAc)/CDI and P(AAm-co-AAc)/NHS, 0,0108-0,0165 min-1, 0,0190-0,0252 min-1. Percent decolorization of methyl orange by free enyzme and enyzmes immobilized in P(AAm-co-AAc)/ECH, P(AAm-co-AAc)/CDI, P(AAm-co-AAc)/NHS were found as 31% and 21%, 29%, 32%.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    449465

    Magnezyum hidrür bileşiğiyle kalsiyum tuzlarından kalsiyum borhidrür sentezi ve borhidrür bileşiklerinin katalitik dehidrojenasyonu

    Calcium borohydride synthesis by magnesium hydride compound from calcium salt and catalytic dehydrogenation of borohydride compounds

    TUĞBA AKKAŞ BOYNUEĞRİ

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2016

    Kimya MühendisliğiGazi Üniversitesi

    Kimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. METİN GÜRÜ

  2. Tez No

    196576

    Aljinat jel boncukları ve poli (akrilamit -ko-akrilik asit) hidrojellerle tirosinaz enziminin binari yöntemiyle immobilizasyonu

    Binary immobilizaton of tyrosinase by using alginate gel beads and poly (acrylamide-co-acrylic acid) hydrogels

    AYŞE YAHŞİ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2005

    KimyaGazi Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. HAYRETTİN TÜMTÜRK

  3. Tez No

    180848

    Modified acrylic hydrogels as controlled release systems

    Kontrollu salım sistemleri olarak modifiye edilmiş akrilik hidrojeller

    FATMA ESRA PINARDAĞ

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2006

    KimyaOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. NESRİN HASIRCI

  4. Tez No

    196629

    Poli(akrilamid-ko-itakonik asit) ve poli(akrilik asit-ko-itakonik asit) hidrojellerinin şişme özellikleri, flukonazol salım davranışları ve mikrobiyal etkileşimlerinin incelenmesi

    Investigation of swelling properties, fluconazole release behaviors and microbiological interactions of poly(acrylamide-co-itaconic acid) and poly (acrylic acid-co-itaconic acid) copolymeric hydrogels

    HASLET EKŞİ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2006

    KimyaGazi Üniversitesi

    PROF. DR. MEHLİKA PULAT

  5. Tez No

    180355

    Akrilik asit-akrilamid- poli(vinil alkol) içeren yarı-IPN tipi hidrojellerin şişme özellikleri ve lipaz salım davranışları

    Swelling properties of semi-IPN type hydrogels containing acrylic acid- acrylamide- poly(vinyl alcohol) and lipase release behaviors

    HEDİYE İREM ÖZGÜNDÜZ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2006

    KimyaGazi Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF.DR. MEHLİKA PULAT

Geri Dön