Mitojenik (MAPK) ve hayatta kalim (AKT) sinyal yolaklarinin Speedy/RINGO proteini ile ilişkisinin SH-SY5Y nöroblastoma hücrelerinde aydinlatilmasi
Identifying the role of Speedy/RINGO on mitogenic (MAPK) and survival AKT pathways intersection in SH-SY5Y neuroblastoma cells
- Tez No: 564111
- Danışmanlar: DR. ÖĞR. ÜYESİ AYŞEGÜL YILDIZ
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Genetik, Nöroloji, Onkoloji, Genetics, Neurology, Oncology
- Anahtar Kelimeler: Nöroblastoma, MAPK, AKT, Speedy/RINGO, CDK2, CyclinA, Neuroblastoma, MAPK, AKT, Speedy/RINGO, CDK2, Cyclin A
- Yıl: 2019
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Muğla Sıtkı Koçman Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Moleküler Biyoloji ve Genetik Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: 75
Özet
Nöroblastoma, nöral krest kökenli malign bir tümör çeşididir. Klinik olarak heterojen ve kemoterapiye direnç gösteren bir karakter sergilemektedir. Kemoterapiye direnç oluşumunun asıl sebeplerinden biri olarak, MAPK (mitojenik) ve AKT (survival/ sağkalım) sinyal yolaklarının tetiklenmesi ve aşırı-aktivasyonu gösterilmektedir. Bu iki sinyal yolağının aşırı aktivasyonu, hastalıkta zayıf prognoza sebep olmaktadır. Bu durum, bu iki sinyal yolağının birbirleriyle iletişim ve etkileşim halinde hareket ettiklerini göstermektedir. Fakat bu etkileşimin odak noktaları henüz aydınlatılabilmiş değildir. Direkt olarak bu iki sinyal yolağının üyeleriyle bağlantısı olmayan fakat bir aracı vasıtasıyla MAPK ve AKT sinyal yolağının kesişiminde bulunan hücre siklus regülatörlerinin varlığına dair çalışmalar mevcuttur. Bu hücre siklus regülatörlerinden biri olan, Speedy/RINGO'nun aşırı aktivasyonu veya aşırı ekspresyonu, hücrelerin kanserleşmesine ve agresifleşerek apoptozdan kaçırılmasına sebep olmaktadır. Speedy/RINGO, siklin benzeri bir protein olup CDK'lara bağlanarak aktivasyonunu sağlamakta ve hücre siklusunda G1/S fazı geçişinde etkin role sahiptir. Yapılan tez çalışması kapsamında, öncelikle kültür ortamındaki nöroblastoma hücrelerinde MAPK sinyal yolağı inhibitör ajanlar vasıtasıyla (U0126) inhibe edilmiştir. Bu inhibisyon sonucunda, Speedy/RINGO'nun protein düzeyinde ekspresyonu analiz edilmiş ve ekspresyon seviyesinde beklenen düşüşün gerçekleştiği gözlemlenmiştir. Sonrasında ise CDK2 ekspresyonu ve aktivasyonu ve buna bağlı olarak da AKT fosforlanma seviyeleri incelenmiştir. Ayrıca bu inhibisyon uygulamasının hücrelerin yaşamsal durumlarına etkisi de canlılık analiziyle belirlenmiştir. Tüm bu veriler AKT ve MAPK sinyal yollarını birbiriyle ilişkilendiren ve aşırı aktivasyonlarına neden olan asıl sebebin ne olduğuna ve bu konuda en kuvvetli aday protein olan Speedy/RINGO'nun muhtemel fonksiyonuna dair ilk kez aydınlatıcı bilgiler elde edilmiştir. Böylece başta nöroblastoma olmak üzere birçok kanserin hem tanı ve tedavisi için hücresel mekanizmaların, hücre içi proteinler arasındaki ilişkilerin doğru şekilde anlaşılabilmesi ve bu sayede doğru moleküler hedeflerin seçilebilmesi mümkün olacak ve bu sayede belirlenen doğru hedefler üzerinden hastalığın tanı ya da tedavisinde kullanılabilecek etkili yöntemlerin geliştirilmesi mümkün olabilecektir.
Özet (Çeviri)
Neuroblastoma is a neural crest derived malignant pediatric tumor. It is characterized by clinical heterogeneity and resistant to chemotherapy. The main reason of this resistance is the over-activation of mitogenic MAPK pathway and AKT survival pathways. Over-activation of these signaling pathways also indicates poor prognosis. This state indicates that there is a cross talk between these two signaling cascades and they act together by one triggering the other, during cancer progression. However, yet it is unknown what is there at the heart of this interaction. Not only direct interaction between the members of these two pathways, but also mediator-dependent interactions, independent from both pathways' members, should be considered, since there are studies giving insights about certain cell cycle regulators which may be involved in the intersection of these signaling pathways. It has been shown that over-activity or over-expression of some cell cycle regulators such as Speedy/RINGO, a novel cell cycle regulator, cause cells to become cancerous and become aggressive by escaping them from apoptosis. Speedy/RINGO, is a cyclin like cell cycle regulator protein which binds and activates CDKs and has a functional role in G1/S transition In this thesis, MAPK pathway was firstly inhibited with a specific chemical, U0126. Afterwards, the expression of Speedy/RINGO was analyzed and a corresponding decrease in the expression of Speedy/RINGO was shown. Then, CDK2 expression and AKT phosphorylation levels were analyzed, accordingly. In addition, the effect of this inhibition study on the vitality of the cells were analyzed by cell viability test. All data was obtained at the end of this study provide crucial information for the first time about the connecting and hence over-activating function of Speedy/RINGO in between AKT and MAPK pathways. This study gives information about the interactions between different intracellular mechanisms and to choose the appropriate molecular targets for diagnosis and treatment of many cancer types. Hence, in the light of these data, commercial cancer diagnosis or treatment-based techniques can be designed in the near future.
Benzer Tezler
- Kurkuminin, paklitaksel ile ın vıtro kültürlenmiş sığır ovaryum kortikal şeritleri üzerine etkisi
Effect of curcumin on bovine ovarian cortical strips cultured in vitro with paclitaxel
ELİF YAVAŞ
Yüksek Lisans
Türkçe
2023
Histoloji ve EmbriyolojiAkdeniz ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. GÖKHAN AKKOYUNLU
- Investigating the role of g protein coupled receptor (gpcr) activation in ochratoxin A (OTA)-induced toxicity
Okratoksin A (OTA)'ya bağlı toksisitede g proteine bağlı reseptörün aktivasyonunun rolünün araştırılması
BEREN AYLAN
Yüksek Lisans
İngilizce
2018
Moleküler TıpBoğaziçi ÜniversitesiGenel Biyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. İBRAHİM YAMAN
- Investigation of the effect of valproic acid, an hdac inhibitor, on the relationship between oxidative stress and autophagy in human eosinophil
İnsan eosinofillerinde valproik asit ile oluşturulan oksidatif stres ve otofaji sonrası bağışık yanıtların incelenmesi
GÖKSU ÜZEL TURAN
Yüksek Lisans
İngilizce
2022
Allerji ve İmmünolojiİstanbul Teknik ÜniversitesiMoleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. CEREN ÇIRACI
- Assessment of the effects of melatonin on the funtional deficits induced by cellular stress in obese donor derived mesenchymal STEM cells
Melatonin'in obez donor mezenkimal kök hücrelerinde hücresel strese bağlı olarak oluşan fonksiyon bozuklukları üzerindeki etkilerinin değerlendirilmesi
ECE GİZEM POLAT
Yüksek Lisans
İngilizce
2024
BiyolojiHacettepe ÜniversitesiKök Hücre Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. FATİMA SUSANNA FAUSTINA AERTS KAYA
- Kuraklık stresi sırasında mitojen-aktivated protein kinaz (MAPK)'ların ekspresyonlarının turunçgil anaçlarında, turunç, carrizo ve troyer'de belirlenmesi
Determination of expression of mitogen-activated protein kinases (MAPKS) during drought stress in citrus rootstocks, sourorange, carrizo and troyer
MERVE GÜNEY
Yüksek Lisans
Türkçe
2021
ZiraatIsparta Uygulamalı Bilimler ÜniversitesiTarımsal Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MEHTAP ŞAHİN ÇEVİK