Sıçan koroner mikrovasküler endotel hücre kültüründe rho/rho-kinaz yolağı ve nitrik oksid ilişkisi
The relation of rho/rhokinase pathway and nitric oxide in rat coronary microvascular endothelium cell culture
- Tez No: 576503
- Danışmanlar: DOÇ. DR. KANSU BÜYÜKAFŞAR
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Eczacılık ve Farmakoloji, Pharmacy and Pharmacology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2005
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Mersin Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Farmakoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 99
Özet
Bu çalışmada sıçan koroner mikrovasküler endotel hücrelerinde Rho/Rho-kinaz yolağı ve nitrik oksit ilişkisi araştırıldı. Bu amaçla sıçan koroner mikrovasküler endotel hücreleri kültüre edildi. Kültüre edilen sıçan koroner mikrovasküler endotel hücrelerinde nitrik oksit (NO) vericileri, gliseril trinitrat (GTN, 10-7 M-10-8 M), sodyum nitroprussiyat (SNP, 10-7 M-10 -8 M), DETA-NO (10-5 M-10-6 M) ve NaNO2 (10-3 M-10-4 M) ile intrasellüler kalsiyum düzeyini yükselterek endotelyal hücrelerde NO sentezini ve salıverilmesini artıran kalsiyum iyonofor, A-23187'nin (10-7 M ve 10-6 M) bazal şartlarda ve trombin varlığında Rho-kinaz (ROCK) enziminin (ROCK-1 ve ROCK-2 izoformlarının) ekspresyonları üzerindeki etkisi araştırıldı. Çalışmada Wistar türü sıçanlar kullanıldı. Kalpler Langendorff kalp perfüzyon sistemine asılarak koroner mikrovasküler endotel hücreleri elde edildi. Hücreler kültür flasklarına ekilerek 37ºC'de %5 CO2'li ortamda inkübe edildi. Konfluent olan flasklar pasajlanarak çoğaltıldı. 3. pasaj koroner mikrovasküler endotel hücreleri, deneylerden 24 saat önce bölünmeleri durdurulup NO donörleri, NO sentezi ve salıverilmesini artıran ilaçlar ve Rho-kinaz enzim inhibitörü Y-27632 ile inkübe edildi. İnkübasyon sonrası Y-27632 ile inkübe edilen flaskların mediumları alınarak nitrit-nitrat düzeyleri Griess yöntemiyle ölçüldü. Diğer ilaçlarla inkübe edilen flasklardaki hücreler ise homojenize edilerek Western-Blot yöntemi ile ROCK (ROCK-1 ve ROCK-2) enzim ekspresyon düzeyleri ölçüldü. Sonuç olarak, NO donörleri ve NO sentezini artıran A-23187, koroner mikrovasküler endotel hücrelerinde kontraktil bir protein olan Rho-kinaz enziminin ekspresyonunu azalttı. Bu bulgu, NO donörleri ve sentezini artıran ajanların yeni bir etki mekanizmasına işaret etmektedir.
Özet (Çeviri)
In this study, we aimed to investigate possible relationship between Rho/Rho-kinase pathway and nitric oxide in rat coronary microvascular endothelial cells. Therefore, we cultured rat coronary microvascular endothelial cells. The effect of nitric oxide (NO) donors, glyceryl trinitrate (GTN, 10-7 M-10-8 M), sodium nitroprusside (SNP, 10-7 M-10-8 M), DETA-NO (10-5 M-10-6 M) and NaNO2 (10-3 M-10-4 M) and calcium ionophore A-23187 that induces NO synthesis and expression via increasing the intracellular calcium concentration, on the expression of ROCK enzyme (ROCK-1, ROCK-2) was investigated on basal as well as thrombin-stimulated conditions. Wistar rats were used in the study. Coronary microvascular endothelial cells were obtained by the mounted rat hearts on a constant-flow Langendorff system. The cell suspensions were plated and incubated at 37 oC under 5 % CO2. The third passage coronary microvascular endothelial cells was made quiscent 24 hours before experimentation and than NO donors, A-23187 or the Rho-kinase inhibitor, Y-27632 was incubated. After the incubation, the medium of flasks incubated with Y-27632 was taken and their nitrit-nitrate levels were measured by Griess method. The cells incubated with the other drugs was homogenized for measuring ROCK (ROCK-1, ROCK-2) enzyme expression levels by Western-Blotting technique. As a result, NO donors and A-23187 increasing NO synthesis, downregulated the expression of contractile protein Rho-kinase in the coronary microvascular endothelial cells. This finding indicates a new mechanism of action of NO donors and A-23187 that induces NO synthesis.
Benzer Tezler
- Sıçan koroner mikrovasküler endotel hücre kültüründe androjenik ve estrojenik hormonların rho-kinaz enzim ekspresyonu üzerine etkisi
The effect of androgenic and estrogenic hormones on the rho-kinase expressions in rat coronary microvascular endothelium cell culture
A. HAKAN KURT
Yüksek Lisans
Türkçe
2008
Moleküler TıpMersin ÜniversitesiFarmakoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. KANSU BÜYÜKAFŞAR
- İzole sıçan kalplerinde kalsiyum dobesilatın kalbin mekanik fonksiyonlarına etkisi
Effects of calcium dobesilate to mechanical functions of the heart in isolated perfused rat hearts
İSMAİL CİHAN ÖZBEK
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2001
Göğüs Kalp ve Damar Cerrahisiİstanbul ÜniversitesiKalp ve Damar Cerrahisi Ana Bilim Dalı
DOÇ.DR. AHMET KÜRŞAT BOZKURT
- Yavaş koroner akim fenomeni̇nde adi̇ponekti̇n ve vaspi̇n düzeyleri̇
The level of adiponectin and vaspin in coronary slow flow phenomenon
GÜLŞAH AKTÜRE
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2014
KardiyolojiDüzce ÜniversitesiKardiyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ENVER SİNAN ALBAYRAK
- Akut miyokard infarktüsünde ın sıtu fibrin oluşumu ve mikrovasküler tıkanmanın gösterilmesi
Demonstration of in situ fibrin formation and microvascular obstruction in acute myocardial infarction
EMRE K. ASLANGER
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2009
Kardiyolojiİstanbul ÜniversitesiKardiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SABAHATTİN UMMAN
- Bazı salvia türlerinin ekstrelerinin, böbrek iskemi/reperfüzyon modeli oluşturulan ratlarda inflamasyon ve oksidatif stres açısından değerlendirilmesi
Assessment of some extract of salvia species in term of inflammation and oxidative stress in renal ischemia-reperfusion-induced injury in rats
İPEK ERTORUN
Doktora
Türkçe
2015
BiyokimyaEskişehir Osmangazi ÜniversitesiTıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. İBRAHİM ÖZKAN ALATAŞ