Geri Dön

Interaction mechanisms between small cell lung cancer cells and T lymphocytes

Küçük hücreli akciğer kanseri hücrelerinin T lenfositler ile etkileşim mekanizmaları

  1. Tez No: 577396
  2. Yazar: MUAMMER ALPER KURŞUNEL
  3. Danışmanlar: PROF. DR. GÜNEŞ ESENDAĞLI
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Moleküler Tıp, Molecular Medicine
  6. Anahtar Kelimeler: KHAK, KKH, eş-uyarım, T hücre, PD-1, PD-L1, TIM-3, LAG3, SCLC, CSC, costimulation, T cell activation, PD-1, PD-L1, TIM-3, LAG3
  7. Yıl: 2019
  8. Dil: İngilizce
  9. Üniversite: Hacettepe Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Temel Onkoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 179

Özet

Tümörler immün sistemden kaçmak için mikroçevrelerini yeniden şekillendirebilir. Bu amaçla, normal hücreler tarafından da immünopatolojileri engellemek için kullanılan immün düzenleyici mekanizmaları kullanırlar. Küçük hücreli akciğer kanseri (KHAK), agresif tümör gelişimi, erken yayılma ve uzak metastaz eğilimi ile ilişkilidir. Kemoterapi yanıtları optimal olarak başlamasına rağmen kısa sürede terapi direnci gelişir. KHAK'ın bu özellikleri kanser kök hücresi (KKH) konseptini işaret etmektedir. Son çalışmalar, KHAK'daki aday kök hücre popülasyonlarını tarif etmektedir. Mezenkimal ve kanser kök hücreler immün-tolerojenik olduğu belirtilmesine rağmen, KHAK kök hücrelerinin immün hücrelerle etkileşimlerinin sonuçları hakkında pek bilgi bulunmamaktadır. Bu sebeple bu çalışmanın amacı, kök hücre popülasyonu da dahil olmak üzere KHAK hücreleri ile T hücreler arasındaki etkileşimi tanımlamak ve KHAK kanseri immün düzenleyici mekanizmalarını ortaya koymaktır. Süspansiyon olarak büyüyen KHAK hücre dizileri (NCI-H82, NCI-H69, SCLC-21), NCI-H82 ve NCI-H69'dan izole edilmiş kök hücre benzeri plastiğe-tutunmuş alt klonlar ve NCI-H69'un alt klononundan saflaştırılmış CD44+CD90+ alt klonu kullanılmıştır. KKH özellikleri kondrosit, osteosit ve adiposit farklılaşması, tümör başlatma yetisi ve RNAseq bazlı transkriptomik analiz ile doğrulanmıştır. Sağlıklı gönüllülerden elde edilen periferik kan mononükleer hücreleri (PKMH), KHAK hücrele klonlarıyla αCD3 mAb varlığında kültüre edilmiş ve T hücresi aktivasyon belirteçlerinin ekspresyonu, proliferasyonu, sitokin üretimi ve inhibitör eş-reseptörlerinin ekspresyonu, T hücrelerde belirlenmiştir. KHAK hücrelerindeki PD-L1 ve PD-L2 ekspresyonu, IFN-γ uyarımı veya IFN-γ blokajı olan veya olmayan PKMH ko-kültürlerinde belirlenmiştir. PD-L1 ekspresyonunun CD8+ T hücresi çoğalması ve KHAK hücrelerinin T hücre sitotoksisitesi üzerine etkileri belirlenmiştir. KHAK ko-kültürlerinden elde edilen TIM-3+LAG3+ ve TIM-3-LAG3- CD8+ T hücrelerinin fonksiyonel kapasitesi in vitro ortamda değerlendirilmiştir. KHAK hücreleri, kök hücre-benzeri KHAK hücrelerince daha belirgin olacak şekilde T hücre aktivasyonuna izin verdi ve hatta desteklemiştir. Ayrıca kök hücre-benzeri KHAK hücreleri, IFN-γ ve aktive edilmiş PKMH'lere maruz kaldıklarında PD-L1 ve PD-L2'yi indükleyerek adaptif direnç özellikler sergilemiştir. Bununla birlikte, bu hücreler üzerinde PD-L1'in varlığı, sitotoksik T lenfositleri çoğalmasına ve KHAK hücrelerinin T-hücre sitotoksisitesine karşı hassasiyetlerinin düşmesine yol açmamıştır. Alternatif olarak, T hücreleri üzerinde ko-inhibitör reseptörlerinin ekspresyonu, T hücrelerini inhibitör sinyallerine açık hale getireceği için, KHAK hücrelerinin varlığında immün baskılanmaya daha yatkın olduğu belirlenmiştir. Özetlemek gerekirse, kök hücre-benzeri KHAK hücreleri, tümör mikroçevresinde inhibitör eş-uyaran moleküllerini indükleyerek, immün modülasyonunun düzenlenmesinde önemli rol oynayabilir ve bu bulgular gelecek immünoterapi yaklaşımlarında rol oynayabilir.

Özet (Çeviri)

Tumors are capable of reshaping their microenvironment to escape from immune destruction. For this purpose, tumor cells initiate an immune regulatory program that is typically used by the normal cells to mitigate immunopathologies. Small cell lung cancer (SCLC) is associated with aggressive tumor growth together with a tendency to early dissemination and distant metastasis. Optimal drug responses are observed upon conventional chemotherapies; yet, inevitable therapy resistance develops shortly after. These facets of SCLC bring forward the cancer stem cell concept. Recent studies described the candidate stem cell populations of SCLC. Although mesenchymal or cancer stem cells are stated to be immune-tolerogenic, less is known how SCLC stem cells interact with immune cells. Thus, the aim of the study is to define the relationship between T cells and SCLC including its stem cell population and reveal their immunomodulatory capacities. SCLC cell lines (NCI-H82, NCI-H69, SCLC-21) which grow in suspension, stem cell-like adherent subclones isolated from NCI-H82 and NCI-H69, and CD44+CD90+ subpopulation from the adherent subclone of NCI-H69 were used. As an in vitro model, cancer stem cell (CSC) characteristics were confirmed by chondrocyte, osteocyte and adipocyte differentiation, tumor initiation and transcriptomics. PBMCs obtained from healthy volunteers were co-cultured with these subclones of SCLC cells in the presence of α-CD3 mAb and expression of activation markers, proliferation rate, cytokine production, and upregulation of co-inhibitory receptors were determined on T cells. PD-L1 and PD-L2 expression were measured on SCLC cells upon IFN-γ exposure or PBMC co-culture with or without IFN-γ blockade. The impact of PD-L1 expression on CD8+ T cell proliferation and T cell killing of SCLC cells were determined. Functional capacity of TIM-3+LAG3+ and TIM-3-LAG3- CD8+T cells upon SCLC co-culture was assessed in vitro. SCLC cells allowed or even supported T cell responses more prominently by stem-like SCLC cells. Furthermore, stem-like SCLC cells displayed adaptive resistance features by inducing PD-L1 and PD-L2 upon exposure to IFN-γ and activated PBMCs. However, the presence of PD-L1 on these cells was not leaded to decreased proliferation of CTLs and resistance against T cell-mediated killing. Alternatively, upregulation of co-inhibitory receptors indicated that T cells became prone to inhibitory signals; thus, more sensitive to immune suppression in the presence of SCLC cells. To summarize, the stem-like SCLC subclones possess significant immune regulatory capacities by upregulating co-inhibitory molecules in the microenvironment which could be important for immune modulation in SCLC tumors which have implications for future immunotherapeutic approaches.

Benzer Tezler

  1. Akciğer kanserinde kemoterapinin hücresel ve hümoral immuniteye etkisi

    Effect of chemotherapist in lung cancer on cellular and humoral immune system

    ALİ NİHAT ANNAKKAYA

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2001

    Göğüs Hastalıklarıİstanbul Üniversitesi

    Göğüs Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MUSTAFA YAMAN

  2. Küçük hücreli dışı akciğer kanseri (KHDAK) tümör hücrelerinin ısıng modeli kullanılarak creutzcellular automaton ile simülasyonu

    The simulation of non-small cell lung cancer (NSCLC) tumorious cells using ising model with creutz cellular automaton

    SELÇUK YEŞİLTAŞ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2018

    Fizik ve Fizik MühendisliğiGazi Üniversitesi

    Fizik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ZİYA MERDAN

  3. Küçük hücreli dışı akciğer kanseri hastalarının tanı anı doku örneklerinde PD-L1 ve PD-1 ekspresyonu düzeyleri ve bu düzeylerin hastalık prognozu ile ilişkisi

    PD-L1 and PD-1 expression levels in diagnostic tissue samples of non-small cell lung cancer patients and correlation of these levels with disease prognosis

    DAMLA OKAY

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2018

    OnkolojiGazi Üniversitesi

    İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. AHMET ÖZET

  4. PrPC anlatımları susturulmuş H69 ve H69AR hücre hatlarında hücre ölüm belirteçlerinin qRT-PCR yöntemiyle araştırılması

    Investigation of cell death markers with qRT-PCR method in PrPC expression supressed H69 and H69AR cell lines

    HAYRETTİN KADINŞAH

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2019

    BiyolojiManisa Celal Bayar Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ERDAL BALCAN

  5. Investigation of the localization pattern and the role of anti apoptotic BAG-1 in healthy and tumor tissues from patients with breast carcinoma

    Meme kanserli hastalardan alınan sağlıklı ve tümörlü dokularda anti-apoptotik BAG-1 proteininin rolü ve lokalizasyonunun incelenmesi

    JALE YILDIZ

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2018

    Biyolojiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. GİZEM DİNLER DOĞANAY