Geri Dön

Lipopolisakkarit ile sıçanlarda oluşturulan sistemik inflamatuvar yanıt ve ilişkili nöroinflamasyonda MTOR'un rolünün araştırılması

Investigation of the role of MTOR in systemic inflammatory response and associated neuroinflammation in rats with Lipopolysaccharide

PDF İndir

  1. Tez No: 577699
  2. Yazar: DEMET SİNEM GÜDEN
  3. Danışmanlar: PROF. DR. SEYHAN ŞAHAN FIRAT
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Eczacılık ve Farmakoloji, Pharmacy and Pharmacology
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2019
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Mersin Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Eczacılık Farmakoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 187

Özet

Çalışmamızda, sıçanlarda lipopolisakkarit (lipopolysaccharide; LPS) ile oluşturulan sistemik inflamatuvar yanıt ve ilişkili nöroinflamasyonda rapamisinin memelilerdeki hedefinin (mammalian target of rapamycin; mTOR) katkısının olup olmadığı ve mTOR/κB inhibitörü (inhibitor of κB; IκB)-α/nükleer faktör-κB (nuclear factor-κB; NF-κB)/hipoksi ile indüklenen faktör-1 alfa (hypoxia inducible factor-1alpha; HIF-1α) yolu etkinliğinde ortaya çıkabilecek değişiklikler sonucunda oluşan sistemik inflamasyon ve nöroinflamasyonun gelişme sürecinde önemli rol oynayan oksidatif stres ve apopitoza neden olan mediyatörlerin ne yönde değiştiği selektif mTOR inhibitörü rapamisin kullanılarak araştırıldı. Sıçanlar 4 gruba ayrıldı: (1) Serum fizyolojik, (2) LPS (3) Serum fizyolojik+rapamisin ve (4) LPS+rapamisin. Rapamisin (1 mg/kg, i.p.) hayvanlara serum fizyolojik (4 ml/kg, i.p.) veya LPS (10 mg/kg, i.p.) ile birlikte uygulandı. LPS enjeksiyonundan 4 saat sonra gruplardaki hayvanlar sakrifiye edilerek kan, böbrek, kalp, akciğer ve beyin dokuları izole edildi. Dokulardan hazırlanan homojenatlarda ribozomal protein S6 (ribosomal protein S6; rpS6), IκB-α, NF-κB p65 protein ekspresyonları ve/veya fosforilasyonları ile HIF-1α, tümör nekrozlaştırıcı faktör (tumor necrosis factor; TNF)-α, interlökin (interleukin; IL)-1β, indüklenebilir nitrik oksit sentaz (inducible nitric oxide synthase; iNOS), gp91phox, p47phox, iyonize kalsiyum bağlayıcı adaptör molekül (ionized calcium binding adaptor molecule; Iba)-1, kaspaz-3, B-cell lymphoma 2 (Bcl-2) ve Bcl-2-associated X (Bax) protein ekspresyonu immunoblotting, serumda nitrit düzeyleri Griess tepkimesi ve beyin dokusu kesitlerinde mikrogliyal etkinlik immünofloresan işaretleme yöntemleri ile ölçüldü. LPS uygulaması ile rpS6 protein ekspresyonu değişmezken fosforilasyonunda artma, IκB-α ve Bcl-2 protein ekspresyonlarında azalma, NF-κB p65 protein ekspresyonu ve fosforilasyonunun yanısıra HIF-1α, TNF-α, IL-1β, iNOS, gp91phox, p47phox, Iba-1, kaspaz-3, ve Bax protein ekspresyonlarında da artma gözlendi. Ek olarak, LPS uygulaması serum nitrit düzeyleri ve mikrogliyal etkinliği arttırdı. LPS'nin neden olduğu tüm bu değişiklikler rapamisin ile önlendi. Bulgularımız, sıçanlarda LPS'nin tetiklediği sistemik inflamasyon ve ilişkili nöroinflamasyonda mTOR enzim etkinliğindeki artışın IκB-α/NF-κB/HIF-1α yolu etkinliğini artırarak proinflamatuvar mediyatörler ve nöroinflamasyonun gelişmesinde önemli rol oynayan oksidatif stres faktörleri ile apopitoza neden olan mediyatörlerin üretimine katkıda bulunduğunu göstermektedir.

Özet (Çeviri)

In this project, it was aimed to investigate the contribution of mammalian target of rapamycin (mTOR) to lipopolysaccharide (LPS)-induced systemic inflammatory response associated with neuroinflammation as well as systemic inflammation due to the activation of mTOR/inhibitory kappa B alpha (IκB-α)/nuclear factor-κB (NF-κB)/hypoxia inducible factor-1alpha (HIF-1α) pathway as well as the changes in the production of mediators that cause oxidative stress and apoptosis which all play an important role in the development of neuroinflammation by using a selective mTOR inhibitor, rapamycin. In the context of this project, the rats will be divided into 4 groups: (1) saline, (2) LPS, (3) saline+rapamycin, and (4) LPS+ rapamycin. Rapamycin (1 mg/kg, i.p.) was administrated simultaneously with saline (4 ml/kg, i.p.) or LPS (10 mg/kg, i.p.) injection to rats and mortality was observed during studies. After 4 hours of LPS injection, animals were sacrificed and blood, kidney, heart, lung, and brain samples were collected. Protein expression and/or phosphorylation of ribosomal protein S6 (rpS6), IB-, NF-B p65, HIF-1α, tumor necrosis factor (TNF)-α, interleukin (IL)-1β, inducible nitric oxide synthase (iNOS), gp91phox, p47phox, ionized calcium binding adaptor molecule (Iba-1), caspase-3, B-cell lymphoma 2 (Bcl-2) ve Bcl-2-associated X (Bax), and β-actin were measured in the tissue homogenates by immunoblotting as well as nitrite levels in sera by Griess reaction and microglial activity from brain cross sections by immunofluorescence were determined for further analysis. LPS caused an increase in phosphorylated form of rpS6 but it did not effect on its protein expression in addition to enhanced phosphorylation and/or expression of IκB-α, NF-κB p65, HIF-1α, TNF-α, IL-1β, iNOS, gp91phox, p47phox, Iba-1, caspase-3, and Bax proteins while it decreased IκB-α and Bcl-2 protein expressions. Additionally, high nitrite levels and microglial activity were created by LPS. Rapamycin reversed all these effects caused by LPS. In conclusion, results from this study suggest that mTOR could have a role in LPS induced systemic inflammatory response associated with the IκB-α/NF-κB/HIF-1α signalling pathway activation that resulted with several processes like oxidative stress, apoptosis and neuroinflammation in rats.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    742439

    Sıçanlarda lipopolisakkarid ile oluşturulan inflamatuvar yanıta sitikolin ve kolinin araşidonik asit yolak aracılı etkisi

    The effect of citicholine and choline on arachidonic acid pathway in lipopolisaccharide induced inflammatory response in rats

    ELİF BARIŞ

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    Eczacılık ve FarmakolojiDokuz Eylül Üniversitesi

    Farmakoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. MUALLA AYLİN ARICI

  2. Tez No

    590892

    Omeprazolün lipopolisakkarit ile indüklenmiş sıçan sepsis modelinde ileum, mide fundusu, kolon ve mesane fonksiyonel cevapları üzerine olan etkileri

    The effects of Omeprazole on ileum, stomach fundus, colon and bladder functional responses in Lipopolysaccharide induced sepsis model in rats

    SABİNA AHUNBAY İMRAHOR

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2019

    Eczacılık ve FarmakolojiHacettepe Üniversitesi

    Tıbbi Farmakoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. GÜRAY SOYDAN

  3. Tez No

    316637

    Propolis ekstresinin deneysel inflamasyon ve antioksidan sistem üzerine etkisi

    The effects of propolis extract on experimental inflammation and antioxidant system

    BERAT YANGI

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2012

    Tıbbi BiyolojiEskişehir Osmangazi Üniversitesi

    Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. M. CENGİZ ÜSTÜNER

  4. Tez No

    709673

    Sıçanlarda steroı̇de bağlı femur başı avasküler nekroz modelı̇nde sı̇stemı̇k erı̇tropoetı̇n uygulamasının hastalık evrelerı̇ üzerı̇ne etkı̇sı̇ ve steroı̇d erı̇tropoetı̇n ı̇lı̇şkı̇sı̇nı̇n bı̇yokı̇myasal olarak gösterı̇lmesi

    Effects of systemic erythropoietin administration on disease stages and biochemical demonstration of the relationship between steroid and erythropoıetin in steroid-induced femoral head avascular necrosis in rat model

    SÜLEYMAN ERDEM TATLICI

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2021

    Ortopedi ve TravmatolojiEskişehir Osmangazi Üniversitesi

    Ortopedi ve Travmatoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. AKIN TURGUT

  5. Tez No

    542524

    Sepsis oluştulmuş sıçanlarda beyin ve kas dokusunda iyonotropik gaba reseptör blokajının etkileri

    The effects of ionotropic gaba receptor blockage on brain and muscle tissue in sepsis induced rats

    GÜLTEN ATEŞ ULUÇAY

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2018

    Fizyolojiİstanbul Üniversitesi

    Fizyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. AYŞE ŞULE TAMER

Geri Dön