Geri Dön

Amniyosit kültürlerinde gestasyonel yaş ve hücre pasaj sayısına göre kök hücre belirteçlerinin ve ekspresyon değişimlerinin incelenmesi

The examination of stem cell markers and their expression changes in amniocyte cell cultures depending on the gestational age and number of cell passage

PDF İndir

  1. Tez No: 577728
  2. Yazar: EZGİ ÇOKAKLI
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. ÖZLEM İZCİ AY
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Tıbbi Biyoloji, Moleküler Tıp, Medical Biology, Molecular Medicine
  6. Anahtar Kelimeler: Amniotik sıvı, Amniyosit, Embriyo, Kök hücreler, Rejeneratif tıp, Amniotic fluid, Amniocyte, Embryo, Stem cells, Regenerative medicine
  7. Yıl: 2019
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Mersin Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

Amniyotik sıvı içerisindeki heterojen hücre popülasyonu farklı seviyelerde kendini yenileyebilen hücre gruplarından oluşmaktadır ve bu hücrelerin kök hücre özellikleri henüz tam olarak karakterize edilmemiştir. Multipotent özellikte olması ve etkili yeniden programlama kapasiteleri nedeniyle amniyotik sıvı hücreleri (AFC) son yıllarda rejenaratif tıp için umut veren hücre kaynakları olarak görülmektedir. AFC'ler transfeksiyonel ve kimyasal stratejiler ile indüklenmiş pluripotent kök hücre (iPSC)'ler oluşturmak için terminal olarak farklılaşmış hücrelerden daha kolay ve etkili bir şekilde yeniden programlanabilirler. Fakat AFC'lerin kök hücre potansiyelleri ve farklı hücre soylarına farklılaşma kapasitesi tam olarak anlaşılamamıştır. Bu çalışmada, 17 hastadan alınan örnekler yardımıyla pluripotensi belirteçlerinin AFC'lerdeki ekspresyon profilleri Real-Time PCR ile araştırılmıştır. Ayrıca gestasyonel yaş, maternal yaş, pasaj sayısı ve cinsiyetin AFC kültürlerindeki bu ekspresyon değişimleri ile ilişkili olup olmadığı incelenmiştir. Son olarak, pluripotensi belirteçlerinin zaman içerisinde pasaj sayıları arasındaki ekspresyonel değişimleri kantitatif olarak incelenmiştir. Elde edilen sonuçlar, farklı hastalardan alınan AFC örneklerinde incelenen bütün pluripotensi belirteçlerinin (OCT3/OCT4, SOX2, KLF4, MYC, KIT, NANOG, DPPA3, DPPA5, FUT4, SALL4) eksprese olduğunu göstermiştir. Klinopatolojik özelliklere göre ekspresyon seviyeleri karşılaştırıldığında SOX2, DPPA3 ve DPPA5 gen ekspresyonlarının düşük gestasyonel yaşlarda anlamlı derecede yüksek olduğu ama sadece SOX2 ve DPPA5'in maternal yaşı 30'dan küçüklerde daha yüksek olduğu görülmüştür (p<0.05). Ayrıca, daha uzun kültüre edilen izolatlarda KIT, NANOG, SALL4, SOX2 ekspresyonlarının anlamlı derecede yüksek olduğu gözlenmiştir. Aynı izolatın bütün pasajları kantitatif olarak karşılaştırıldığında, KIT, DPPA5 ve SOX2 belirteçlerinde istatistiksel olarak anlamlı bir değişim görülmüştür. Pasajlama süresince KIT pozitif hücrelerin selektif seçilime uğrayarak hayatta kaldığı fakat proliferasyon ve sağkalımdaki potansiyel rolleri sebebiyle DPPA5 ve SOX2 ekspresyon seviyelerinin pasajlama ile azaldığı gözlemlenmiştir. Sonuç olarak, elde edilen bulgular AFC'nin kendine özgü bir kök hücre profiline sahip olduğunu ve gestasyonel, maternal yaş ve bireysel belirteçlerin yeniden programlama ve rejeneratif tıp uygulamaları için hücre seçiminde etkili olabileceğini ortaya koymuştur.

Özet (Çeviri)

As being a heterogenous population but having different pools of self-renewing cells, amniotic fluid cells (AFCs) have been considered as promising cell sources for regenerative medicine owing to their multipotency and effective reprogramming capacity. AFCs can more easily and effectively be reprogrammed than terminally differentiated cells to generate induced pluripotent stem cells (iPSCs) by transfectional and chemical strategies. But stem cell dynamics and differentiation capacity of AFCs into multiple lineages were poorly understood. In this study, the expression profile of pluripotency markers in AFCs taken from 17 patients were investigated by Real-Time PCR. Moreover; whether the gestational age, maternal age, culture time or gender could account for expressional changes among AFC cultures was also questioned. Finally, effect of time as passage number on expression of pluripotency markers was analyzed quantitatively. The results showed that all the pluripotency markers (OCT3/OCT4, SOX2, KLF4, MYC, KIT, NANOG, DPPA3, DPPA5, FUT4, SALL4) were expressed in AFCs from different patients. When the expression levels were compared according to clinopathological properties, SOX2, DPPA3 and DPPA5 expressions were found as significantly higher in low gestational ages while only SOX2 and DPPA5 as higher in younger maternal ages (p<0.05). Additionally, a strong correlation was observed for higher expression of KIT, NANOG, SALL4, SOX2 in longer-cultured isolates. When all passages of same isolate were quantitatively compared, a significant change for KIT, DPPA5 and SOX2 was found. KIT positive cells were seemed as selectively survived during passaging, but DPPA5 and SOX2 were found as decreased suggesting their potential role for proliferation and maintenance. Consequently, our results revealed that AFCs have a unique stem cell profile and gestational, maternal age and expression of individual markers may be impactful when choosing cells for reprogramming and regenerative medicine applications.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    763415

    Down sendromu riski yüksekliği nedeniyle amniyosentez yapılan fetüslerin amniyosit kültürlerinde ve gebelerin plazma örneklerinde 21. kromozom kökenli MİR-99A ekspresyonunun karşılaştırılması

    Comparison of chromosome 21-derived MİR-99A expression in amniocyte culture samples of fetuses and plasma samples of pregnants undergoing amniocentesis DUE to increased risk of DOWN syndrome

    İBRAHİM KAPLAN

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    GenetikAnkara Üniversitesi

    Tıbbi Genetik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. HATİCE ILGIN RUHİ

  2. Tez No

    386607

    İnsan amniyotik hücre kültürlerinde nikotin ve resveratrolün Sox2 ve Sox4 genlerinin ekspresyon düzeyleri üzerine etkisinin real time PCR yöntemi ile incelenmesi

    Investigation the effects of nicotine and resveratrol on Sox2 and Sox4 genes expression levels in human amniotic cell culture by real time PCR

    GAMZE CÖMERTPAY

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2013

    Tıbbi BiyolojiÇukurova Üniversitesi

    Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. HÜSNÜ ÜMİT LÜLEYAP

  3. Tez No

    107594

    Amniyotik sıvı hücre kültüründe 1, 9, 16 ve Y kromozomlarının heteromorfik bölge polimorfizmlerinin tespiti

    Determination of heteromorfic region polymorphisms at chromosomes 1, 9, 16 and Y in the amniotic fluid cell culture

    ESRA ALCAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2001

    Tıbbi Biyolojiİstanbul Üniversitesi

    Genetik Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. SENİHA HACIHANEFİOĞLU

  4. Tez No

    386586

    900-1800 MHz radyofrekans elektromanyetik alanın (RF-EMA) insan fetal hücre kültürlerinde kromozomlar üzerine etkileri

    The effects of 900-1800 MHz radiofrequency electromagnetic field(RF-EMF) on chromosomes in human fetal cell culture

    İNAYET NUR USLU

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2014

    Tıbbi BiyolojiÇukurova Üniversitesi

    Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. OSMAN DEMİRHAN

  5. Tez No

    928378

    Mikrobiyal keratitli olgularda amniyon membran transplantasyonunun etkinliğinin ön segment optik koherens tomografi görüntüleme ile retrospektif olarak değerlendirilmesi

    Retrospective evaluation of the effectiveness of amniotic membrane transplantation in cases of microbial keratitis using anterior segment optical coherence tomography imaging

    MERVE BAHAR

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2025

    Göz HastalıklarıBursa Uludağ Üniversitesi

    Göz Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ESİN SÖĞÜTLÜ SARI

Geri Dön