İnek sütü ksantin oksidazının saflaştırılması ve bazı kinetik özelliklerinin incelenmesi
Purification and some kinetic properties of bovine milk xanthine oxidase
- Tez No: 58843
- Danışmanlar: DOÇ. DR. KADER KÖSE
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 1997
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Erciyes Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 104
Özet
Bu çalışmada, inek sütünden, ksantin oksidoredüktaz (XOR)'ın serbest radikal üretimine yol açan Tip O formunda saflaştırılması ve saflaştırılan enzimin kinetik özelliklerinin incelenmesini takiben, SOD aktivitesi tayininde kullanılabilirliğinin araştırılması planlandı. Dithiothreitol (DTT) (T) içeren ve içermeyen (E) ortamlarda enzim saflaştırılması yapıldı. Ksantin oksidaz, DTT'siz ortamda 23.74 kez, DTTli ortamda 74 kez saflaştırıldı. İki farklı ortamda saflaştırılan enzimin SDS-PAGE ile molekül ağırlığı 80.000 D olarak belirlendi. Ksantin oksidaz (I ve II) için optimum sıcaklık 25°C, optimum pH 8,0 olarak bulundu. Ksantin oksidaz (I ve II)'nin ksantin substratına ait Km değerleri sırasıyla 0,034 mM, 0,047 mM olarak ve maksimum hız değerleri 800 uM/dk, 813 uM/dk olarak hesaplandı. N-nitrozomorfolin (NMOR)'in, DTTli ve DTTsiz ortamda saflaştınlan enzimi nonkompetitif oalrak inhibe ettiği gözlendi. Saflaştırmayı takiben ^O^C'de, 3 aylık sakalama süresi içinde, XO(I)'in aktivitesinin değişmediği, XO(ü)'m aktivitesinin ise % 29 oranında azaldığı görüldü. Sadece DTTli ortamda saflaştırılan enzimin, uygun bir düzeltme faktörü yardımıyla, SOD aktivitesi tayininde kullanılabileceği belirlendi. Sonuç olarak DTTsiz ortamda saflaştırılan fakat DTTli ortamda, -20°C'de sakalanılan inek sütü XO'in; SOD tayinininde, bir düzeltme faktörü yardımıyla, kullanılabileceği görüşüne varıldı.
Özet (Çeviri)
Our objectives were to purify the Type O form of Xanthine oxidoreductase (XOR) which leads to free radical generation from bovine milk and to examine whether this purified enzyme could be used in the determination of SOD activity followed by the examination of kinetic properties of XOR. The purification of XOR was carried out under two different mediums, in the presence (I) or absence of dithiothreitol (DTT) (II). The rate of purification was found to be 23,74 and 73.7 according to the mediums containing DTT (I) or not (II). The molecular mass (M.W) of XO (I and II) was determined as 80.000 D. It has been found that 25°C and pH 8.0 were optimal for XO ( I and II). Km and V max of XO (I and II) were found to be 0,034 mM, 0,047 mM and 800 uM.min,813 uM.min, respectively. N-nitrosomorpholine (NMOR) showed non- competitive inhibition on the activity of XO (I and H). Following the purification XO (I) activity was not changed but XO (D) activity decreased by 29 %, in a period of 3 months at - 20°C. It has been determined that only the enzyme purified under DTT containing medium could be used for assaying SOD activity, using an appropriate co-efficient factor. In conclusion, XO purified from bovine milk, without DTT, but stored at-20°C under DTT containing medium could be used for the determination of SOD activity with tiie help of a co-efficient factor.
Benzer Tezler
- Azot kükürt ve oksijen içeren siklik bileşiklerin sentezi ve uygulamaları
Synthesis and applications of cyclic compounds containing nitrogen sulfur and oxygen
EMEL KARAKILIÇ
- Kronik alkol ve sigara kullanımına maruz bırakılan erkek ratların böbrek dokularının histopatolojik ve malondialdehit (MDA), nitrik oksit (NO), ksantin oksidaz (XO), ksantin dehidrogenaz (XDH), miyeloperoksidaz (MPO), glutatyon (GSH) yönünden ince...
An Investigation of histopathologic changes and levels of malondialdehyde (MDA), nitric oxide (NO), xanthine dehydrogenase (XDH), myeloperoxidase (MPO), glutathione (GSH) on the kidney tissues male rats treated with chronic alcohol and cigarette smoke
YILMAZ ÇİĞREMİŞ
Doktora
Türkçe
2003
Biyolojiİnönü ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. EŞREF YÜKSEL
DOÇ. DR. YUSUF TÜRKÖZ
- İnek ve deve sütünden üretilen yoğurtların bazı özelliklerinin incelenmesi
Determination of some properties of yoghurt produced from cow and camel milk
PINAR ÇAKIR TOPDEMİR
- Farklı stabilizatör madde kullanılarak üretilen yoğurtların çeşitli kalite niteliklerinin depolama periyodu boyunca incelenmesi
Research of the various quality characteristics of yogurt produced by using different stabilizers during storage period
EMİNE MACİT
Doktora
Türkçe
2011
Gıda MühendisliğiAtatürk ÜniversitesiGıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. İHSAN BAKIRCI
- Yoğurtlu dondurma üretimi ve reolojik özellikleri
The production of yoghurt ice-cream and rheological properties
AYHAN GÜLEN
Yüksek Lisans
Türkçe
2010
Gıda MühendisliğiAbant İzzet Baysal ÜniversitesiGıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. M. ŞAMİL KÖK