Geri Dön

Hipoksik ortamın mikroveziküllere etkisinin değerlendirilmesi

Evaluation of the effect of hypoxia condition on microvesicles

PDF İndir

  1. Tez No: 617458
  2. Yazar: NUR SEDA ŞAHİN
  3. Danışmanlar: DR. ÖĞR. ÜYESİ ZEYNEP BURÇİN GÖNEN
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Genetik, Genetics
  6. Anahtar Kelimeler: Kök hücre, Hipoksi, Ekstraselüler Vezikül, Eksozom, Hücresiz Hücresel Tedavi, Stem cell, Hypoxia, Extracellular Vesicle, Exosome, Cell-free Cellular Therapy
  7. Yıl: 2019
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Erciyes Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Kök Hücre Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 124

Özet

Günümüzde birçok hastalığın tedavisinde kök hücreler denenmeye ve/veya kullanılmaya başlanmıştır. Literatürde hastaya hücre uygulamadan hücrelerin etkinliğinden faydalanılan yeni konseptin adı: Hücresiz hücresel tedavilerdir. Bu şekilde hücreler hastaya verilmez ancak hücrenin ürettiği içerik hastaya taşınır. Bu taşınan içerik eksozomları da içeren mikroveziküllerdir. Hipoksi oksijen konsantrasyonunun azalarak kritik eşik değerin altına düştüğü koşulu ifade etmektedir. Çalışmanın amacı, oksijen konsantrasyonunun daha düşük olduğu hipoksik ortamın; elde edilen eksozomlar üzerine etkisini değerlendirmektir. Bu amaçla, farklı oksijen konsantrasyonlarında (%21, %5, %3) h-UK mezenkimal kök hücreleri ve tam kandan izole edilen nötrofil hücrelerinin kültürü yapıldı ve eksozomları izole edildi. Eksozomlar SEM, partikül boyut analizi ve western blot yöntemi ile tanımlandı. Umblikal kord kaynaklı eksozomların lenfosit proliferasyonuna olan etkisi Kİ67 ve XTT proliferasyon testleri ile belirlenerek etkinlilik analizi yapıldı. Çalışmanın sonucunda farklı oksijen koşulları ve farklı kaynaklardan başarılı bir şekilde eksozom izolasyonu yapıldı. İzole edilen eksozomların miktarı, miktar tayin kiti ile belirlendi. Çalışılan grupların miktarları hesaplandı ve ortalama miktar 88-93x107 olarak ölçüldü. Sonuç olarak %5 hipoksi grubunda daha fazla miktarda eksozom izole edildi ancak gruplar arası yapılan karşılaştırmada miktar olarak bir fark gözlenmedi (p nötrofil= 0,22, p h-UK=0.43). SEM analizinde eksozomların çapları h-UK-MKH örneklerinde ortalama 66.07±15.33 nm olarak ölçülürken, nötrofil hücrelerinde ortalama 63.66±5.38 nm olarak ölçüldü. Gruplar arasındaki %3 hipoksi nötrofil kaynaklı eksozom grubunda daha büyük boyutta eksozom izole edildi (p˂0.001). Partikül boyut analizinde yapılan ölçüm ile elde edilen sonuçlarda h-UK kaynaklı eksozomların boyutu 68.98 nm olarak hesaplanırken, nötrofil eksozomları 53.35 nm olarak hesaplandı. Western blot analizinde eksozomlar tarafından CD63 ve CD9 yüzey belirteçlerini eksprese eden protein bantları gösterildi. %3 hipoksi ile elde edilmiş h-UK kaynaklı eksozom grubunun normoksi ve %5 hipoksiye göre, lenfosit proliferasyon testi sonucunda daha etkin olduğu belirlendi (p˂0.001). %3 hipoksik koşul varlığı; nötrofil eksozomlarının daha büyük boyutta olmasına ve umbilikal kord eksozomlarının daha etkin olmasına yol açmaktadır.

Özet (Çeviri)

At the present time, stem cells are being tested and / or used in the treatment of many diseases. The name of the new concept in the literature, which benefits from the effectiveness of cells without administering cells to the patient, is called Cell-free cellular treatments. In this way, the cells are not delivered to the patient, but the content produced by the cell is transported to the patient. These transported contents are microvesicles, including exosomes. Hypoxia refers to the condition where the oxygen concentration decreases and falls below the critical threshold. The aim of this study was to investigate the hypoxic environment where oxygen concentration was lower; to evaluate the effect on the resulting exosomes. For this purpose, h-UK mesenchymal stem cells and neutrophil cells isolated from whole blood were cultured at different oxygen concentrations (21%, 5%, 3%) and exosomes were isolated. Exosomes were identified by SEM, particle size analysis and western blot method. The effect of umbilical cord-derived exosomes on lymphocyte proliferation was determined by Ki67 and XTT proliferation tests and efficiency analysis was performed. As a result of the study, exosome isolation was performed successfully from different oxygen conditions and different sources. The amount of isolated exosomes was determined by the quantification kit, and the amounts of the studied groups were calculated and the average amount was measured as 88-93x107. As a result, more exosomes were isolated in the 5% hypoxia group but no difference was observed in the comparison between the groups (p neutrophil = 0.22, p h-UK = 0.43). Diameters of exosomes were measured as 66.07 ± 15.33 in h-UK-MSC samples and 63.66 ± 5.38 in neutrophil cells. Exosomes of larger size were isolated in the 3% hypoxia neutrophil-derived exosome group between the groups (p˂0.001). In the results obtained by the particle size analysis, h-UK-derived exosomes were calculated as 68.98 nm, while neutrophil exosomes were calculated as 53.35 nm. Western blot analysis showed protein bands expressing CD63 and CD9 surface markers by exosomes. H-UK-derived exosome group obtained by 3% hypoxia was found to be more effective than lymphocyte proliferation test compared to normoxia and 5% hypoxia (p˂0.001). 3% presence of hypoxic condition; the neutrophil exosomes are larger in size and the umbilical cord exosomes are more effective.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    483553

    Mezenşimal kök hücrede hipoksik ortamın sitotoksik etkisi

    Cytotoxic effect of hypoxic environment in mesenchymal stem cell

    SEVİL ÖZER

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2017

    BiyolojiCelal Bayar Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. HAFİZE SEDA VATANSEVER

  2. Tez No

    645690

    Periodontal olarak sağlıklı bireylerde günlük içilen sigara miktarına bağlı hipoksiyle indüklenen faktör (HİF) sinyal yolağının araştırılması

    Investigation of the hypoxia induced factor (HİF) signal pathwayassociated with daily smoking amounts in periodontal healthyindividuals

    ÖZGE YÜKSEKKAYA

    Diş Hekimliği Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2020

    Diş HekimliğiTokat Gaziosmanpaşa Üniversitesi

    Periodontoloji Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ MEHMET MURAT TAŞKAN

    DR. ÖĞR. ÜYESİ ÖZKAN KARATAŞ

  3. Tez No

    757443

    Prostat kanserinde normal ve hipoksik koşullarda KLK4 geninin TGF-β ile regülasyonu

    TGF-β directed regulation of KLK4 gene in normal and hypoxic conditions in prostate cancer

    FATMA POYRAZLI

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    BiyolojiBalıkesir Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. SÜMEYYE AYDOĞAN TÜRKOĞLU

    PROF. DR. FERAY KÖÇKAR

  4. Tez No

    734672

    İn vitro nöroblastom modelinde hipoksinin tümör davranışı üzerine etkisi

    Effect of hypoxia on tumor behavior in in vitro neuroblastoma model

    SERDAR BAYRAK

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    OnkolojiDokuz Eylül Üniversitesi

    Onkoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. HATİCE NUR OLGUN

  5. Tez No

    79425

    Rat oblik adipomuskulokütan kasık ada flep modelinde sıcak iskemi süresinin neovaskülarizasyon üzerine etkisi

    Başlık çevirisi yok

    YAVUZ DEMİR

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    1999

    Plastik ve Rekonstrüktif CerrahiGazi Üniversitesi

    Plastik ve Rekonstrüktif Cerrahi Ana Bilim Dalı

Geri Dön