Geri Dön

Trombositten zengin fibrin kökenli mezenkimal kök hücrelerin klinikte uygulanabilir üretim şartlarının araştırılması

investigation of clinically applicable manufacturingconditions of thrombocyte rich fibrine origined mesenchimal stem cells

  1. Tez No: 617635
  2. Yazar: BUKET BANU ÖZKAN
  3. Danışmanlar: DR. ÖĞR. ÜYESİ ZEYNEP BURÇİN GÖNEN
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Genetik, Genetics
  6. Anahtar Kelimeler: Mezenkimal Kök Hücre, Trombositten Zengin Fibrin, Kök Hücre Kaynağı, Hücresel Tedavi, Mesenchymal Stem Cell, Platelet Rich Fibrin, Stem Cell Origin, Cell Therapy
  7. Yıl: 2019
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Erciyes Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Kök Hücre Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 123

Özet

Bu çalışmanın amacı, MKH' lerin TZF' nin fibrin yapısında bulunabileceği hipotezinden yola çıkılarak, kişide invaziv herhangi bir cerrahi işlem gerektirmeden, kişi konforunu etkilemeden, direkt olarak venöz damardan alınan kan ile TZF elde edilmesi ve bu dokudan da MKH elde edilmesini sağlamaktır. Elde edilecek MKH' lerin klinik olarak uygulanabilir hale (GMP grade) getirilen yeni bir kök hücre kaynağı olması amaçladı. Gönüllülerden alınan kan, 2500 rpm'de 12 dk süreyle santrifüj edilerek TZF elde edildi. TZF' lerin kültüre edilmesi ile elde edilen TZF-MKH' ler, adipojenik, osteojenik, kondrojenik farklılaşma testlerine, akım sitometri cihazı ile yüzey belirteçleri analizine, primer kültürden çıkma sürelerine ve koloni oluşturma özelliklerine göre değerlendirildi. TZF-MKH' lerin akım sitometri cihazı ile analizi sonucunda elde edilen tüm yüzey belirteçlerinin ortalamaları istatistiksel olarak değerlendirildi. Sonuçta, TZF'den %10 insan serumu içeren D-Lizin kaplı kültür kabında alfa modifiye besiyeri koşullarında MKH elde edilebilir. TZF-MKH'ler CD 44, CD 73, CD 90, CD 105 yüzey belirteçlerini ifade ettiklerini, negatif kokteyl olarak kullanılan CD 11b, CD 19, CD 45, CD 34 ve HLA-DR yüzey belirteçlerini ifade etmedikleri belirlendi. Ayrıca bu hücrelerin adipojenik, osteojenik ve kondrojenik olarak farklılaştığı adipo red, alizarin red ve floresans boyamalar ile gösterildi. Elde edilen TZF-MKH' lerin primer kültüre alındıkları günden 1.pasaj işlemine alındığı güne kadar geçen sürenin ortalama 17,6±3,3 gün olduğu tespit edildi. Sonuç olarak; TZF, klinik olarak kullanılabilir üretim şartları altında MKH üretiminin sağlanabildiği yeni bir mezenkimal kök hücre kaynağıdır.

Özet (Çeviri)

The aim of this study, based on the hypothesis that MSCs can be existed among fibrin structures in the PRF, was to obtain PRF with the blood taken directly from the venous vein and to ensure to obtain MSC from also this tissue without requiring any invasive surgical operation and without affecting the comfort of the person. The MSCs to be obtained were intended to be a new source of stem cells, made clinically applicable (GMP grade). Blood from the volunteers was centrifuged at 2500 rpm for 12 minutes to obtain PRF. The PRF-MSCs obtained from cultivation of PRF, according to adipogenic, osteogenic, and chondrogenic differentiation tests, and surface markers analysis by flow cytometry device, and their duration to come out of primary culture, and colony-forming properties. The mean of all surface indicators obtained by the analysis of 10 PRF-MSCs via the flow cytometry device was evaluated statistically. As a result, MSC can be derived from PRF by using D-lysine treated culture flasks and 10% human sera containing alpha modified culture media. According to this evaluation, it was determined that the results showed the surface indicators of CD 44, CD 73, CD 90, and CD 105 as a positive coctail, but did not show the surface indicators of CD 11b, CD 19, CD 45, CD 34, and HLA-DR which were used as negative cocktail. In addition, adipogenic, osteogenic and chondrogenic differentiation of these cells was demonstrated by adipo red, alizarin red, and fluorescent stainings. The mean time from the day of the primer culture to the first passage was evaluated statistically and it was found to be 17.6 ± 3.3 days. The fact that the PRF-MSCs were able to form a colony was determined by staining with crystal violet after the CFU test. As a result; PRF is a new available source of mesenchymal stem cells which is produced under clinically GMP conditions for clinical applications.

Benzer Tezler

  1. Zayıflatılmış kolon anastomozlarında kök hücre ve trombositten zengin fibrinin etkileri,deneysel çalışma

    Stem cells and the effects of platelet- rich fibrin in attenuated colonic anastomosis , experimental study

    BURÇİN DORUK OKTAY

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2016

    Genel CerrahiBaşkent Üniversitesi

    Genel Cerrahi Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. YAHYA EKİCİ

  2. Kolon anastomozlarında kök hücre ve trombositten zengin fibrinin etkileri: Deneysel çalışma

    Effects of stem cells and platelet rich fibrin on colonic anastomosis: Experimental study

    AHMET CELALETTİN ŞENDOĞAN

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2014

    Genel CerrahiBaşkent Üniversitesi

    Cerrahi Tıp Bilimleri Bölümü

    DOÇ. DR. YAHYA EKİCİ

  3. Trombositten zengin fibrin ve alloplastik greft uygulamalarının tavşan kafatasında oluşturulan deneysel kemik defektlerinin iyileşmesi üzerindeki etkilerinin histolojik olarak incelenmesi

    Histological examination of the effects of platelet-RİCH fibrin and alloplastic graft applications on the healing of experimental bone defects created in the rabbit skull

    ELİF GÜVEN SOĞUKSULU

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    Diş HekimliğiKaradeniz Teknik Üniversitesi

    Periodontoloji Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ ERKAN ŞÜKÜROĞLU

  4. Tavşan kalvaryal kemik defektlerinde trombositten zengin fibrinin yeni kemik oluşumundaki etkinliğinin araştırılması

    Investigation of the effectiveness of platelet rich fibrin on new bone formation in rabbit calvarial bone defects

    AHMET HÜSEYİN ACAR

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2014

    Diş Hekimliğiİnönü Üniversitesi

    Ağız, Diş, Çene Hastalıkları ve Cerrahisi Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. ÜMİT YOLCU

  5. Trombositten zengin fibrin ve hyaluronik asit jel matriksinin sıçan femuru kırık modelinde kemik iyileşmesine etkileri

    The effects of hyaluronic acid gel matrix and platelet rich fibrin on bone healing of rat femur fracture model

    ERDAL EREN

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2017

    Ortopedi ve TravmatolojiSağlık Bilimleri Üniversitesi

    Ortopedi ve Travmatoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MEHMET AKİF GÜLEÇ