Geri Dön

Glikoz açlığının A549 ve beas-2B hücre hatlarında hücre canlılığı parametrelerine olan etkisi

The effect of glucose starvation to cell viability parameters in A549 and beas-2B cell lines

PDF İndir

  1. Tez No: 624744
  2. Yazar: BÜŞRA GİZEM ÇETİNER
  3. Danışmanlar: DR. ÖĞR. ÜYESİ MENDERES YUSUF TERZİ
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Genetik, Tıbbi Biyoloji, Genetics, Medical Biology
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2019
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Hatay Mustafa Kemal Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Moleküler Biyokimya ve Genetik Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 70

Özet

Kanser hücreleri artan glikoz kullanımı ile karakterize, metabolik değişim geçirmiş hücrelerdir. Kanser hücrelerinin metabolizmasını anlamak, kanser tedavisinde oldukça büyük önem arz etmektedir. Çalışmamızın amacı, glikoz açlığının sağlıklı ve kanser hücrelerinde, hücre canlılığı parametreleri üzerindeki etkilerini belirleyerek, kanser tedavisini desteklemektir. Çalışmamızda; MTT testi ile 8, 16 ve 24 saatlik açlığın hücre canlılığına etkisi araştırıldı ve ileriki deneyler için 8 ve 24 saatlik açlık süreleri seçildi. Açlık süreleri sonucu; hücre canlılığı, hücre döngüsü, kuisens, senesens, apoptoz ve otofaji yolaklarında görevli mTOR, p21, kaspaz 3, beclin 1 ve ATG12 genlerinin ekspresyon seviyeleri qRT-PCR yöntemi ile belirlendi. Hücrelerde senesens olayı SA-β-Gal boyama ile görüntülendi Sonuçlarımız, açlığın kanser ve sağlıklı hücrelerde canlılığı düşürdüğünü göstermiştir. Ancak, BEAS-2B'den farklı olarak A549 kanser hücrelerinde açlık süresinin artışı hücre canlılığını önemli ölçüde düşürdü. SA-β-Gal boyama sonucu, 8 ve 24 saatlik açlıkta A549 hücresinde BEAS2B'ye göre daha fazla senesent hücre saptadık. Her iki hücre hattında artan açlık süresi ile p21 ekspresyon seviyesi artmış, hücre döngüsünü engellemiştir. MTT analizi ve SA-β-Gal boyama sonuçları göz önüne alındığında, kanser hücrelerinde açlığa bağlı hücre döngüsü inhibisyonunun sağlıklı hücrelere kıyasla daha fazla olduğu söylenebilir. Senesens profili kanser hücrelerinde 8 saat açlıkta artan mTOR ekspresyonu ile desteklenmiştir. mTOR mRNA seviyesi 8 saat açlıkta BEAS-2B hücrelerinde azalırken, 24 saat açlıkta artış göstermiştir. Otofajide, 8 saatlik açlıkta A549 hücresinde beclin 1 ekspresyonu artarken, BEAS-2B hücresinde azalmıştır. 24 saatlik açlıkta ise iki hücre hattında da ATG12 artışıyla otofaji tetiklenmiştir. Her iki hücre hattında 24 saat açlıkta apoptotik markır kaspaz 3'te artış görülmüştür. Fakat kaspaz 3'teki bu kat artışı sağlıklı hücrelere kıyasla kanser hücrelerinde daha fazladır. 8 saatlik açlıkta ise BEAS2B hücrelerinde kaspaz 3 değişmemiştir. Sonuç olarak bu çalışmamızda, artan glikoz açlığı süresi ile beraber sağlıklı ve tümör hücrelerinin hücre canlılığı parametrelerinin olumsuz yönde etkilendiğini gözlemledik. Sonuçlarımız, glikoz açlığının kanser hücrelerinde, sağlıklı hücrelere kıyasla daha olumsuz etkilere sahip olduğunu göstermektedir

Özet (Çeviri)

Cancer cells are metabolically altered cells which are characterized by elevated rates of glucose uptake. Understanding the metabolism of cancer cells has a pivotal importance in cancer treatment. The aim of our study is to analyze the effects of glucose starvation on cell viability parameters in both healthy and cancer cells and to support cancer treatment. In our study, the effects of 8, 16 and 24 hour-long starvation on cell viability were determined with MTT assay and 8 and 24 hour-long starvation periods were selected for further experiments. After 8 and 24 hours of starvation, the gene expression levels of mTOR, p21, caspase 3, beclin 1, and ATG12, which play role in several pathways e.g. cell survival, cell cycle, quiescence, senescence, apoptosis, autophagy, were evaluated with qRT-PCR analysis. The senescence within the cells was detected by using SA-β-Gal staining assay. Our results showed that starvation significantly decreased cell viability in tumor and healthy cells. However, prolonging starvation time significantly reduced cell viability in A549 cancer cells unlike BEAS-2B cells. After SA-β-Gal staining, we detected more senescent cells in A549 than in BEAS-2B at 8- and 24-hour starvations. In both cell lines,extending starvation time also augmented p21 gene expressionlevels and halted cell cycle progression. Considering the outcomes of MTT and SA-β-Gal assays it can be stated that the cell cycle inhibition rate upon starvation in cancer cells is more than the healthy cells. The senescence profile was also supported by the increased mTOR expression in cancer cells at 8 hours starvation. While mTOR decreased in BEAS-2B cells at 8 hours, it went up at 24 hours starvation. Regarding autophagy, the beclin 1 expression at 8 hours starvation increased in A549 cells while it decreased in BEAS-2B cells. At 24 hours starvation, autophagy was trigerred in both cell lines by elevated levels of ATG12. We found an increase in caspase 3 expression at 24 hours starvation in both cell lines. However, this fold increase of caspase 3 was higher in cancer cells compared to the one in healthy cells. At 8 hours starvation, caspase 3 expression did not change in BEAS-2B cells while it significantly increased in A549 cells. As a result, we observed in this study that the cell viability parameters of both healhy and cancer cells were negatively affected with increasing glucose starvation. Our results showed that glucose starvation had more negative effects on cancer cells than healthy cells.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    387147

    The effect of architecture and molecular weight on cell uptake and intracellular distribution of poly(ethylene glycol)

    Polietilen glikol'ün mimarisi ve molekül ağırlığının hücre alımına ve hücre içi dağılımına etkisi

    İMRAN ÖZER

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2014

    Biyoteknolojiİzmir Yüksek Teknoloji Enstitüsü

    Biyoteknoloji Bölümü

    PROF. DR. ESMA VOLGA BULMUŞ ZAREIE

    DOÇ. DR. YUSUF BARAN

  2. Tez No

    678782

    Mayada çeşitli farklılaşma sinyallerinin TPS1 ve NTH1 genleri transkripsiyonuna etkilerinin araştırılması

    Analysis of the effects of various differentiation signals on the transcription of TPS1 and NTH1 genes in yeast

    THOMAS SAAH PETERS

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2021

    GenetikBursa Uludağ Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. SEZAİ TÜRKEL

  3. Tez No

    299829

    The effect of intermittent fasting and water restriction on arrhythmias induced by ischemia-reperfusion in rats

    Sıçanlarda aralıklı açlığın ve susuzluğun iskemi-reperfüzyon ile uyarılan aritmiler üzerine etkisi

    SALİH TUNÇ KAYA

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2011

    FizyolojiAbant İzzet Baysal Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ÖMER BOZDOĞAN

  4. Tez No

    779812

    Gestasyonel Diyabetes Mellitus'lu gebelerde serum Isthmin-1 düzeylerinin değerlendirilmesi

    Evaluation of serum Isthmin-1 levels in pregnancy diagnosis of Gestational Diabetes Mellitus

    ZEYNEP ŞENTÜRK

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    Kadın Hastalıkları ve DoğumSağlık Bilimleri Üniversitesi

    Kadın Hastalıkları ve Doğum Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MURAT MUHCU

  5. Tez No

    686425

    Koyunların gebelik toksemisinde güncel metabolik biyobelirteçlerin ve lipid profilinin incelenmesi

    Investigation of current metabolic biomarkers and lipid profile in pregnancy toxemia of sheep

    MERVE ÖZTÜRK

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2021

    Endokrinoloji ve Metabolizma HastalıklarıBurdur Mehmet Akif Ersoy Üniversitesi

    İç Hastalıkları (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. NURİ MAMAK

Geri Dön