siRNA yüklü ilaç taşıyıcı sistem geliştirilmesi ve anti-kanser etkisinin in vitro değerlendirilmesi
Development of a siRNA-loaded drug delivery system and evaluation of its anti-cancer activity in vitro
- Tez No: 632242
- Danışmanlar: PROF. DR. AYŞE GÜLTEN KANTARCI, PROF. DR. FATMA JULİDE AKBUĞA
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Biyoteknoloji, Eczacılık ve Farmakoloji, Biotechnology, Pharmacy and Pharmacology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2020
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Marmara Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Farmasötik Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 151
Özet
Amaç: İleri evre kanserlerde yüksek düzeyde eksprese olduğu bilinen EphA2 genini hedefleyen siRNA yüklü katyonik katı lipit nanopartiküllerin (kKLN:siEphA2) geliştirilmesi ve histon demetilaz inhibitörü JIB-04 ile birlikte uygulandığında normal prostat (RWPE-1, PWR-1E) ve prostat kanseri (LNCaP, DU145, PC-3) hücreleri üzerindeki etkilerinin araştırılmasıdır. Gereç ve yöntem: Nanopartiküller modifiye sıcak mikroemülsiyon yöntemiyle hazırlanmış ve karakterizasyonları NanoZS, TEM ve SEM ile yapılmıştır. Nanopartiküllerin siRNA'yla kompleksleşme ve siRNA'yı nükleazlara karşı koruma kapasitesi agaroz jel elektroforeziyle değerlendirilmiştir. kKLN:siRNA komplekslerinin hücre içerisine alınma etkinlikleri akış sitometresi ve floresan mikroskopla, gen susturma etkinlikleri kantitatif PCR ve immünoblotlamayla, sitoksisiteleri WST-8 canlılık tayiniyle belirlenmiştir. Sferoidlerin oluşturulmasında polyHEMA yöntemi, migrasyonun ölçülmesinde çizik tayini, koloni oluşturmanın ölçümünde ise kristal viyole metodu kullanılmıştır. Bulgular: EQ1, DDAB ve DOTMA katyonik lipitleri kullanılarak küçük boyutlu (25 mV) ve stabil nanopartiküller geliştirilmiştir. EQ1 ile hazırlanan KLN'ler ve nanoyapılı lipit taşıyıcılar siRNA ile kompleks oluşturmamıştır. Buna karşın, DDAB içeren kKLN-Db ve DOTMA içeren kKLN-Dt formülasyonları siRNA ile kompleks oluşturarak, siRNA'yı nükleazlara karşı korumuştur. kKLN-Db'nin DU145 ve PC-3 hücrelerine alınma etkinliği, kKLN-Dt ve ticari transfeksiyon ajanı Dharmafect-2'ye göre daha yüksek bulunmuştur. Normal prostat hücrelerinde toksisite göstermeyen kKLN-Db:siEphA2 kompleksi, PC-3 hücrelerinde Dharmafect-2 kadar etkili bir susturma etkinliği göstermiştir (p
Özet (Çeviri)
Aim: To develop an siRNA-loaded cationic solid lipid nanoparticles (cSLN:siEphA2) for use in the treatment of advanced cancers with high levels of EphA2 and investigate its co-administration with histone demethylase inhibitor JIB-04 in normal prostate (RWPE-1, PWR-1E) and prostate cancer (LNCaP, DU145, PC-3) cells. Materials and Methods: Nanoparticles were prepared using modified hot microemulsion method and were characterized by NanoZS, TEM, and SEM. Complexation with siRNA and protection against nucleases were evaluated by gel electrophoresis. Cellular uptake, gene silencing efficiency, and cytotoxicity were determined by flow cytometry and fluorescence microscopy, qRT-PCR and immunoblotting, and WST-8, respectively. PolyHEMA method, scratch assay, and crystal violet staining were used to form spheroids and analyze migration potential and clonogenicity, respectively. Results: Small-sized(25 mV), and stabile nanoparticles were developed using EQ1, DDAB, and DOTMA cationic lipids. cSLNs and nanostructured lipid carriers including EQ1 did not form siRNA-complexes. cSLN-Db including DDAB and cSLN-Dt including DOTMA formed siRNA-complexes and protected siRNA against nucleases. Cellular uptake of cSLN-Db was higher than cSLN-Dt and Dharmafect-2 in DU145 and PC-3. cSLN-Db:siEphA2 showed effective silencing similar to Dharmafect-2 in PC-3 (p0.05). The anti-cancer effect of siEphA2 and JIB-04 co-administration was due to JIB-04. Conclusion: In this study, a new DDAB-cSLN formulation was developed for siRNA delivery. In vitro data regarding the use of this formulation and JIB-04 for prostate cancer therapy were presented to the literature.
Benzer Tezler
- Beyin tümörü tedavisinde antikanser ilaçlarının nazal yolla aktarımı için lipit temelli taşıyıcıların geliştirilmesi
Development of lipid based carriers for the nasal delivery of anticancer drugs in the treatment of brain tumor
BURCU ÖKMEN ALTAŞ
Yüksek Lisans
Türkçe
2021
Kimya MühendisliğiHacettepe ÜniversitesiKimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. NİHAL AYDOĞAN
DR. ÖĞR. ÜYESİ GÖKÇE DİCLE KALAYCIOĞLU
- Controlled delivery of chalcone via biopolyester nanohybrid
Biyopoliester nanohibrit ile kalkonun kontrollü salımı
YASEMİN KAPTAN
Doktora
İngilizce
2022
Biyoteknolojiİstanbul Teknik ÜniversitesiKimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. FATOŞ YÜKSEL GÜVENİLİR
- Meme kanserinin immünoterapisinde rekombinant protein içeren yeni nanoformülasyonların geliştirilmesi karakterizasyonu ve etkinliğinin ın vıtro incelenmesi
Development, characterization and investigation of efficacy of new nanoformulations containing recombinant protein in immunotherapy of breast cancer in vitro
SAHAR DINPARVAR
Doktora
Türkçe
2023
BiyolojiYıldız Teknik ÜniversitesiBiyomühendislik ve Malzeme Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. DİLEK BALIK
PROF. DR. ADİL M. ALLAHVERDİYEV
- pH responsive nano carriers for anti cancer drug delivery
pH duyarlı anti kanser ilac taşıyıcı nanosistemler
SHAHLA BAGHERIFAM
Doktora
İngilizce
2013
BiyoteknolojiOrta Doğu Teknik ÜniversitesiPolimer Bilim ve Teknolojisi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. NESRİN HASIRCI
PROF. DR. VASIF NEJAT HASIRCI
- The development of multifunctional nanoplatforms for targeted dual drug delivery
Hedefli, ikili ilaç taşıma sistemleri için fonksiyonel nano-platformların geliştirilmesi
ERHAN DEMİREL
Doktora
İngilizce
2022
Biyomühendislikİstanbul Medipol ÜniversitesiBiyomedikal Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. YASEMİN YÜKSEL DURMAZ