Mycobacterium tuberculosis MMAA4 proteininin tütün bitkisinde üretilmesi
Production of Mycobacterium tuberculosis MMAA4 protein in tobacco plant
- Tez No: 643048
- Danışmanlar: DOÇ. DR. SEZER OKAY
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyoteknoloji, Biotechnology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2020
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Çankırı Karatekin Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 67
Özet
Mycobacterium tuberculosis'in neden olduğu tüberküloz (TB), günümüzde de çok sayıda insanın ölümüne yol açan aşı ile önlenebilir bir hastalıktır. BCG, TB'a karşı kullanılan tek onaylı aşıdır, ancak bu aşının yetişkinlerde ve yaşlılarda korunması yetersizdir. Yeni etkili anti-TB aşıları geliştirmek için çalışmalar devam etmektedir. Bu çalışmanın amacı, M. tuberculosis'in virülans faktörlerden biri olan ve immün yanıtı tetikleme kapasitesi gösterilen MmaA4 proteinini kodlayan geni tütün bitkilerine aktarmak ve rekombinant TB aşısının geliştirilmesi için MmaA4 antijenik proteininin tütün bitkisinde potansiyel üretimini sağlamaktır. Bu amaçla, M. tuberculosis mmaA4 geni pGFPGUS+ vektörüne klonlandı. Daha sonra pGFPGUS+mmaA4 ve kontrol grubu olarak sadece pGFPGUS+ plazmitleri Agrobacterium tumefaciens'e aktarıldı. Rekombinant A. tumefaciens hücreleri aracılığıyla tütün bitkileri transforme edildi. pGFPGUS+mmaA4 ile oluşturulan transgenik tütün bitkilerinde mmaA4 geninin varlığı PZR yöntemiyle doğrulandı. Rekombinant MmaA4 proteininin transgenik tütünlerde üretimini göstermek için SDS-PAGE ve Western blot analizleri gerçekleştirildi ancak mmaA4 genini taşıyan ve taşımayan transgenik bitkiler arasında bir fark gözlenmedi. Transgenik tütünlerde MmaA4 proteininin üretiminin görülmemesi, bakteri geninin bitkide ifade edilmesi için kodon optimizasyonu yapılmamasına bağlanmıştır.
Özet (Çeviri)
Tuberculosis (TB), caused by Mycobacterium tuberculosis, is a vaccine-preventable disease still causing deaths of numerous humans. BCG, is the only licenced vaccine against TB. However, protection of this vaccine is insufficient among adults and elderlies. The studies on new and efficient anti-TB vaccines are ongoing. The aim of this study is to transfer the gene encoding MmaA4, a virulence factor of M. tuberculosis of which capacity for immune response stimulation was shown, and to provide the potential production of antigenic MmaA4 protein in tobacco plants for development of a recombinant TB vaccine. Fort his purpose, M. tuberculosis mmaA4 gene was cloned into pGFPGUS+ vector. Next, pGFPGUS+mmaA4 and pGFPGUS+ only as a control group were transferred into Agrobacterium tumefaciens. Tobacco plants were transformed via recombinant A. tumefaciens cells. The presence of mmaA4 gene was verified via PCR in transgenic tobacco plants transformed with GFPGUS+mmaA4. To show the production of recombinant MmaA4 protein in transgenic tobaccos, SDS-PAGE and Western blot analyses were performed. However, there was no difference between the transgenic plants carrying mmaA4 gene or not. Inability to observe the production of MmaA4 protein in transgenic tobaccos was attributed not to perform a codon optimization to express the bacterial gene in plant.
Benzer Tezler
- Mycobacterium tuberculosis suşlarının duyarlılık testinde kullanılan sensititre mycotb panel yönteminin performansının agar proporsiyon yöntemi ile karşılaştırılması
A comprasion of performance of the sensititre mycotb panel and the agar proportion method for the susceptibility testing of mycobacterium tuberculosis
FATMA KAMER VARICI BALCI
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2015
MikrobiyolojiEge ÜniversitesiTıbbi Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. CENGİZ ÇAVUŞOĞLU
- Mycobacterıum tuberculosıs kompleks suşlarının primer ilaçlara duyarlılığının mgıt, e-test ve agar proporsiyon yöntemleri ile araştırılması
Detection of the susceptibility of mycobacterium tuberculosis complex strains to the first line drugs by the mgit, e-test and agar proportion methods
NURAN ARSLAN KARABULUT
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2008
MikrobiyolojiSağlık BakanlığıMikrobiyoloji ve Klinik Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı
DR. BANU BAYRAKTAR
- Mycobacterium tuberculosis kompleksine ait suşlarda bedaquiline etkinliğinin araştırılması
Investigation of bedaquiline activity in strains of mycobacterium tuberculosis complex
DİDEM ÖZPERÇİN
Doktora
Türkçe
2024
Mikrobiyolojiİstanbul ÜniversitesiTıbbi Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. DİLEK ŞATANA
- 23S rRNA'yı hedef alan oligonükleotit prob ile Mycobacterium tuberculosis kompleks bakterilerinin fısh yöntemi ile hızlı identifikasyonu
Rapid identification of Mycobacterium tuberculosis complex using oligonucleotide probe targeting 23S rRNAby fish method
MELİSA TÜMKAYA
Yüksek Lisans
Türkçe
2024
MikrobiyolojiMersin ÜniversitesiMoleküler Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. GÜLAY BÖREKÇİ
- Konak makrofajlarında mikobakteriyel enfeksiyonlara karşı doğal ve sentetik terapötik bileşiklerin antimikobakteriyel aktivitesinin ve moleküler mekanizmalarının değerlendirilmesi
Evaluation of the antimycobacterial activity and molecular mechanisms of natural and synthetic therapeutic compounds against mycobacterial infections in host macrophages
SİBEL DAĞLI
Doktora
Türkçe
2024
MikrobiyolojiHatay Mustafa Kemal ÜniversitesiTıbbi Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. NİZAMİ DURAN