Isolation and Genotyping of adherent-invasive Escherichia coli (AIEC) strains from Crohn's patients and quantification by qPCR
Crohn hastalarından adherent-invaziv Escherichia coli (AIEC) suşlarının izolasyonu, genotiplendirilmesi ve qPCR ile miktar tayini
- Tez No: 645011
- Danışmanlar: PROF. DR. ATAÇ UZEL, DR. NALAN GÜLŞEN ÜNAL
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Mikrobiyoloji, Microbiology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2020
- Dil: İngilizce
- Üniversite: Ege Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Temel ve Endüstriyel Mikrobiyoloji Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: 113
Özet
Amaç: Adherent invaziv Escherichia coli (AIEC), özellikle Crohn hastalığı (CD) olmak üzere enflamatuar bağırsak hastalıklarının (IBD) patogenezinde rol oynar. Bu çalışmanın amacı, klinik önemi olan AIEC suşlarının virülans faktörlerini izole etmek, tanımlamak, genotiplendirmek ve karakterize etmektir. Yöntemler: 24 aktif CD hastasından ve 15 sağlıklı kontrolden (HC) ileal ve kolon biyopsileri toplanmıştır. E. coli suşları standart biyokimyasal testlerle tanımlanmıştır ve MALDI-TOF (bioMerieux, Fransa) sistemi ile doğrulanmıştır. AIEC fenotipleri, yapışma, invazyon ve makrofaj içinde hayatta kalma deneyleri ile belirlenmiştir. Genetik virülans faktörleri ve genotipleme özellikleri sırasıyla PCR ve PFGE ile belirlenmiştir. E. coli suşlarının bolluğu ve antibiyogram profili sırasıyla qPCR ve VITEK® 2 (bioMerieux, Fransa) otomatik sistemi ile belirlenmiştir. Bulgular: 17 CD hastasından ve 14 HC'den E. coli suşları izole edilmiştir, bunların 10'u (%59) ve 7'si (%50) AIEC suşu olarak belirlenmiştir. CD'lardan izole edilen AIEC olmayan suşlara kıyasla sırasıyla chuA ve ratA genlerinin AIEC ile ilişkili en önemli genetik belirteçler olduğunu ve HC p = 0.0119, 0.0094 olduğu bulunmuştur. CD hastalarından elde edilen E. coli suşlarının çoğu, en az bir antibiyotiğe karşı HC'ye (%29) kıyasla antibiyotik direnci (%71) göstermiştir. AIEC benzeri suşlar, AIEC benzeri olmayan suşlara (%53) ve (%21) kıyasla antibiyotiklere karşı daha dirençlidir. Sonuçlar: AIEC suşları ile AIEC olmayan suşlar arasında chuA ve ratA virülans genlerinin prevalansı ve antibiyotik direnç profilleri açısından önemli farklılıklar belirlenmiştir. Ek olarak, CD hastalarından izole edilen AIEC suşlarının, sırasıyla %80, %14 HC'den izole edilen AIEC suşlarına göre penisilin/beta laktam ve aminoglikozit antibiyotiklere karşı daha dirençli olduğu bulunmuştur.
Özet (Çeviri)
Background: Adherent invasive Escherichia coli (AIEC) are implicated in the pathogenesis of inflammatory bowel diseases (IBD) particularly Crohn‟s disease (CD). The aim of this study is to isolate, identify, genotype, and characterize the virulence factors and the clinical significance of AIEC strains. Methods: Ileal and colonic biopsies from 24 active CD patients and 15 healthy controls (HC) were collected. E. coli strains were identified by standard biochemical tests and confirmed by MALDI-TOF (bioMerieux, France) system. The AIEC phenotypes were determined by the adhesion, invasion, and survival within macrophages assays. The genetic virulence factors and genotyping characteristics were determined by PCR and PFGE respectively. The abundance and the antibiogram profile of E. coli strains was determined by qPCR and VITEK®2 (bioMerieux, France) automated system respectively. Results: E. coli strains from 17 CD patients and 14 HC were isolated, 10 (59%) and 7 (50%) of them were identified as AIEC strains, respectively. We found that chuA and ratA genes were the most significant genetic markers associated with AIEC compared to non-AIEC strains isolated from CD patients and HC p = 0.0119, 0.0094 espectively. The majority of E. coli strains obtained from CD patients showed antibiotic resistance (71%) compared to HC (29%) against at least one antibiotic. The AIEC-like strains were more resistant to antibiotics compared to non-AIEC-like strains (53%) and (21%) respectively. Conclusions: We have determined significant differences between AIEC strains and non-AIEC strains in terms of the prevalence of chuA and ratA virulence genes and the antibiotic resistance profiles. In addition, AIEC strains isolated from CD patients were found to be more resistant to penicillin/beta lactam and aminoglycoside antibiotics than AIEC strains isolated from HC 80%, 14% respectively.
Benzer Tezler
- Erzurum ilinde süt sığırları ve risk grubu insanlarda mycobacterium avium subspecies paratuberculosis'in izolasyonu ve MİRU-VNTR yöntemiyle genotiplendirilmesi
Isolation and genotyping of mycobacterium avium subspecies paratuberculosis in dairy cattle and risk group humans in Erzurum province and genotyping by MİRU-VNTR method
YASEMİN ERDOĞAN
Doktora
İngilizce
2022
MikrobiyolojiAtatürk ÜniversitesiTıbbi Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. HAKAN USLU
- Broiler piliçlerden campylobacter izolasyonu ve genotiplendirilmesi
Isolation and genotyping of campylobacter from broiler chickens
SEDA TURTAY
Yüksek Lisans
Türkçe
2015
MikrobiyolojiFırat ÜniversitesiMikrobiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. HASAN BASRİ ERTAŞ
- Tavuk parçalama hattında listeria monocytogenes ile kontaminasyon kaynaklarının belirlenmesi ve genotiplendirilmesi
Identification and genotyping of sources of contamination with listeria monocytogenes in chicken cutting line
KADİR EMRE GİRGİN
Doktora
Türkçe
2018
Besin Hijyeni ve TeknolojisiOndokuz Mayıs ÜniversitesiBesin Hijyeni ve Teknolojisi Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ÖZGÜR ÇADIRCI
- Faklı kaynaklardan Enterococcus faecalis ve Enterococcus faecium izolasyonu, moleküller tanısı ve genotiplendirilmesi
The isolation of Enterococcus faecalis and Enterococcus faecium from different sources and their molecular diagnosis and genotyping
KEREM DİKEN
- Entansif broyler işletmeleri ile kırsal tavukçuluk işletmelerindeki hayvanlardan izole edilen enterokokların fenotipik ve genotipik özellikleri üzerinde çalışmalar
Studies on phenotyping and genotyping characterization of enterococcus spp. isolated from entansive broiler farm and rural poultry establishment
ZAHİDE DİLİK
Doktora
Türkçe
2008
MikrobiyolojiKırıkkale ÜniversitesiMikrobiyoloji (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ERSİN İSTANBULLUOĞLU