Meme kanseri hücre hattında 4-Aminopiridin'in etki mekanizmasının belirlenmesi
Investigation of 4-Aminopyridine effect mechanism in breast cancer cell line
- Tez No: 648069
- Danışmanlar: DOÇ. GÜNSELİ AYŞE GARİP
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyofizik, Biophysics
- Anahtar Kelimeler: Aminopiridinler, Hücre dizisi, Kalsiyum, Meme, Meme hastalıkları, Meme neoplazmları, Aminopyridines, Cell line, Calcium, Breast, Breast diseases, Breast neoplasms
- Yıl: 2020
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Marmara Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyofizik Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Amaç: Bu çalışmada, bir potasyum kanal blokeri olan ve hücre membran potansiyelini değiştirdiği daha önce yapılan çalışmalarla gösterilmiş olan 4-Aminopiridin'in (4-AP) yol açtığı hücre ölümü mekanizmasının araştırılması hedeflenmektedir. Gereç ve yöntem: Çalışmada, östrojen pozitif MCF-7 (ATCC HTB- 22) ve kontrol olarak fibroblast L-929 (ATCC CCL-1) hücre hatları kullanılmıştır. z-vad-fmk, sikloheksimid (CHX) ve 2-Aminoetoksidifenil borat'ın (2-APB) ayrı ayrı ve 4-AP ile kombine kullanımları sonucu canlılık üzerinde meydana getirdiği değişimler tripan mavisi ile hücreler sayılarak belirlenmiştir. Hücre içi kalsiyum (Ca+2) değişimleri Fura-2 AM floresan boya ile, membran potansiyeli değişimleri DiBAC4(3) ile floresan spektrofotometrede belirlenmiştir. İstatistiksel değerlendirmelerde tek yönlü ANOVA yöntemi kullanılmıştır ve p değeri 0,05'ten küçük değerler anlamlı kabul edilmiştir. Bulgular: 4-AP uygulamasından sonra hücrelerde vakuol oluşumu gözlendi. 4-AP uygulamasından 1 saat önce ayrı ayrı z-vad-fmk, CHX ve 2-APB ile ön işleme tabi tutulan hücrelerde MCF-7 ve L-929 hücre hatları için sağ kalım artmıştır. Kaspaz inhibitörü ile ön tedavi sonrası canlılık artışı z-vad-fmk apoptotik hücre ölümüne işaret ederken, paraptoz inhibitörü CHX ile ön tedavi sonrası sağkalımda artış ve vakuol oluşumu paraptotik hücre ölümüne işaret etmektedir. 4-AP, beklendiği gibi hücre içi Ca+2 'da artışa neden oldu. IP3 reseptör bloke edici 2-APB ile ön muameleden sonra hücre içi Ca+2 miktarında azalma bulundu ve bu sonuç, sağ kalım artışıyla ilişkilendirildi. 4-AP, her iki hücre hattında da depolarizasyona neden oldu. Sonuçlar: Meme kanseri hücre hattında 4-AP uygulaması, apoptoz öncesi paraptotik sürecin başlaması ve bu sürecin apoptozu tetiklemesi ile hücre ölümünün gerçekleştiğini düşündürmektedir.
Özet (Çeviri)
Objective: In this study, it is aimed to investigate the mechanism of cell death caused by 4-Aminopyridine (4-AP), which is a potassium channel blocker and has been shown in previous studies to change cell membrane potential. Material and method: Estrogen positive MCF-7 (ATCC HTB-22) and fibroblast L-929 (ATCC CCL-1) cell lines were used in the study. The changes caused by z-vad-fmk, cycloheximide (CHX) and 2-aminoethoxydiphenyl borate (2-APB) separately and in combination with 4-AP were determined by counting cells with trypan blue. Intracellular calcium (Ca+2) changes were determined with Fura-2 AM fluorescent dye, membrane potential changes with DiBAC4(3) in fluorescence spectrophotometer. Statistical evaluations were made using the one-way ANOVA method, and values with a p value less than 0.05 were considered significant. Results: Vacuole formation was observed in the cells after 4-AP application. Survival was increased for MCF-7 and L-929 cell lines in cells pretreated with z-vad-fmk, CHX and 2-APB separately for 1 hour before 4-AP administration. Viability increase upon pre-treatment with caspase inhibitör z-vad-fmk suggested apoptotic cell death while increased survival after pretreatment with paraptosis inhibitör CHX and vacuole formation suggested paraptotic cell death. 4-AP caused an increase in intracellular Ca+2 as expected. A decrease in the amount of intracellular Ca+2 was found upon pretreatment with IP3 receptor blocker 2-APB which correlated with an increase in survival. 4-AP caused depolarization in both cell lines. Conclusions: 4-AP application in breast cancer cell line suggests that cell death occurs with the initiation of the paraptotic process before apoptosis and this process triggers apoptosis.
Benzer Tezler
- Meme kanseri hücre hattinda ilaç direnci ve pluripotensi ilişkisinin değerlendirilmesi
The evaluation of the relationship between drug resistance and pluripotency in breast cancer cell line
BAŞAK BİLGE SÜER
Yüksek Lisans
Türkçe
2024
Moleküler TıpErciyes ÜniversitesiKök Hücre Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SERVET ÖZCAN
- Meme Kanseri MCF-7 Hücre Hattında Arbutinin Etkileri
Effects of Arbutin on Human Breast Cancer MCF-7 Cell Une
AYŞE NUR SARIOVA
- MDA-MB-231 meme kanseri hücre hattında flavopiridolün endoplazmik retikulum stresi bağlantılı apopitoza etkisinin araştırılması
Investigation of the effects of flavopiridol on endoplasmic reticulum stress-connected apopitosis in the breast cancer of MDA-MB-231
EMEL ÖZTÜRK
Doktora
Türkçe
2020
Histoloji ve EmbriyolojiErciyes ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. BİRKAN YAKAN
DOÇ. DR. ZÜHAL HAMURCU
- Morfolin ve amino grubu taşıyan p-ter-bütilkaliks[4]arene bileşiklerinin nanofiberlerinin MCF-7 meme kanseri hücre uygulamaları
Use of synthesis nanofibers of morpholine and amino groups carrying p-tert-butylcalix [4] arene compounds in MCF-7 breast cancer cell applications
SEDA DEMİRCAN
Yüksek Lisans
Türkçe
2017
BiyoteknolojiSelçuk ÜniversitesiNanoteknoloji ve İleri Malzemeler Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ŞEREF ERTUL
- Curcumin ve hidroksiürea' nın gen düzenleyici ve anti-anjiyogenik etkilerinin meme kanseri hücre hattında araştırılması
Investigation of anti-angiogenic and gene regulatory effects of curcumin and hydroxyurea in breast cancer cell line
GÜLER GÜL
Yüksek Lisans
Türkçe
2017
Moleküler TıpDokuz Eylül ÜniversitesiMoleküler Tıp Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. YASEMİN SOYSAL