Geri Dön

Kütdiken limon (Citrus limon (l.) burm f.) çeşidinde genetik transformasyon ve transgenik bitkilerin elde edilmesi

Genetic transformation of kütdiken lemon (Citrus lemon (l.) burm f.) variety and regeneration of transgenic plants

  1. Tez No: 65406
  2. Yazar: MUKADDER KAYIM
  3. Danışmanlar: PROF. DR. N. KEMAL KOÇ
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Ziraat, Agriculture
  6. Anahtar Kelimeler: Kütdiken limonu, genetik transformasyon, Agrobacterium, protoplast, DNA-uptake, Kütdiken. lemon, Agrohactermm, genetic transformation, protoplast, DNA-uptake. n
  7. Yıl: 1997
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Çukurova Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Bitki Koruma Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 200

Özet

öz DOKTORA TEZİ KÜTDİKEN LÎMON (Citrus Limon (L.) Burm. f.) ÇEŞİDİNDE GliNliTİK TRANSFORMASYON VB TRANSGKNİK BİTKİLERİN ELDE EDİLMESİ Mukadder KA YIM ÇUKUROVA ÜNİVERSİTESİ FEN BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜ BİTKİ KORUMA ANABİLİM DALI Danışman : Prof. Dr. N. Kemal KOÇ Yıl: 1997, Sayfa: 176 Jüri : Prof. Dr. N. Kemal KOÇ :Prof. Dr. M. Asil YILMAZ Prof. Dr. Haluk SORAN Agrobacterium ve PEG aracılığı ile Küldiken limon (Citrus limon (L.) Burm.f.) çeşidinde gen transferi sisteminin kurulması ve transgenik bitkilerin elde edilmesi amacı ile yapılan bu çalışmada sürgün ucu, yaprak, kotiledon yaprak, epikotil, hipokotil, gövde parçası, embriyo ve ovüler kallusların transformasyonunda doğal ve disarmed Agrobacterium ırkları kullanılmıştır. Doğal A. tumefaciens ırkları ile Kütdiken limonu eksplantlarının transformasyonu sonucunda en yüksek etkinliği yaprak eksplantlarında % 100 tümör oluşumu ile A208, bunu % 83 ile A396 ve embriyolarda % 13.04 etkinliği ile A348 ırkı izlemiştir. Doğal A. rhizogenes ile yapılan transformasyonlarda ise hiç bir eksplant dokuda saçak kök oluşumu gözlenmemiştir. Ölçülebilir markır olarak gus genini, seçilebilir markır olarak kanamisine dayanıklılığı sağlayan npt U genini taşıyan ikili vektörlerden pVW432 plazmidini içeren disarmed LBA4404 bakteri ırkı ile yapılan transformasyonlarda stabil transformasyon sıklıkları histokimyasal GUS analizinin güs geni için pozitif sonuç vermesine göre değerlendirilmiştir. Stabil transformasyon sıklıkları tohumlarda %53.3, epikotil sürgünlerinde % 3.3, KT2 ve KS2 gövde parçalarında % 28.5-50 ve ovüler kalkışlarda % 0.001 olarak saptanmıştır. NPT 11 ve dalapon herbisitine dayanıklılığı sağlayan dhl genini içeren pVW291 plazmidini içeren LBA4404 ve EHA101 ırkları ile Kütdiken limonu epikotil parçalarının transformasyonları sonucunda % 33.3-37.5, KT2 ve KS2 gövde parçalarının transformasyonları sonucunda ise % 25-58.3 transformasyon sıklığında tahmini transgenik sürgünler elde edilmiştir. NPT U ve gus genini içeren transgenik sürgün ve doku parçalan southern blot hibridizasyonu ve PCR analizleri ile de ispatlanmıştır. PEG aracılığı ile sirküler yapıdaki pBI221.2 plazmid DNA'mn Kütdiken limonu ovüler kallus protoplastlarına direkt aktarımı ile 6x1 06 transformasyon sıklığında stabil transgenik hücreler histokimyasal GUS analizi ile belirlenmiştir.

Özet (Çeviri)

ABSTRACT PhD. THESIS GENETIC TRANSFORMATION OF KUTDIKEN LEMON ( Citrus Limon (L.) Burnt, f. ) VARICTY AND REGENERATION OF TRANSGENIC PLANTS Mukadder KAYIM DEPARTMENT OF PLANT PROTECTION INSTITUTE OF NATURAL AND APPLIED SCIENCES UNIVERSITY OF ÇUKUROVA Supervisor :Prof. Dr. N. Kemal KOÇ Year: 1997, Page: 176 Jury Prof. Dr. N. Kemal KOÇ Prof. Dr. M. AsÜ YILMAZ Prof. Dr. Haluk SORAN This study was carried out in order to obtain transgenic lemon (Citrus lemon (L.) ev Kütdiken) plants by setting up gene transfer system via Agrobactcrium and PEG. Both wild type and disarmed strains of Agrobacterium were used to transform several different explants including shoot-tips, leaves, cotyledon leaves, epicotyles, hypocotyles, stem segments, somatic embryos and ovular calli. After the transformation of Kütdiken lemon explants with wild type strains of A.tumefaciens, the highest efficiency in tumour formation was scored at 100 % with leaf explants by A208 strain. It is followed with 83 % by A396 strain and 13.04 % by A348 strain on embryos. In the case of transformation experiments carried out using wild type A. rhizogenes, no hairy-root formation was observed on the explants. In the transformation undertaken with disarmed LBA4404 strain harboring the binary vector pVW432 plasmid carrying the genes for the scorable marker gus and selectable marker npt II determining resistance to kanamycin, stable transformation efficiencies were evaluated according to histochemical GUS+ assays for gus gene. The stable transformation efficiencies were estimated to be 53.3% in seeds, 3.3% in epicotyl shoots, 28.5-50% in stem segments of KT2 and KS2 lemon lines and 0.001% in ovular calli. Putative transgenic shoots were obtained from the transformation of epicotyl segments by the 33.3-37.5% frequency and stem tissues of KT2 and KS2 lines by the 25-58.3% frequency where LBA4404 and EHA101 bacteria strains harboring pVW291 plasmid including npt II gene and dhl gene determining resistance to dalapon herbicide. Transgenic shoots and tissue segments containing npt II and gus genes were also confirmed by southern blot and PCR analysis. Stable transgenic cells were detected by histochemical GUS analysis in a 6x1 06 transformation frequency where the cells come out by direct transformation of circular PB 122 1.2 plasmid DNA through PEG into ovular calli protoplasts of Kütdiken lemon.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    256387

    Bazı limon çeşitlerinin (Citrus lemon (L.) Burm f.) uçkurutan hastalığı (Phoma tracheiphila (Petri) Kanc. et Ghik.)'na karşı dayanıklılık mekanizmasının fenolik bileşikler bazında belirlenmesi

    Determination of hesperidin and limonin levels as part of the defense mechanism of some lemon varieties (Citrus lemon (L.) Burm f.) against mal secco disease (Phoma tracheiphila (Petri) Kanc.et Ghik.)

    KONCE BAYDAR

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2010

    BiyoteknolojiÇukurova Üniversitesi

    Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. N. KEMAL KOÇ

  2. Tez No

    95541

    Limonda uçkurutan hastalığı etmeni phoma tracheiphila (kanc. et. ghick.)'nın toksinine dayanıklı hücre hatlarının in vitro seleksiyonu ve moleküler analizi

    In vitro selection of resistant lines to phoma tracheiphila (kanc. et. ghick.) toxin the agent of mal secco disease and molecular characterization of the lines

    BERNA BAŞ

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2000

    ZiraatÇukurova Üniversitesi

    Bitki Koruma Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. N. KEMAL KOÇ

    DOÇ. DR. ALİ ERKILIÇ

    YRD. DOÇ. DR. AKİF ESKALEN

  3. Tez No

    547452

    Limonda farklı kimyasal uygulamalarının muhafaza üzerine etkileri

    The effect of different chemical treatments on storage of lemon

    NURHAN ÇILDIR

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2019

    ZiraatÇukurova Üniversitesi

    Bahçe Bitkileri Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. OKAN ÖZKAYA

  4. Tez No

    688672

    Kütdiken limonunda üç farklı dönemde derim ve derimden sonra kalsiyum uygulamalarının muhafaza süresi ve meyve kalite kriterlerine etkisi

    Effect of three different harvest times and post-harvest calcium treatments on the storage period and fruit quality criteria in 'kütdi̇ken' lemon

    YAKUP TOLGA KAYNAR

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2021

    ZiraatÇukurova Üniversitesi

    Bahçe Bitkileri Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ÖMÜR DÜNDAR

  5. Tez No

    360909

    Adana ili limon yetiştiricilik alanlarında görülen turunçgil sarı damar açılması virüs (TSDAV) hastalığının yaygınlığının araştırılması.

    The resecarch of growing area lemon prevalence of citrus yellow vein clearing virus (CYVCV) in Adana

    HİLAL SAYALI

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2014

    ZiraatÇukurova Üniversitesi

    Bitki Koruma Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. NÜKET ÖNELGE

Geri Dön