Determination of trace analytes in biological fluids by Q-TOF LC-MS using isotope dilution method
Vücut sıvılarında eser analitlerin izotop seyreltme yöntemi kullanılarak Q-TOF LC-MS ile tayini
- Tez No: 655033
- Danışmanlar: PROF. DR. BELMA ÖZBEK, PROF. DR. SEZGİN BAKIRDERE
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Kimya, Kimya Mühendisliği, Chemistry, Chemical Engineering
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2020
- Dil: İngilizce
- Üniversite: Yıldız Teknik Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Kimya Mühendisliği Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: 217
Özet
Herhangi bir eser analitin tayini, farklı matrislerdeki analitlerin düşük konsantrasyon seviyeleri için yöntem performansıyla ilgili bir dizi soruyu beraberinde getirmektedir. Son zamanlarda geliştirilen yeni yöntemlerden biri olan izotop seyreltme yöntemi, eser analitlerin analizi için yüksek hassasiyette, oldukça duyarlı ve seçici bir analitik yöntemdir. Bu çalışmada, erektil ilaçların ve aminoasitlerin izotopik seyreltme stratejisi kullanılarak tayin edilmeleri sunulmaktadır. Bu amaçla, analitik tayinler Kuadropol-Uçuş Zamanlı Sıvı Kromatografisi – Kütle Spektrometresi sistemi kullanılarak gerçekleştirilmiştir. Sildenafil, tadalafil, vardenafil ve avanafili kapsayan erektil ilaçlar idrarda ve plazmada ters faz yöntemi ile kromatografik olarak ayrılmıştır. Bu analitler için daha yüksek hassasiyet elde edebilmek için, Manyetik Katı Faz Ekstraksiyonu yöntemi uygulanmıştır ve kombine yöntem için tayin limitleri 0.16 – 0.94 ng g-1 aralığında tespit edilmiştir. Sunulan bu tezin ikinci bölümünde ise biyolojik matrislerdeki 17 serbest amino asidin seçici ve duyarlı bir yöntem ile tayin edilmesi üzerine yoğunlaşılmıştır. Bu bağlamda, türevlendirilmemiş serbest amino asitlerin tayini için hidrofilik etkileşim kromatografisi, türevlendirilmiş amino asitlerin tayini için ise ters faz kromatografisini içeren iki farklı yaklaşım üzerine çalışılmıştır. Tayin limitleri türevlendirilmemiş ve türevlendirilmiş amino asitler için sırasıyla; 0.03 – 2.26 µmol kg-1 ve 0.016 - 0.266 µmol kg-1 aralıklarında tespit edilmiştir. Geliştirilen yöntemlerin doğruluğu ve kesinliği, matris eşleştirme stratejisi kullanılarak idrar, plazma ve serum örneklerinde geri kazanım deneyleri ile değerlendirilmiştir. Yüzde geri kazanımlarda tatmin edici sınırlar içerisinde sonuçlar elde edilmesine rağmen, benzeri görülmemiş analitik kalitede kantitatif sonuçlar (%100'e yakın doğruluk) elde etmek için her çalışmada ayrıca izotop seyreltme stratejisi de uygulanmıştır. Bu çalışmada sunulan analitik yöntemler, karmaşık biyolojik matrislerde erektil ilaçların ve amino asitlerin doğru ve kesin tespiti için basit ve uygulanabilir yollar göstermektedir. Geliştirilen bu yöntemlerin klinik uygulamalarda seçilen analitlerin miktarlandırılması için uygulanması, bu analitlerin fizyolojik seviyelerine bağlı olarak ortaya çıkabilen hastalıkları teşhis etmek ve taramak, ya da bazı hastalıklar için yeni biyobelirteç olma ihtimallerini doğru değerlendirmek adına oldukça önemli bir yer tutmaktadır.
Özet (Çeviri)
Determination of trace analytes brought a series of questions related to the method performance for low concentration levels in diverse matrices. As one of the relatively new developments, the isotope dilution method is a highly sensitive and selective analytical method with high precision for trace analysis. This thesis presents the determination of erectile drugs and amino acids using isotope dilution strategy. All determinations were performed with Quadrupole–Time–of–Flight Liquid Chromatography–Mass Spectrometry system. The chromatographic separation of erectile drugs including sildenafil, tadalafil, vardenafil and avanafil in urine and plasma was performed on a reversed phase column. To achieve higher sensitivity for analytes, magnetic solid phase extraction was employed and the detection limits for combined method were found to be between 0.16 – 0.94 ng g-1. In the second part of this thesis, it was focused on the selective and sensitive determination of 17 free amino acids in biological matrices. In this context, two approaches were employed including hydrophilic interaction chromatography for underivatized amino acids and reversed phase chromatography for derivatized amino acids. The detection limits were obtained between 0.03 – 2.26 µmol kg-1 and 0.016 and 0.266 µmol kg-1 for underivatized and derivatized amino acids, respectively. Accuracy and precision of developed methods were evaluated by performing recovery experiments in urine, plasma and serum samples using matrix matching strategy. Despite obtained satisfactory limits in percent recoveries, isotope dilution strategy was employed for each study to obtain quantitative results with unprecedented analytical quality (accuracy levels close to 100%). The analytical methods presented in this study provided simple and feasible routes for accurate and precise determinations of erectile drugs and amino acids in complex biological matrices. Therefore, these methods could be easily adapted for quantification of selected analytes in clinical applications which have crucial importance to diagnose and screen disorders linked to physiological levels of these analytes or to discover new biomarkers.
Benzer Tezler
- İnsan saçı örneklerinde eser elementlerin katı örneklemeli atomik absorpsiyon yöntemi ile tayini
Determination of trace elements in human hair by solid sampling atomic absorption spectrometry
ASLI BAYSAL
- Eser metallerin analizleri konusunda türkiye' de tamamlanan yüksek lisans ve doktora tezlerinin bilim dallarına göre sınıflandırılması ve karşılaştırılması
Classification and comparison of the completted master and doctorate theses on trace metal analyses in turkey according to science subjects
ARZU TATAR
- Development and validation of chromatographic and voltammetric methods for analysis of pharmaceutically important compounds
Farmasötik önemi olan bileşiklerin analizine yönelik voltammetrik ve kromatografik yöntem geliştirilmesi validasyonu
KEMAL VOLKAN ÖZDOKUR
- Radyofrekans radyasyonlara maruz kalan hamilelerin plasenta ve kordon kanlarında protein oksidasyonu, oksidatif stres parametreleri ve oksidatif dna hasarının araştırılması
Investi̇gati̇on of protei̇n oxi̇dati̇on, oxi̇dati̇ve stress parameters and oxi̇dati̇ve dna damage i̇n placentas and cord blood of pregnant women who were exposed to radi̇ofrequency radi̇ati̇on
HAVA BEKTAŞ
- Characteristics of cold sprayed titanium based coatings
Soğuk gaz dinamik püskürtme yöntemiyle üretilmiş titanyum esaslı kaplamaların karakteristiği
AHMET HİLMİ PAKSOY
Yüksek Lisans
İngilizce
2017
Metalurji Mühendisliğiİstanbul Teknik ÜniversitesiMetalurji ve Malzeme Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MURAT BAYDOĞAN
DOÇ. DR. ERDEM ATAR
