Geri Dön

Gebeliğin farklı dönemlerinde insan plasentasında ubikütin proteazom sistemi proteinlerinin ekspresyonlarının ve fonksiyonlarının incelenmesi

Investigation of expressions and functions of ubiquitin proteasome system proteins in human placenta in different periods of pregnancy

PDF İndir

  1. Tez No: 666057
  2. Yazar: CANSU ŞAHİN
  3. Danışmanlar: PROF. DR. SEVİL ÇAYLI
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Histoloji ve Embriyoloji, Histology and Embryology
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2021
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Ankara Yıldırım Beyazıt Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 136

Özet

İmplantasyon ve plasenta gelişimi sürecinde trofoblastların invazyon ve migrasyonlarına etki eden çeşitli moleküler mekanizmalar bulunmaktadır. Son çalışmalarla, p97/VCP (Valosin-İçeren Protein) ve SVIP (Küçük VCP ile Etkileşen Protein)'in kanser hücrelerinin invazyonlarında ve Ubikütin Proteazom Sistemi (UPS)'ndeki önemleri bildirilmesine rağmen, bu proteinlerin insan plasenta gelişimindeki rolleri ve fonksiyonları bilinmemektedir. Bu nedenle çalışmanın ilk amacı bu proteinlerin farklı trimester insan plasentalarında ekspresyonlarını belirlemek ve karşılaştırmak, ikinci amacı ise bu proteinlerin ekstravillöz trofoblast hücreleri invazyon ve migrasyonlarına olası etkilerini belirlemektir. Bu amaçlar doğrultusunda, üç trimestere ait insan plasenta dokularında histokimyasal değerlendirmeler ve Taramalı Elektron Mikroskobisi kullanılmıştır. Protein ve gen analizleri immünohistokimya, immünofloresan, Western Blot ve qRT-PCR ile değerlendirilmiştir. Fonksiyonel çalışmalar için ekstravillöz trofoblast hücrelerinde (HTR-8/SVneo) p97/VCP inhibitörü (DBeQ) uygulaması ve p97/VCP-SVIP siRNA transfeksiyonlarıyla proteinlerin ekspresyonları baskılanmıştır. Bu baskılanmanın hücrelerin invazyon ve migrasyonlarına olan etkileri, gerçek zamanlı analiz sistemiyle (xCELLigence) belirlenmiştir. p97/VCP ve SVIP ekspresyonlarının 1. trimestere ait sitotrofoblastlarda ve sinsisyotrofoblastlarda yoğun olduğu gözlenmiştir. Western Blot ve qRT-PCR bulgularıyla 1. trimesterdeki ekspresyonların 2. trimesterde anlamlı düzeyde azaldığı ve 3. trimesterde tekrar arttığı belirlenmiştir. Otofaji proteinlerinden LC3II ve p62 ekspresyonları ise gebelik boyunca artmıştır. HTR-8/SVneo üzerinde DBeQ uygulamasının ve siRNA ile p97/VCP ekspresyonunun baskılanmasının, SVIP ekspresyonunu azalttığı ve otofajik proteinlerin (LC3II ve p62) ekspresyonlarını ise anlamlı derecede arttırdığı belirlenmiştir. DBeQ uygulaması ve p97/VCP siRNA transfeksiyonu hücrelerin invazyon ve migrasyonlarını anlamlı derecede azaltırken, SVIP siRNA transfeksiyonları hücrelerin invazyon ve migrasyonlarında artış sağlamıştır. Sonuç olarak UPS'de rol oynayan p97/VCP ve SVIP'in üç trimesterde farklı düzeylerde eksprese edildiklerinin belirlenmesi bu proteinlerin insan plasenta gelişimindeki önemini ortaya çıkarmıştır. Aynı zamanda ekstravillöz trofoblastların invazyon ve migrasyonlarını etkiledikleri belirlenerek gebeliğin sürdürülebilirliği ve preeklampsi gibi patolojilerde etkin olabilecekleri ortaya konulmuştur.

Özet (Çeviri)

During implantation and placental development, there are molecular mechanisms in the invasion and migration of trophoblasts. Recent studies have reported the importance of p97/VCP (Valosin-Containing Protein) and SVIP (Small VCP-Interacting Protein) in invasion of cancer cells and Ubiquitin-Proteasome System (UPS). Although many studies have been conducted during pregnancy, the roles of p97/VCP and SVIP are unknown. In the first stage, the aim of the study was to compare the expressions of these proteins in different trimester human placentas. In the second stage, it was aimed to examine the possible effects of these proteins on invasion and migration in functional studies with extravillous trophoblast cells. Histochemical evaluations and Scanning Electron Microscopy were used in placentas. Protein and gene analyses were performed by immunohistochemistry, immunofluorescence, Western Blot and qRT-PCR. Expressions were suppressed through extravillous trophoblast cell line HTR-8/SVneo by p97/VCP inhibitor (DBeQ) administration and p97/VCP-SVIP siRNA transfections. Changes in invasion and migration were determined by real-time analysis system (xCELLigence). In the 1st trimester, p97/VCP and SVIP expressions were found to be intense in cytotrophoblasts and syncyiotrophoblasts. In the Western Blot and qRT-PCR findings, the expressions in the 1st trimester decreased in the 2nd trimester and then increased again. Expressions of LC3II and p62 increased throughout pregnancy. It was determined that SVIP expressions decreased, LC3II and p62 increased significantly after DBeQ. DBeQ and p97/VCP siRNA transfection reduced invasion and migration of the cells. In addition, there was an increase in the SVIP siRNA groups in invasion and migration. As a result, the determination that p97/VCP and SVIP, which play a role in UPS, were expressed at different levels in trimesters revealed the importance of these proteins in human placental development. Also, it was revealed that extravillous trophoblasts affected invasion and migration, and that they might be effective in pathologies such as pregnancy sustainability and preeclampsia.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    487152

    Gebeliğin erken dönemlerinde sıçan uterus dokusunda heparin bağlayıcı epidermal büyüme faktörü'nün (HB-EGF) ekspresyonu

    Expression of heparin binding epidermal growth factor (HB-EGF) in the rat uterine tissue during early pregnancy

    SİNEM PEKŞEN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2018

    Histoloji ve EmbriyolojiMehmet Akif Ersoy Üniversitesi

    Histoloji ve Embriyoloji (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. HAKAN ÖNER

  2. Tez No

    390160

    Gebelikte ve yenidoğanlarda serum pirimidin düzeylerinin incelenmesi

    Investigation of serum pyrimidine levels during pregnancy and in newborns

    ZEYNEP GÖZDE SÖZER

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2014

    Eczacılık ve FarmakolojiUludağ Üniversitesi

    Tıbbi Farmakoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. MEHMET CANSEV

  3. Tez No

    829470

    Behavioral and genetic evaluation of the effect of prenatal stress on functional cerebral asymmetries in rats

    Ratlarda prenatal stresin fonksiyonel serebral asimetri üzerindeki etkisinin davranişsal ve genetik açidan değerlendirilmesi

    SEVİM ISPARTA

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2023

    Veteriner HekimliğiAnkara Üniversitesi

    Genetik Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. BENGİ ÇINAR KUL

    PROF. DR. ONUR GÜNTÜRKÜN

  4. Tez No

    316927

    Endometriyal endotel hücrelerinde in vivo BİP ekspresyonu ve BİP'in inflamatuar sitokinler TNF-alfa ve İnterlökin 1 (IL-1) beta tarafından in vitro düzenlenmesi

    In vivo BİP expression in human endometrial endothelial cells and in vitro modulation of BİP by the inflammatory cytokines TNF-alpha and Interleukin 1 (IL-1) beta

    NEHİR ŞERİFE OCAK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2011

    Histoloji ve EmbriyolojiDokuz Eylül Üniversitesi

    Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. H. ALPER BAGRİYANİK

  5. Tez No

    108546

    İnsanda gebeliğin farklı dönemlerde ve doğumda göbek bağı yapısının karşılaştırmalı olarak incelenmesi

    Comperative investigation of human umbilical cord's structure in different period of pregnancy and birth

    ÇİĞDEM GÜNDÜZBEY

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2001

    MorfolojiGazi Üniversitesi

    Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF.DR. M. TAHİR HATİBOĞLU

Geri Dön