Mutational programming of Bacillus subtilis: Overproduction of -amylase
Bacillus subtilis'in mutasyonal programlanması: - amilaz yüksek üretimi
- Tez No: 68498
- Danışmanlar: PROF. DR. GÜRDAL ALAEDDİNOĞLU
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Bilim ve Teknoloji, Science and Technology
- Anahtar Kelimeler: a- Amilaz, B. subtilis, Ekstraselüler enzimler vııı, a- Amylase, B. subtilis, Extracellular enzymes
- Yıl: 1997
- Dil: İngilizce
- Üniversite: Orta Doğu Teknik Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 128
Özet
oz BACILLUS SUBTILIS 'IN MUTASYONAL PROGRAMLANMASI: a-AMİLAZ YÜKSEK ÜRETİMİ Tunca, Sedef Yüksek Lisans, Biyoteknoloji Bölümü Tez Yöneticisi: Prof. Dr. N. Gürdal Alaeddinoğlu Yardımcı Tez Yöneticisi: Dr. Mehmet Batum Ocak 1997, lllsayfa Bu çalışmada, bir B. subtilis yerli izolatında (B. subtilis NGA) a-amilaz üretiminin değişik aşamalarda NTG ve UV mutasyonuyla arttırılması ve elde edilen bir mutant susta (B. subtilis NGA8) a-amilaz biyosentezinde düzenleyici rol oynayan fizyolojik faktörlerin araştırılmasına yer verilmiştir. vıMutant suş, B. subtilis NGA8, yüksek düzeyde a-amilaz üretmiştir, ancak, enzim aktivitesindeki artış miktarı değişik ölçüm metodları uygulandığında uyumluluk göstermemiştir. Bu da değişik ölçüm metodlarıyla a-amilaz aktivitelerinin karşılaştırılmalarının yeterince sıhhatli bir yol olmadığını ortaya çıkarmıştır. Mutant, sokak susu (B. subtilis NGA) ve endüstriyel susun (B. subtilis 31) yer aldığı deneylerde a-amilaz üretimleri karşılaştırılmıştır. Her üç suş için, buyyon ve nişasta ihtiva eden endüstriyel besiyerinde üreyen hücrelerle maximum a-amilaz aktivitesine durağan fazın sonlarına doğru erişildiği gözlenmiştir. Endüstriyel besiyerindeki nişastanın a-amilaz üretimine uyarıcı etkisi olduğu görülmüştür. Test edilen farklı koşullarla, a-amilaz üretiminin mutant suş tarafından pH: 8.0'de ve 42.0 °C'lik sıcaklıkta en etkin olduğu bulunmuştur. Denenen değişik karbon kaynaklarının sonuçlan melas 'm endüstriyel ölçekte ucuz ve kolay temin edilir bir substrat olduğunu göstermiştir. Sükroz ve peynir altı suyunun enzim sentezi için uyarıcı karbon kaynakları olduğu, arabinoz, maltoz ve glukoz'un ise enzim üretimi için negatif etki yaptıkları belirlenmiştir. Diğer karbon vııkaynaklarının, fruktoz, galaktoz, laktoz ve inülin'in, enzim üretimini düşürdüğü görülmüştür. Besiyeri ortamına Ca iyonu ilavesinin, yüksek seviyede a- amilaz üretimi için çok önemli olduğu ve en yüksek oc-amilaz aktivitesi için optimum Ca konsantrasyonunun 4.5 mM civarında olması gerektiği bulunmuştur.
Özet (Çeviri)
ABSTRACT MUTATIONAL PROGRAMMING OF BACILLUS SUBTILIS: OVERPRODUCTION OF a-AMYLASE Tunca, Sedef M.Sc, Departement of Biotechnology Supervisor: Prof. Dr. N. Gürdal Alaeddinoğlu Co-Supervisor: Dr. Mehmet Batum January 1997, 111 pages The present work describes stepwise enhancement of a-amylase production in a local isolate of Bacillus subtilis (B. subtilis NGA) with N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine and UV mutagenesis, and physiological studies, involving the regulatory aspects of a-amylase biosynthesis in one of the mutant strains obtained (B. subtilis NGA8). mThe mutant strain, B. subtilis NGA8, yielded high levels of a-amylase; although the amount of increment in the enzyme activity, as compared to the parental strain, was not in good correlation, when different assay methods were employed. This led to the decision that different measurement methods were inefficient to do accurate comparisons of a-amylase activities. The mutant, the parental strain (B. subtilis NGA) and an industrial strain (B. subtilis 31) were compared for their a-amylase production. With all three strains, the maximum a-amylase activity was obtained around the late stationary phase with cells grown in nutrient broth or the industrial medium, containing starch. The presence of starch in the latter medium seemed to have a stimulatory effect on a-amylase production. Under various conditions tested, the most efficient production of a-amylase was achieved by the mutant strain, the pH and the temperature optimum being 8.0 and 42°C respectively. The results of testing various carbon sources indicated that molasses could be used as low-cost and readily available substrate for amylase production at an industrial scale. As sucrose and whey were somewhat stimulatory carbon sources for the enzyme synthesis and, arabinose, maltose and glucose were inhibitory. Other carbon sources including fructose, galactose, lactose and inulin lowered the enzyme yields. IVSupplementation of growth medium with calcium was very important in the production of high levels of ct-amylase. The optimum concentration of Ca+2 for the highest a-amylase activity was 4.5mM.
Benzer Tezler
- Overproduction of neutral protease in (Bacillus subtilis)
Nötral proteazın (Bacillus subtilis) tarafından yüksek miktarda üretilmesi
AYSU GÜNAL
Yüksek Lisans
İngilizce
1997
Bilim ve TeknolojiOrta Doğu Teknik ÜniversitesiBiyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. GÜRDAL ALAEDDİNOĞLU
- MicroRNA target prediction by constraint programming
MikroRNA hedef genlerinin kısıtlı mantık programlama yöntemiyle tahmin edilmesi
MEHMET TUĞRUL TEKBULUT
Yüksek Lisans
İngilizce
2006
BiyolojiSabancı ÜniversitesiBiyoloji Bilimleri ve Biyomühendislik Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. UĞUR SEZERMAN
- Glial tümörlerde kan ve tümör mikroçevresindeki TREG ve TH17 hücrelerinin karakterize edilmesi
Characterization of treg and TH17 cells in the blood and tumor micro environment in glial tumors
YEŞİM HALİLOĞLU
Doktora
Türkçe
2022
Tıbbi BiyolojiErciyes ÜniversitesiTıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. HALİT CANATAN
- Genetik programlama için alana özgü programlama dili
A domain specific language for genetic programming
CEM BAŞAR ÇAYIROĞLU
Yüksek Lisans
Türkçe
2010
Bilgisayar Mühendisliği Bilimleri-Bilgisayar ve Kontrolİstanbul Teknik Üniversitesiİleri Teknolojiler Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. A. ŞİMA UYAR
- Reconfigurable computing platform for register based genetic programming
Kayıtçı tabanlı genetik programlama için yeniden yapılandırılabilir bilişim ortamı
ŞERİFE SUNGUN
Yüksek Lisans
İngilizce
2001
Bilgisayar Mühendisliği Bilimleri-Bilgisayar ve KontrolDokuz Eylül ÜniversitesiPROF. DR. MUSTAFA GÜNDÜZALP
- İnsan kollajen dizi mutasyonlarının osteogenezis imperfekta hastalığı üzerindeki ilişkisinin python programlama dili kullanılarak analiz edilmesi
Analysis of the relationship of human collagen sequence mutations on osteogenesis imperfectal disease using python programming language
GÜLSÜM TİRAŞ
Yüksek Lisans
Türkçe
2021
Mühendislik BilimleriSelçuk ÜniversitesiBiyomedikal Mühendisliği Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ ESMA ERYILMAZ DOĞAN