In vitro koşullarda kaempferol'ün insan kolorektal karsinoma hücreleri üzerine etkilerinin moleküler düzeyde incelenmesi
Investigation of in vitro effects of kaempferol on human colorectal carcinoma cells at molecular level
- Tez No: 688707
- Danışmanlar: DOÇ. DR. SERDAR KARAKURT
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2021
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Selçuk Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 98
Özet
Kanser ülkemizde ve dünyada önde gelen hastalık sebeplerinden biri olup mortalite ve morbidite nedeniyle ciddi bir sağlık sorunu olmaya devam etmektedir. En yaygın kanser türlerinden biri olan kolorektal kanser, dünya çapında kansere bağlı ölümlerin üçüncü önde gelen nedenidir. Son zamanlarda, kanser tedavisi için yeni bir terapötik strateji olarak doğal bileşiklerin uygulanmasına yoğun bir dikkat çekilmiştir. Bireylerin kemoterapötik ilaçlara karşı dayanıklılıkları ve bu ilaçların ciddi yan etkileri, insan kolorektal karsinomu da dahil olmak üzere kanser tedavisinde yeni ve alternatif ilaç adaylarının araştırılmasını hızlandırmıştır. Kanserin önlenmesi, kanser tedavisi ya da yan etkilerin azaltılması için alternatif çözümler ve destek tedavileri sıklıkla denenmekte ve ilgi görmektedir. Bitkisel fenolik bileşikler genellikle kanser tedavisinde çokça kullanılan ve çok popüler bileşiklerdir. Bu bileşiklerden biri de, iyi bilinen bir anti-enflamatuar, antioksidan, anti-kanserojen bileşik olan flavonoid Kaempferol'dür. Kaempferolün birçok kanserin malignitesini modüle ettiği iyi bilinmektedir. Kaempferolün antioksidan aktivitesi DPPH, ABTS ve CUPRAC yöntemleri ile bulundu. Kaempferolün stabilitesi HPLC ve UV-Vis ile belirlendi. Kaempferolün beş farklı kanser hücresi ve sağlıklı epitel hücre üzerindeki sitotoksik etkisi Alamar Mavisi reaktifi kullanılarak hücre inhibisyonunun sigmoidal grafiğinden yararlanılarak IC50 değerinden bulundu. İnsan kolon kanserinin koloni oluşumu ve migrasyonu üzerindeki etkileri ise sırasıyla koloni oluşumu ve yara iyileşme deneyi ile tespit edildi. Kaempferolün kolon kanserindeki apoptoz ve nekroz üzerine etkileri flow sitometrik yöntem ile Annexin V-APC ve 7-AAD antikorları kullanılarak belirlendi. Kaempferolün insan kolon kanseri hücrelerindeki apoptoz ve çeşitli sinyal yolağında görev alan protein ve genlerin ekspresyonununda meydana getirdiği değişiklikler ise sırasıyla Western Blot ve qRT-PCR yöntemi ile bulundu. Kaempferol, DLD-1 hücrelerinin (İnsan Kolorektal Karsinomu) canlılığına karşı en güçlü inhibitör olduğu görülürken, A549 (Akciğer Kanseri), HUH-7 (Hepatokarsinom), HeLa (Rahim Kanseri), NCI-H295R (Adrenal Bez) proliferasyonunu önemli ölçüde azaltmadığı bulundu. Kaempferol'ün moleküler yapısının 48 saate kadar stabil olduğu ve 481 nm ve 529 nm'de iki floresan tepe noktasına sahip olduğu bulundu. Sitoplazmada lokalize olan Kaempferol ve doza bağlı olarak, IC50 değeri 49.55 µM olan DLD-1 hücrelerinin çoğalmasını inhibe ederken, insan sağlıklı epitel hücre hattı CCD-18Co için toksik olmadığı görüldü (sitotoksisitesi 250 µMdan büyük olduğu bulundu.). Kaempferol, DLD-1 hücrelerinin göçünü ve koloni oluşumunu önemli ölçüde inhibe etti ve apoptozu %47 oranında yükseltti (p
Özet (Çeviri)
Cancer is one of the leading causes of disease in our country and the world and continues to be a serious health problem due to mortality and morbidity. Colorectal cancer, one of the most common types of cancer, is the third leading cause of cancer-related death worldwide. Recently, intense attention has been paid to the application of natural compounds as a new therapeutic strategy for cancer treatment. The resistance of individuals to chemotherapeutic drugs and the serious side effects of these drugs has accelerated the search for new and alternative drug candidates in the treatment of cancer, including human colorectal carcinoma. Alternative solutions and supportive treatments for cancer prevention, cancer treatment, or reduction of side effects are frequently tried and attracted attention. Herbal phenolic compounds are widely used and very popular compounds in cancer treatment. One of these compounds is the flavonoid Kaempferol, which is a well-known anti-inflammatory, antioxidant, anti-carcinogenic compound. It is well known that kaempferol modulates the malignancy of many cancers. The antioxidant activity of kaempferol was found by DPPH, ABTS, and CUPRAC methods. The stability of kaempferol was determined by HPLC and UV-Vis. The cytotoxic effect of kaempferol on five different cancer cells and healthy epithelial cells was determined from the IC50 value using the sigmoidal plot of cell inhibition using the Alamar Blue reagent. The effects on colony formation and migration of human colon cancer were determined by colony formation and wound healing assay, respectively. The effects of kaempferol on apoptosis and necrosis in colon cancer were determined by flow cytometric method using Annexin V-APC and 7-AAD antibodies. The changes caused by kaempferol in the expression of proteins and genes involved in apoptosis and various signaling pathways in human colon cancer cells were found by Western Blot and qRT-PCR methods, respectively. Kaempferol appeared to be the most potent inhibitor to the viability of DLD-1 cells (Human Colorectal Carcinoma), while it was found not to significantly reduce the proliferation of A549 (Lung Cancer), HUH-7 (Hepatocarcinoma), HeLa (Uterine Cancer), NCI-H295R (Adrenal Gland). The molecular structure of Kaempferol was found to be stable up to 48 hours and had two fluorescent peaks at 481 nm and 529 nm. Kaempferol localized in the cytoplasm and dose-dependently inhibited the proliferation of DLD-1 cells with an IC50 of 49.55 µM, while it was not toxic to the human healthy epithelial cell line CCD-18Co (cytotoxicity was found to be greater than 250 µM). Kaempferol significantly inhibited migration and colony formation of DLD-1 cells and increased apoptosis by 47% (p
Benzer Tezler
- Yeşil biyonanoteknolojik yöntemlerle antioksidan özelliğe sahip bileşiklerden elde edilen nanopartiküllerin bazı patojenik mikroorganizmalara karşı antı-quorum sensıng, antimikrobiyal aktivitelerinin belirlenmesi
Detection of anti-quorum sensing, anti-microbial activities of plant based antioxidants nanoparticles against some pathogene microorganisms using green bionanotechnological methods
SEDEF İLK
Doktora
Türkçe
2016
BiyokimyaHacettepe ÜniversitesiNanoteknoloji ve Nanotıp Ana Bilim Dalı
PROF. DR. NECDET SAĞLAM
- Ginkgo biloba L.'da kallus kültürleri yolu ile in vitro rejenerasyon
In vitro regeneration in Ginkgo biloba L. by calli cultures
NUR AŞICI
Yüksek Lisans
Türkçe
2005
BiyomühendislikEge ÜniversitesiBiyomühendislik Ana Bilim Dalı
PROF.DR. AYNUR GÜREL
- Hypericum türlerinde in vitro bitki rejenerasyonu ve sekonder metabolit üretimi
In vitro plant regeneration and secondary metabolite production in Hypericum species
ŞEYMA ÖNLÜ
Doktora
Türkçe
2019
BiyoteknolojiAnkara ÜniversitesiTarla Bitkileri Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SEBAHATTİN ÖZCAN
DOÇ. DR. ÖZLEM BAHADIR ACIKARA
- Characterization of Turkish bee products such as propolis, pollen and royal jelly in terms of bioactive components, health effects and encapsulation
Türkiye'ye ait arı sütü, propolis ve polen gibi arı ürünlerinin biyoaktif bileşenler, sağlık etkileri ve enkapsülasyonu açısından karakterizasyonu
ÜMİT ALTUNTAŞ
Doktora
İngilizce
2023
Gıda Mühendisliğiİstanbul Teknik ÜniversitesiGıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. BERAAT ÖZÇELİK
- İn vitro koşullarda lipid peroksidasyonun oluşturulması ve lincosin antibiyotiğinin anti-oksidan etkisinin araştırılması
Preparation of lipid peroxidation in vitro conditions and observation of lincosin antibiotic's anti-oxidan effect
AHMET VURAL