Geri Dön

D-laktat dehidrogenazın kovalent immobilizasyonu ve karakterizasyonu

Covalent immobilization and characterization ofd-lactate dehydrogenase

PDF İndir

  1. Tez No: 691915
  2. Yazar: NAZLI ECE VARAN
  3. Danışmanlar: PROF. DR. SEYDE SEYHAN TÜKEL
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Kimya, Chemistry
  6. Anahtar Kelimeler: D-laktat dehidrogenaz, immobilizasyon, 3-aminopropil silika jel, D-lactate dehydrogenase, immobilization, 3-aminopropyl silica gel
  7. Yıl: 2021
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Çukurova Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 91

Özet

Bu tez çalışmasında, glutaraldehit ara kolu üzerinden 3–aminopropil silika jele kovalent immobilize edilen Leuconostoc mesenteroides D-laktat dehidrogenaz'ın (D-LDH), D-Laktik asit üretebilen aktif ve kararlı preparatları optimize edilmiştir. 0,250 g destek üzerine eklenen 1 mg/mL protein derişimindeki enzim çözeltisi ile % 86 immobilizasyon verimi elde edilmiştir. Serbest ve immobilize D-LDH karakterize edilerek optimum pH ve sıcaklık değerleri ve kinetik parametreleri belirlenmiştir. Ayrıca, serbest ve immobilize D-LDH'ların depolanma ve termal kararlılıkları araştırılmış ve immobilize D-LDH'ın tekrar kullanım kararlılığı kesikli reaktörde incelenmiştir. Serbest D-LDH için optimum pH 7,0, immobilize D-LDH için ise pH 6,0 olarak belirlemiştir. Serbest ve immobilize D-LDH'lar için optimum sıcaklık sırasıyla 37 C ve 45 C olarak bulunmuştur. Serbest D-LDH için Km ve Vmax değerleri sırasıyla 0,365 mM ve 86,95 U/mg protein, immobilize D-LDH için bu değerler sırasıyla 0,077 mM ve 19,16 U/mg protein olarak belirlenmiştir. Serbest D-LDH, 4 C'de 30 gün depolama sonunda başlangıç aktivitesinin % 85'ini korumakta, 25 C'de ise 10 gün depolama sonunda başlangıç aktivitesinin % 97'sini kaybetmektedir. İmmobilize D-LDH ise 4 C ve 25 C'de 30 gün depolama sonunda sırasıyla başlangıç aktivitesinin % 82 ve % 37 'sini koruduğu belirlenmiştir. Serbest D-LDH, 45 C'de 4 saat inkübasyon sonunda aktivitesinin % 86'sını korurken, immobilize D-LDH aynı koşullarda % 82'sini korumuştur. İmmobilize D-LDH'ın kesikli reaktörde 10 kullanım sonunda başlangıç aktivitesinin % 38'ini koruduğu belirlenmiştir.

Özet (Çeviri)

In this thesis, the covalent immobilization of D-Lactate dehydrogenase (D-LDH) from Leuconostoc mesenteroides onto 3-aminopropyl silica gel via the glutaraldehyde spacer arm was optimized to have an active and stable preparation which is able to produce D-Lactic acid. The immobilization yield of 86 % was achieved using 1 mg/mL protein for 0.250 g support. The free and immobilized D-LDHs were characterized and their optimum pH and temperature values and kinetic parameters were determined. In addition, the storage and thermal stability of free and immobilized D-LDHs were investigated. The reuse stability of immobilized D-LDH was also determined in a batch reactor. The optimum pH for free D-LDH was determined as 7.0, however, it was 6.0 for immobilized D-LDH.The optimum temperatures for free and immobilized D-LDHs were found to be 37 C and 45 C, respectively. The Km and Vmax values for free D-LDH were determined as 0.365 mM, 86.95 U/mg protein, and the corresponding values were determined as 0.077 mM and 19.16 U/mg protein, respectively for immobilized D-LDH. The free D-LDH retained 85 % of its initial activity after 30 days of storage at 4 C, however it lost 97 % of its initial activity after 10 days of storage at 25 C. The immobilized D-LDH retained 82 % and 3 % of its initial activity after 30 days of storage at 4 C and 25 C, respectively. The free D-LDH preserved 86 % of its initial activity after 4 hours of incubation at 45 C, while immobilized D-LDH preserved 82 % under the same conditions. The immobilized D-LDH retained 38 % of its initial activity after 10 uses in a batch reactor.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    830331

    Progesteron ve D vitamininin karaciğer kanseri hücreleri üzerine etkilerinin araştırılması

    Investigation of the effects of progesterone and vitamin D on liver cancer cells

    MELEK NAZ AKKUŞ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    Histoloji ve EmbriyolojiMaltepe Üniversitesi

    Klinik Embriyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. YAPRAK DÖNMEZ ÇAKIL

  2. Tez No

    409773

    Kumarin türevlerinin Bacteroides fragilis'in D-LDH enzimi üzerine olan inhibitör etkisinin belirlenmesi

    Determination of inhibitory effects of coumarin derivatives on Bacteroides fragilis D-LDH enzyme

    ERENNUR UĞUREL

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    BiyomühendislikYıldız Teknik Üniversitesi

    Biyomühendislik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. DİLEK BALIK

    DR. ÖZKAN DANIŞ

  3. Tez No

    343866

    Isolation and characterization of the gene encoding d-lactate dehydrogenase enzyme from bacteroides fragilis that is known to be localized in colon cancer tissues

    Kolon kanseri dokularında yerleştiği bilinen bacteroıdes fragılıs in d-laktat dehidrogenaz enzimini kodlayan genin izolasyonu ve karakterizasyonu

    ZEYNEP BÜŞRA BOLAT

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2013

    BiyokimyaYıldız Teknik Üniversitesi

    Biyomühendislik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. DİLEK TURGUT BALIK

  4. Tez No

    661400

    Akut mezenterik iskeminin erken tanısında serum I-FABP düzeylerinin yeri (Deneysel çalışma)

    The role of serum I-FABP levels in the early diagnosis of acute mesenteric ischemia (Experimental study)

    SERKAN ZENGER

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2012

    Genel CerrahiSağlık Bakanlığı

    Genel Cerrahi Ana Bilim Dalı

    DR. AYHAN ÇEVİK

  5. Tez No

    494881

    Pichia pastoris mayasına sığır laktat dehidrogenaz geninin aktarımı ve laktik asit üretimi

    Expression of bovine lactate dehydrogenase gene in yeast Pichia pastoris and lactic acid production

    FIRAT AYAS

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2018

    BiyoteknolojiAkdeniz Üniversitesi

    Gıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MEHMET İNAN

Geri Dön