Geri Dön

V2 reseptör fonksiyonu üzerine H80Y, V88L, V215M ve L219P mutasyonlarının etkilerinin araştırılması

Investigation of the effects of H80Y, V88L, V215M and L219P mutations on v2 receptor function

PDF İndir

  1. Tez No: 692482
  2. Yazar: DİLARA ULUSAL
  3. Danışmanlar: PROF. DR. HATİCE MERGEN
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyoloji, Biology
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2021
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Hacettepe Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Moleküler Biyoloji Bilim Dalı
  13. Sayfa Sayısı: 97

Özet

Diabetes insipidus (DI), aşırı miktarda idrar oluşumu (poliüri) ve çok fazla miktarda su içme (polidipsi) ile karakterize edilen nadir bir hastalıktır. Bu hastalık nedeniyle idrar konsantre edilemez. Susuzluk testi, DI tanısını doğrulamak için kullanılır. Testin amacı, hastanın idrarı konsantre etme yeteneğini gözlemlemek ve arjinin vazopressine (vazopressin, antidiüretik hormon, ADH, AVP) olan cevabını değerlendirmektir. Tanı gecikirse ciddi hipernatremi ve dehidratasyon gibi belirtiler ortaya çıkabilir. Tedavide desmopressin (DDAVP) kullanılır. Kalıtsal veya edinilmiş nedenlerle çeşitli tiplerde DI hastalığı oluşmaktadır. Arjinin vazopressin reseptör 2 (V2 reseptörü, V2R, AVPR2) ve onu kodlayan genlerde oluşan mutasyonlar ile aquaporin 2 su kanalları (AQP2) ve onu kodlayan genlerde oluşan mutasyonlar; konjenital (ailesel, kalıtsal) tipteki Nefrojenik Diabetes İnsipidus'a (NDI) neden olmaktadır. Konjenital NDI'da normal şekilde salgılanan ve sentezlenen AVP varlığına veya yüksek plazma konsantrasyonlarına rağmen idrar konsantre edilemez. Konjenital NDI'a neden olan V2R genindeki mutasyonlar farklı fenotipte reseptör oluşumuna neden olabilir. Bu farklı fenotipteki reseptörler, farklı reseptör fonksiyonları meydana getirirler ve bunun sonucunda hastalığın seyri ve şiddeti değişiklik gösterebilir. Bu tez çalışmasının amacı, konjenital NDI hastalığına neden olduğu bilinen ve V2R geninde tanımlanan H80Y, V88L, V215M ve L219P mutasyonlarının, V2 reseptör fonksiyonu üzerine etkilerinin araştırılmasıdır. Bu araştırmalar sayesinde, hastalığın seyrinin aydınlatılması ve gelecekteki tedavi çalışmalarında kullanılması için bilgiler sunulması hedeflenmiştir. Bu amaç ve hedefler doğrultusunda yapılan deneysel çalışmalarda, ilgili mutasyonlar yabanıl tip V2R geni içeren memeli ifade vektörleri kullanılarak site-directed mutagenez yöntemi ile oluşturulmuştur ve COS-7 hücrelerine transfeksiyonları gerçekleştirilmiştir. Yabanıl tip ve mutant V2 reseptörlerinin hücre içi ve hücre yüzeyindeki ifadeleri, enzimbağlı immünosorbent analiz (enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA) deneyleri ile tespit edilmiştir. Mutant V2 reseptör aktivitesi ise transfekte hücrelerin AVP ile uyarılması sonucunda cevap olarak sentezlenen siklik adenozin monofosfat (siklik AMP, cAMP) düzeylerine bakılarak değerlendirilmiştir. Ayrıca mutant V2 reseptörlerinin hücre içindeki yerleşimleri ve endoplazmik retikulumda (ER) takılı kalma durumları floresan görüntüleme yöntemi ile araştırılmıştır. Sonuç olarak, tez kapsamında çalışılan tüm mutant tip V2 reseptörlerinin yabanıl tipe göre farklı düzeylerde fonksiyon kaybına uğradıkları gözlemlenmiştir.

Özet (Çeviri)

Diabetes insipidus (DI) is a rare disease that is characterized by significantly high urine production (polyuria) and excessive water consumption (polydypsia). This disease generally prevents concentration mechanism of urine. Dehydration tests are applied for confirming the diagnosis of DI. The purpose of dehydration test is to observe the patient's ability to concentrate urine and to evaluate the patient's reaction to arginine vasopressin (vasopressin, antidiuretic hormone, ADH, AVP). In case of late diagnosis, DI can result in serious hypernatremia and dehydration. DI is treated with desmopressin (DDAVP). Variations of DI can occur either as a hereditary or an acquired disease. Mutations of arginine vasopressin receptor 2 (V2 receptor, V2R, AVPR2) and its coding genes as well as mutations of aquaporin 2 channels (AQP2) and its coding genes cause congenital (hereditary) type Nephrogenic Diabetes Insipidus (NDI). In cases of congenital NDI, urine cannot be concentrated despite normal secreted and synthesized AVP levels or high plasma concentrations. Mutations on V2R gene that cause congenital NDI, can also result in the creation of different phenotypes of receptors. The course and the severity of disease can vary due to incompatible receptor functions caused by different phenotypes of receptors. The aim of this thesis is to examine the relation between H80Y, V88L, V215M and L219P mutations identified in V2R gene, which is known to cause congenital NDI, and V2 receptor functions. The purposes of this examination are to better illuminate the course of disease and to provide information for further research on the treatment. In accordance with the purpose of this study following procedure is conducted as an experimental research. Relevant mutations mentioned above were produced utilizing sitedirected mutagenesis method to mammalian expression vectors containing wild type V2R gene. These mammalian expression vectors were transfected to COS-7 cells. Intracellular and cell surface expressions of both wild and mutant types of V2 receptors were determined with the application of enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) experiments. Levels of cyclic adenosine monophosphate (cyclic AMP, cAMP) synthesized as a response to stimulation of transfected cells with AVP were scanned to observe mutant V2 receptor activity. Positioning of mutant V2 receptors in the cell, and their locations in the endoplasmic reticulum (ER) were observed with the fluorescent imaging method. As a result, all mutant type V2 receptors studied within the scope of this thesis are observed to demonstrate varying degrees of function loss compared to wild type V2 receptors.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    142493

    Sürekli ayaktan periton diyalizi hastalarında karvedilol ve lerkanidipin hidroklorür kulanımının ultrafiltrasyon, PET testi,KT/V ve kreatinin klirensi üzerine olan etkisi

    Başlık çevirisi yok

    CEVAT TOPAL

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2004

    NefrolojiYüzüncü Yıl Üniversitesi

    İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. REHA ERKOÇ

  2. Tez No

    752764

    Otozomal dominant polikistik böbrek hastalığında tolvaptan tedavisinin renal sağkalım üzerine etkisinin değerlendirilmesi

    Evaluation of the effect of tolvaptan treatment on renal survival in autosomal dominant polycystic kidney disease

    ASYA EYLÜL AĞAOĞLU ÇELEBİ

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    İç HastalıklarıUfuk Üniversitesi

    İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    UZMAN EMEL IŞIKTAŞ SAYILAR

  3. Tez No

    831773

    Ratlarda IL-1 antagonistinin korneal vaskülarizasyon üzerine inhibitör etkisi

    Inhibitory effect of IL-1 antagonist on corneal vascularizations in rats

    TÜRKAN ÖZGE TEKE

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    Göz HastalıklarıNecmettin Erbakan Üniversitesi

    Göz Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. NAZMİ ZENGİN

  4. Tez No

    743514

    Kannabinoid reseptörlerinin sıçan açlık ince bağırsak miyoelektrik aktivitesi üzerine etkisi

    Effect of cannabinoid receptors on fasting myoelectric activity of small intestine in rat

    ÖZGE DARAKCI SALTIK

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    FizyolojiOndokuz Mayıs Üniversitesi

    Fizyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. AYHAN BOZKURT

  5. Tez No

    540243

    Görsel algıya ilişkin bir korteks modeli

    A cortex model of visual cognition

    MEHMET ALİ ANIL

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2018

    Elektrik ve Elektronik Mühendisliğiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Elektronik ve Haberleşme Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. NESLİHAN SERAP ŞENGÖR

Geri Dön