Kisspeptin'nin infertil hastaların granüloza hücreleri üzerine etkisinin araştırılması
Investigation of the effect of kisspeptin on the granulosa cells in infertile patients
- Tez No: 697551
- Danışmanlar: PROF. DR. BÜLENT AYAS
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Histoloji ve Embriyoloji, Histology and Embryology
- Anahtar Kelimeler: Gen ifadesi, Granüloza hücreleri, Hipotalamo hipofizeal sistem, Kisspeptin, Kısırlık, Kısırlık-kadın, Polikistik over sendromu, Gene expression, Granulosa cells, Hypothalamo hypophyseal system, Kisspeptin, Infertility, Infertility-female, Polycystic ovary syndrome
- Yıl: 2021
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Ondokuz Mayıs Üniversitesi
- Enstitü: Lisansüstü Eğitim Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Polikistik over sendromu (PKOS) kadın infertilitesinin en sık sebeplerinden biri olarak bilinmektedir. PKOS'da foliküler gelişimin ileri aşamalarının sekteye uğradığı ve bu durumun granüloza hücrelerindeki apoptozis artışı ve proliferatif belirteçlerde düşüş ile bağlantılı olabileceği düşünülmektedir. Kisspeptin, hipotalamo hipofizier gonadal aks (HHG aksı) üzerindeki etkileri keşfedilmiş olan peptid bir hormondur. Bu çalışmada PKOS ve PKOS dışı infertilite tanısı almış gönüllülerden elde edilmiş granüloza hücrelerine doğrudan in vitro kisspeptin uygulanmıştır. Uygulamanın granüloza hücrelerinde hayatta kalım ve apoptozis ile ilgili genler de dahil olmak üzere granüloza hücre fonksiyonlarıyla ilişkili çeşitli genlerin ifade düzeylerine etkisi incelenmiş, ayrıca hücre içi kalsiyum düzeyine olan etkisi de araştırılmıştır. Çalışma grupları, 16 tanesi PKOS ve 16 tanesi de PKOS dışı infertilite tanısı almış toplam 32 gönüllü ile oluşturulmuştur. Her bir gönüllüden elde edilmiş olan örneklerin yarısına Kisspeptin-54 uygulanmış ve diğer yarısına uygulanmamıştır. Böylece Kontrol, Kontrol-Kiss, PKOS ve PKOS-Kiss grupları oluşturulmuştur. Alınan serum ve foliküler sıvı örneklerinde de biyokimyasal yöntemlerle Kissepeptin-54 düzeyi tayini yapılmıştır. Elde edilen granüloza hücre örneklerinde qRT-PCR yöntemi ile KISS1, KISS1R, BCL-2, CASPASE-3, FSHR, LHCGR, STAR, ESR1, ESR2, INHBA genlerinin ekspresyon düzeyleri belirlenmiştir. Hücre içi kalsiyum konsantrasyonları floresan spektrofotometre yöntemi ile ölçülmüştür. PKOS'lu gönüllülerden elde edilmiş olan serum ve foliküler sıvı örneklerinde daha yüksek Kisspeptin-54 düzeyi belirlenmiş, granüloza hücrelerinde ise daha düşük hücre içi kalsiyum konsantrasyonu tespit edilmiştir. PKOS grubu granüloza hücrelerinde CASPASE-3 geni ifadesinde artış ve BCL-2 geni ifadesinde düşüş, in vitro Kisspeptin-54 uygulaması sonrası ise CASPASE-3 ifadesinde düşüş, BCL-2 ifadesinde yükseliş gözlenmiştir. ESR1 ve ESR2 gen ifadeleri PKOS grubunda yüksek bulunmuş ve Kisspeptin-54 uygulaması ile arttığı tespit edilmiştir. FSHR ifadesi PKOS grubunda anlamlı düzeyde düşük, LHCGR ifadesi ise anlamlı düzeyde yüksek çıkmıştır. Kisspeptin-54 uygulaması ile FSHR ifadesinde Kontrol grubunda, LHCGR ifadesinde PKOS grubunda anlamlı artışlar tespit edilmiştir. Kisspeptin-54 uygulaması ile PKOS gurubunda anlamlı düzeyde STAR geni ifadesinde artış görülmüştür. İn vitro Kisspeptinin uygulamasının granüloza hücrelerin hayatta kalımına ve diğer genlerin ifadesine anlamlı olarak etki ettiği gözlenmiştir.
Özet (Çeviri)
Polycystic ovary syndrome (PCOS) is known as one of the leading causes of female infertility. It is thought that follicular maturation is disrupted in PCOS and this can be associated with increase of apoptosis and decrease of proliferation in granulosa cells. Kisspeptin is a peptide hormone whose effects on the hypothalamo hypophysial gonadal (HHG) axis were discovered. In this study, it was aimed to investigate the effects of direct in vitro Kisspeptin-54 application on the gen expressions in granulosa cells of PCOS and Non-PCOS infertile women groups. Also, the intracellular calcium levels in the granulosa cells were investigated. The study groups were comprised of 16 PCOS and 16 non-PCOS, a total of 32 patients. For samples obtained from each patient, half was applied with direct kisspeptin-54 and half was not. Thus, the groups of Control, Control-Kiss, PCOS and PCOS-Kiss were formed. In the serum and follicular fluid samples obtained from patients, Kisspeptin-54 level was measured via biochemical methods. In the obtained granulosa cells, the gene expressions of KISS1, KISS1R, BCL-2, CASPASE-3, FSHR, LHCGR, STAR, ESR1, ESR2, INHBA were determined by qRT-PCR method. The intracellular calcium concentrations were measured by fluorescent spectrophotmetry. In the serum and follicular fluid samples obtained from PCOS patients, higher Kisspeptin-54 levels were detected. In the granulosa cells obtained from PCOS patients, lower intracellular calcium levels were measured. In the PCOS granulosa cells, higher CASPASE-3 and lower BCL-2 expressions were noted. With in vitro Kisspeptin-54 application, the expression level of CASPASE-3 were lowered and BCL-2 were raised. The expression of ESR1 and ESR2 were higher in PCOS and they increased with Kisspeptin-54 application. FSHR expression were lower in PCOS and LHCGR expression is higher. The expresions of FSHR were raised in Control-Kiss group and the expression of LHCGR were raised in PCOS-Kiss group with Kisspeptin-54 treatment. With Kisspeptin-54, the expression of STAR increased. It was indicated that in this study that in vitro kisspeptin application affects the expression levels of the genes associated with proliferation and apoptosis and some other genes in granulosa cells.
Benzer Tezler
- Gebeliğin hipertansif hastalıklarında serum sitokin ve plazma kisspeptin düzeylerinin araştırılması
Investigation of the serum cytokines and plasma kisspeptin levels in hypertensive disorders of the pregnancy
ZEYNEP DOĞAN ARTAŞ
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2009
Kadın Hastalıkları ve DoğumFırat ÜniversitesiKadın Hastalıkları ve Doğum Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. HÜSNÜ ÇELİK
- Abortus imminens tanısıyla takip edilen gebelerde plazma kisspeptin düzeylerinin araştırılması
Kisspeptin levels in imminent abortion
ŞERİF KAVVASOĞLU
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2010
Kadın Hastalıkları ve DoğumFırat ÜniversitesiKadın Hastalıkları ve Doğum Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. MEHMET ŞİMŞEK
- Puberte bozukluklarında plazma kisspeptin ve ghrelin düzeyleri
Plasma kisspeptin and ghrelin levels in puberty disturbances
ERDAL KURNAZ
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2010
Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıFırat ÜniversitesiÇocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. YAŞAR ŞEN
- Gestasyonel diyabetes mellitusta kisspeptin düzeyleri
Kisspeptin levels in gestational diabetes mellitus
METİN KAYA
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2010
Kadın Hastalıkları ve DoğumFırat ÜniversitesiKadın Hastalıkları ve Doğum Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. HÜSNÜ ÇELİK
- Eksitatör-inhibitör aminoasitlerin, leptin ve kispeptin düzeylerinin uyku profili ile değerlendirilmesi ve püberte prekoks gelişimi üzerine etkisinin araştırılması
Evaluation of serum levels of excitatory-inhibitory amino acids, leptin and kisspeptins using sleep profile and effects on development of puberty
PINAR YAZICI
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2011
Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıCelal Bayar ÜniversitesiÇocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
PROF. DR. BETÜL ERSOY