Geri Dön

Development of primary keratinocyte cell culture method on fibrin matrix

Fibrin matris üzerinde primer keratinosit hücre kültür yönteminin geliştirilmesi

  1. Tez No: 739414
  2. Yazar: BİLAL ENES OKATAR
  3. Danışmanlar: PROF. DR. CENGİZHAN ÖZTÜRK, PROF. DR. ETHEM GÜNEREN
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyoteknoloji, Biotechnology
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2022
  8. Dil: İngilizce
  9. Üniversite: Boğaziçi Üniversitesi
  10. Enstitü: Biyo-Medikal Mühendislik Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyomedikal Mühendisliği Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 54

Özet

Majör yanık vakalarında kültüre epitel greftlerinin kullanımı hayat kurtarıcı bir alternatiftir. Keratinosit hücreleri, uygun koşullar sağlandığında çoğalma, bir epi- tel tabakası oluşturma ve dermal bir ikame olarak simüle etme yeteneğine sahiptir. Ancak kültür yöntemiyle üretilen bu tabaka frajil yapısı nedeniyle cerrahi uygula- mada zorluklar yaratır. Bu çalışmada biyouyumluluk, toksik olmama, biyobozunurluk ve hücre kültürüne uygunluk açısından sunduğu avantajlar nedeniyle taşıyıcı tabaka olarak biyopolimer fibrin matrisi kullanıldı. Fibrin üretmek için gönüllülerden taze donmuş plazma (TDP) alınmış ve CaCl2 solüsyonu ile TDP'nin pıhtılaşması sağlandı. İkinci aşamada, otolog hücre kültürü yöntemi oluşturmak için doğrudan insan derisin- den bir primer keratinosit kaynağı elde edildi. Abdominal pannikülektomi ameliy- atı geçirmiş gönüllülerden deri örnekleri alınıp keratinosit izolasyonu yapıldı. Fibrin oluşumu ve keratinosit hücrelerinin izolasyonundan sonra, fibrin matris yüzeyine ker- atinosit hücreleri ekildi. Fibrin matris iskelesinin oluşumu ve bu iskele üzerinde primer hücre kültürünün uygulanabilirliği incelendi ve bir yöntem oluşturuldu. Polimerize fibrin yapısının kimyasal bağlarını gözlemlemek için Fourier Transform Infrared Spek- troskopisi (FT-IR) ile analizi yapıldı. Hücre izolasyonunun başarısı, hücre kültürü ve fibrin iskelenin etkisi ışık mikroskobunda, taramalı elektron mikroskobunda (SEM) ve pan-sitokeratin boyama ile gösterildi. Keratinosit kültürünün hücre tutunumu, tara- malı elektron mikroskobu (SEM) ile incelendi. Bu tezde insan kanından fibrin matris oluşumu, insan derisinden keratinosit hücre izolasyonu ve kültürü ve fibrin üzerinde keratinosit kültürü yöntemleri geliştirildi.

Özet (Çeviri)

The use of cultured epithelial grafts in major burn cases is a promising alter- native. Keratinocyte cells have the ability to proliferate and form an epithelial layer when suitable conditions are provided and simulate as a dermal substitute. However, this layer, which is produced by the cell culture method, creates difficulties in surgical application due to its fragile structure. In this thesis, a biopolymer fibrin matrix was used as a carrier layer due to the advantages it offers in terms of biocompatibility, non-toxicity, biodegradability, and benefit for cell culture. In order to produce fibrin, fresh frozen plasma (FFP) was obtained from volunteers and with only CaCl2 solution, coagulation of the FFP has been achieved. In the second stage, to create an autologous cell culture method, a primary keratinocyte source is acquired directly from the human skin. Instead of a cell line, skin samples were taken from volunteers who had undergone abdominal panniculectomy surgery, and keratinocyte isolation was performed. After the formation of fibrin and the isolation of keratinocyte cells, keratinocyte cells are seeded on the fibrin matrix surface. The formation of the fibrin matrix scaffold and the feasibility of primary cell culture on this scaffold was examined and a sustainable and accessible method was established. FT-IR analysis was made to observe chemical bonds of polymerized fibrin structure. The success of cell isolation, cell culture, and the effect of fibrin scaffold on cell proliferation was demonstrated in optical microscopy, scanning electron microscopy (SEM), and pan-cytokeratin staining. The interaction of the keratinocyte cells and the feeder layer cells were visualized by SEM. In this thesis, methods of fibrin matrix formation from FFP, keratinocyte cell isolation and culture from a primary source, and keratinocyte culture on fibrin matrix were developed.

Benzer Tezler

  1. Kornea doku mühendisliği için hibrit biyomateryal geliştirilmesi

    Development of a hybrid biomateral for corneal tissue engineering

    MERVE UYANIKLAR

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2021

    BiyomühendislikHacettepe Üniversitesi

    Biyomühendislik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. HALİL MURAT AYDIN

  2. Development of corneal tissue substitutes

    Korneal doku tabakalarının geliştirilmesi

    SEVİLAY BURCU ŞAHİN YILDIZ

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2024

    BiyomühendislikSabancı Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji-Genetik ve Biyomühendislik Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. SİBEL ÇETİNEL

    DOÇ. DR. ÖZLEM KUTLU

    PROF. DR. GAMZE KÖSE

  3. Role of notch signalling in mammary gland

    Başlık çevirisi yok

    ÖZDEN YALÇIN ÖZUYSAL

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2009

    BiyolojiUniversité de Lausanne

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. CATHRİN BRİSKEN

  4. Telomeraz aktivatör etkili sikloastragenol ve yeni türevlerinin NRF2 ve proteazom sistemlerine etkisi ile yaşlanma karşıtı ve nöroprotektif potansiyellerinin araştırılması

    Investigation of anti-aging and neuroprotective potentials of telomerase activator cycloastragenol and its derivatives on NRF2 and proteasome systems

    SİNEM YILMAZ

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    BiyokimyaEge Üniversitesi

    Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. PETEK BALLAR KIRMIZIBAYRAK

  5. İlkokul birinci sınıf öğrencilerinin okula uyumlarının yaratıcı drama ile geliştirilmesi

    Development of primary school students' adaptation to school with creative drama

    NAZİFE TOSUN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2020

    Eğitim ve ÖğretimBurdur Mehmet Akif Ersoy Üniversitesi

    Eğitim Bilimleri Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. KENAN DEMİR