Rapamisin'in fare nöroblastoma (NB2a) hücre kültürü üzerindeki etkilerinin araştırılması
Investigation of the effects of rapamisin on mouse neuroblastoma (NB2a) cell culture
- Tez No: 751145
- Danışmanlar: PROF. DR. KAMİL VURAL
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Eczacılık ve Farmakoloji, Pharmacy and Pharmacology
- Anahtar Kelimeler: Rapamisin, fare, nöroblastoma, hücre kültürü, mTOR, MTT, NTT, Klorprifos, nörotoksisite, nöron, Fareler, Mammalian target of rapamycin, Nöroblastom, Nörodejeneratif hastalıklar, Nöronlar, Nörotoksinler, Teşhis testleri, Rapamycin, mouse, neuroblastoma, cell culture, mTOR, MTT, NTT, Chlorpyrifos, neurotoxicity, neuron, neurodegenerative diseases, Mice, Mammalian target of rapamycin, Neurons, Neurotoxins, Rapamycine, Diagnostic tests
- Yıl: 2022
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Manisa Celal Bayar Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Farmakoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Tıbbi Farmakoloji ve Klinik Farmakoloji Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Amaç: Bu projenin amacı bir mTOR inhibitörü olan Rapamisin adlı etken maddenin fare nöroblastoma hücre dizininde (NB2A) nörotoksik veya nöroprotektif etkilerinin araştırılmasıdır. Gereç ve Yöntem: Çalışmamızda Rapamisin'in olası nörotoksik etkileri fare nöroblastoma hücre (NB2A) dizininde araştırıldı. Hücreler flask içinde DMEM eklenerek etüvde çoğaltıldılar. Rapamisin, stok çözelti kullanılmadan önce DMSO içerisinde çözüldü ve medyum ile seyreltildi. CellTiter-Glo® luminesans hücre canlılığı ölçüm yöntemi, kullanılarak doz yanıt eğrisi oluşturuldu. 1. gün, tüm kuyucuklara NB2A hücresi konularak 24 saat inkübasyona bırakıldı. 24 saat sonra ilk üç kuyucuk hariç kalan tüm kuyucuklardaki medyum çekilerek farklılaşma medyumu eklendi. Farklılaşma medyumu içeren kuyucukların ilk üçü hariç (+ kontrol), diğerlerine farklı konsantrasyonlarda Rapamisin konuldu. Hücreler inkübe edildi ve 1 gün bekletildi. Daha sonra çukurlar Coomassie Blue ile boyandı ve image analiz programı kullanarak ölçümler gerçekleştirildi. Hücre proliferasyonunun değerlendirilmesi amacıyla MTT ve Rapamisin'nin nöron kültürü üzerindeki etkilerini araştırmak amacıyla klorprifos 25 µM konsantrasyonlarda eklenerek NTT testi yapıldı. İstatistiksel analizler gerçekleştirildi ve p<0,05 anlamlılık düzeyi olarak seçildi. Bulgular: NTT testinde anlamlı olmayan nörit uzaması, MTT testinde ise anlamlı hücre proliferasyonu azalması gözlendi. Nörotoksik etkili klorprifos ile de NB2A hücrelerinde istatiksel olarak doza bağlı bir şekilde azalma gözlemlendi. Sonuçlar: Rapamisin adlı etken maddemizin nörotoksik olduğu, nöronal harabiyet ve ölüme sebebiyet verebileceği anlaşılmıştır. Fakat kullandığımız hücre kültürünün kanser hücrelerinden oluşmasından dolayı antikanserojen etki gösterebileceği düşünülmüştür. ix
Özet (Çeviri)
Aim: The aim of this study is to investigate the neurotoxic or neuroprotective effects of an active substance called Rapamycin, which is an mTOR inhibitor, in mouse neuroblastoma cell line (NB2A). Material and Methods: In present study, the possible neurotoxic effects of Rapamycin were investigated in mouse neuroblastoma cell (NB2A) array. Cells were cultivated in an incubator by adding DMEM in a flask. Rapamycin was dissolved in DMSO and diluted with medium before using the stock solution. A dose response curve was generated using the CellTiter-Glo® luminescence cell viability measurement method. On day 1, NB2A cells were added to all wells and incubated for 24 hours. After 24 hours, the medium was withdrawn from all the wells and except the first three wells and the differentiation medium was added. Except for the first three (+ control) wells containing differentiation medium, the others were loaded with Rapamycin at different concentrations. Cells were incubated for 1 day. Then the wells were stained with Coomassie Blue and measurements were made using an image analysis program. In order to investigate the effects of Rapamycin on the cell proliferation and neurotoxicity, MTT and NTT tests were performed by adding chlorpyrifos at 25 µM concentrations. Statistical analyzes were performed and p<0.05 was chosen as the significance level. Findings: In the NTT test, neurite prolongation was not significant, and in the MTT test, significant cell proliferation reduction was observed. A dose-dependent decrease in NB2A cells was also observed with neurotoxic chlorpyrifos. Results: It has been shown that our active ingredient, rapamycin, is neurotoxic and can cause neuronal damage and death. However, since the cell culture we used is x composed of cancer cells, it was thought that it might have an anticarcinogenic effect.
Benzer Tezler
- Detection of C-ABL tyrosine kinase and the mammalian target of rapamycin (MTOR) regulation in mouse oocyte maturation
Fare oosit maturasyonunda C-ABL tirozin kinaz ve memeli rapamisin hedefi (MTOR) düzenlenmesinin belirlenmesi
MELEK OBAIDEEN
Yüksek Lisans
İngilizce
2022
Histoloji ve EmbriyolojiYeditepe ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. AYLİN YABA UÇAR
- Elucidation of lysosomal cathepsin a in the regulation of autophagy
Lizozomal katepsin a'nın otofajinin düzenlemesindeki rolünün araştırılması
SELMAN YANBUL
Yüksek Lisans
İngilizce
2023
Genetikİzmir Yüksek Teknoloji EnstitüsüMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. VOLKAN SEYRANTEPE
- Hiperglisemik nöropati ve mitokondriyal fonksiyonun ilintisi: Mitokondri (dis)fonksiyonu ve mitofaji/otofaji modülasyonunun potansiyel nöroprotektif etkisi üzerine in vitro araştırmalar
Hyperglycemic neuropathy and its relevance to mitochondrial function: In vitro investigations on the potential neuroprotective effect of mitochondrial (dys)function and mitophagy/autophagy modulation
ARİF KAMİL SALİHOĞLU
- Glutamin taşıyıcısı ASCT2'ye karşı oluşturulan monoklonal antikorların tümör hücre büyümesine etkisi
Effect of monoclonal antibodies against glutamine transporter ASCT2 on tumor cell growth
İLAYDA ENGİN
Yüksek Lisans
Türkçe
2024
BiyoteknolojiAnkara ÜniversitesiBiyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ERKAN YILMAZ
DR. GÜLİZAR AYDOĞDU
- Bağırsak hasar modellerinde kemik iliği mezenkimal kök hücre ve bağırsak mezenkimal kök hücrelerin rejeneratif ve immün modülatuvar etkilerinin karşılaştırılması
Comparison of regenerative and immune modulatory effecets of bone marrow and intestinal mesenchymal stem cells i intestinal damage models
BURCU PERVİN
Doktora
İngilizce
2025
BiyolojiHacettepe ÜniversitesiKök Hücre Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. FATİMA AERTS KAYA