Geri Dön

Regeneration and agrobacterium mediated transformation studies in different tomato cultivars

Farklı domates kültürlerinde rejenerasyon ve agrobacteriuma dayalı transformasyon çalışmaları

  1. Tez No: 75764
  2. Yazar: YETER BÜLBÜL
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. HÜSEYİN AVNİ ÖKTEM
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyoloji, Biology
  6. Anahtar Kelimeler: Domates, Rejenerasyon, Agrobacterium, Transformasyon, neomisin fosfotransferase-II (npt-II), GUS. vı, Tomato, Regeneration, Agrobacterium, Transformation, neomycin phosphotransferase-II (npt-II), GUS
  7. Yıl: 1998
  8. Dil: İngilizce
  9. Üniversite: Orta Doğu Teknik Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 94

Özet

ÖZ FARKLI DOMATES (Lycopersicon esculentum Mill) KÜLTÜRLERİNDE REJENERASYON VE AGROBACTERIUMA DAYALI TRANSFORMASYON ÇALIŞMALARI BÜLBÜL, Yeter Yüksek Lisans, Biyoloji Bölümü Tez Yöneticisi: Doç. Dr. Hüseyin Avni ÖKTEM Ortak Tez Yöneticisi: Prof. Dr. Meral YÜCEL Ağustos 1998, 79 sayfa Bir bitki türünde, optimize edilmiş bir rejenerasyon yöntemi ve uygun bir gen aktarım sistemi, transjenik bitkilerin eldesi için gerekli olan en önemli öğelerdir. Sunulan çalışma, domates bitkisinde (Lycopersicon esculentum) rejenerasyon ve Agrobacterium 'a dayalı bir gen transfer sistemi oturtturmayı amaçlamıştır. Regenerasyon çalışmaları WC156, Pearson, H2274 ve SC2121 olmak üzere dört farklı domates çeşidinde yürütülmüştür. 10-20 günlük kotiledon, hipokotil ve toprakta büyümekte olan 2-3 aylık bitkilerden elde edilen yaprak diskleri olmak üzere üç farklı eksplant türü rejenerasyon yetenekleri açısından incelenmişlerdir.Bütün eksplant tipleri, 2.5 mg/L benzol adenine (BA) ve 0.2 mg/L indolasetik asid (IAA) içeren MS ortamında (MS tuzları, Gamborg vitaminleri, %3 sükroz (w/v), %0.7 agar, pH 5.7) kallus oluşturabilmişlerdir. Her dört çeşit domates türünün kotiledon eksplantları, 30-45 gün içerisinde iyi gelişmiş gövde oluşturmuşlardır. Öte yandan, diğer eksplantlarda, gövde oluşturma kapasitesi domates kültürünün türüne göre değişmektedir. Her kültürün kotiledon dokusundan gelişen gövdeler, kök oluşturma ortamında (MS tuzlan ve vitaminleri, %3 sükroz (w/v), %0.7 agar ve 0.1 mg/L IAA, pH 5.7) kök gelişimi göstermişlerdir. Köklenen bitkiler toprağa alınmış ve sera ortamında büyümüşlerdir. Rejenerasyon prosesi 5-6 aylık bir süreçte gerçekleşmektedir. Transformasyon çalışmaları, npt-II (kanamycin direnci) ve uida (GUS) genlerinin bulunduğu pGUSINT binary vektörünü taşıyan Agrobacterium tumefaciens' iri EHA105 susu kullanılarak yaprak diskleri, kotiledon ve hipokotillerde yürütülmüştür. Kontrol eksplantlara kıyasla, Agrobacterium ile muamele edilen eksplantlar, 50 mg/L kanamisinin varlığında daha yavaş kallus oluşumu ve daha az gövde oluşumu sergilemişlerdir. Sadece kotiledon eksplantlan kanamisine dirençli kallus oluşumu ve histokimyasal boyama yöntemiyle pozitif GUS aktivitesi göstermişlerdir.

Özet (Çeviri)

ABSTRACT REGENERATION AND AGROBACTERIUM MEDIATED TRANSFORMATION STUDIES IN DIFFERENT TOMATO (Lycopersicon esculentum Mill) CULTIVARS BTJLBUL, Yeter M.Sc., Department of Biology Supervisor: Assoc. Prof. Dr. Hüseyin Avni ÖKTEM Co-Supervisor: Prof. Dr. Meral YÜCEL August 1998, 79 pages An optimized regeneration protocol and a suitable transformation technique is a necessity for obtaining transgenic plants in a given plant species. This study aims to establish a regeneration and Agrobacterium based transformation system in cultivated tomato {Lycopersicon esculentum). Regeneration studies were carried out on four different tomato cultivars namely WC156, Pearson, H2274 and SC2121. Three different explants, namely aseptically grown 10-20 days old cotyledons, hypocotyls and leaf disks from 2-3 months old soil grown tomato plants were analyzed for their regeneration potencies.All explant types were capable of forming callus in MS based media (MS salts, Gamborg's vitamins, 3% sucrose (w/v), 0.7% agar, pH 5.7) supplemented with 2.5 mg/L benzyl adenine (BA) and 0.2 mg/L indoleacetic acid (IAA). Cotyledon explants from all four types of tomato cultivars formed well-developed shoots in 30-45 days. Shooting response in other explants, on the other hand, showed cultivar dependent variations. Shoots regenerated from cotyledon tissue of all cultivars showed root development in root inducing media (MS salts and vitamins, 3% sucrose (w/v), 0.7% w/v agar and 0.1 mg/L IAA, pH 5.7). Rooted plants transferred to soil and grown to maturity under greenhouse conditions. The entire regeneration process takes about 5-6 months. Transformation studies were carried out on leaf disks, cotyledon, and hypocotyl explants by using Agrobacterium tumefaciens EHA105 strain harbouring the pGUSINT binary vector carrying coding sequences for npt-II (kanamycin resistance) and uida (GUS) genes. Compared to controls, Agrobacterium treated explants exhibited slower callus formation and poor shooting response in the presence of 50 mg/L kanamycin. Only cotyledon explants gave rise to kanamycin resistant callus and positive GUS activity determined by histochemical staining assays.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    696166

    Domateste doku kültürü, genetik transformasyon ve CRISPR/CAS9 sistemi ile genom işleme optimizasyonu

    Optimization of tissue culture, genetic transformation and CRISPR/CAS9 system with genome processes in tomato

    ZAFER SEÇGİN

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2021

    BiyoteknolojiOndokuz Mayıs Üniversitesi

    Tarımsal Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. MUSA KAVAS

    DOÇ. DR. KUBİLAY YILDIRIM

  2. Tez No

    153408

    Optimization of regeneration and Agrobacterium mediated transformation of wheat (Triticum aestivum L.cv. Yüreğir 89)

    Buğdayda (Triticum aestivum L.cv. Yüreğir 89) rejenerasyonun ve Akrobakteriuma dayalı transformasyonun optimizasyonu

    DİDEM DEMİRBAŞ

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2004

    BiyoteknolojiOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MERAL YÜCEL

    PROF. DR. HÜSEYİN AVNİ ÖKTEM

  3. Tez No

    309439

    Application of biotechnological tools to model plant, Brachypodium distachyon

    Model bitkide, Brachypodium distachyon biyoteknolojik yöntemlerin uygulanması

    BAHAR SOĞUTMAZ ÖZDEMİR

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2009

    BiyoteknolojiSabancı Üniversitesi

    Biyoloji Bilimleri ve Biyomühendislik Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. HİKMET BUDAK

  4. Tez No

    93287

    Optimisation of tissue culture conditions and gene transfer studies in lentil

    Mercimekte doku kültürü şartlarının optimizasyonu ve gen transfer çalışmaları

    MEHRZAD MAHMOUDİAN

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2000

    BiyoteknolojiOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. HÜSEYİN AVNİ ÖKTEM

    PROF. DR. HALUK HAMAMCI

  5. Tez No

    167176

    Optimization of tissue culture, regeneration and Agrobacterium mediated transformation parameters in winter wheat cultivars (Kızıltan-91 and Bezostaja-01)

    Kışlık buğdaylarda (Kızıltan-91 ve Bezostaja-01) doku kültürünün, rejenerasyonun ve agrobakteriuma dayalı transformasyon parametrelerinin optimizasyonu

    MUSA KAVAS

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2005

    BiyolojiOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF.DR. HÜSEYİN AVNİ ÖKTEM

    PROF.DR. MERAL YÜCEL

Geri Dön