Geri Dön

Aşı adayı norovirüs antijenlerinin klonlanması ve immünojenitelerinin araştırılması

Cloning of vaccine candidates norovirus antigens and investigation of their immunogenities

PDF İndir

  1. Tez No: 764852
  2. Yazar: DEMET YALÇIN BİNGÜL
  3. Danışmanlar: PROF. DR. GAMZE BAŞBÜLBÜL
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Biyoteknoloji, Mikrobiyoloji, Moleküler Tıp, Biotechnology, Microbiology, Molecular Medicine
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2022
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Aydın Adnan Menderes Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyoloji Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 124

Özet

Amaç: Bu araştırma Norovirüs' e ait aşı adayı olabilecek antijenik proteinlerin rekombinant olarak elde edilmesi ve oluşabilecek immün yanıtın hayvan denemeleri ile araştırılması amacıyla yapılmıştır. Materyal ve Yöntem: Nöroviruse ait VP1, VP2, p22 ve polipeptid (EP123) dizileri spesifik primerlerle PCR' da çoğaltılmıştır. Amplikonlar, pET-30a (+) ekspresyon vektörüne yerleştirildikten sonra E. coli BL21 suşuna transformasyonla aktarılmıştır. Rekombinant olarak üretilen proteinler, His-tag kuyruğu yardımıyla ve amonyum sülfatla kısmi olarak saflaştırıldıktan sonra immünizasyon için antijen olarak kullanılmıştır. Aşılanan farelerin serum örneklerinden Norovirüse karşı oluşan antikor cevabı indirekt ELISA yöntemiyle saptanmıştır. Bulgular: E. coli' ye transformasyonla aktarılan genlerin varlığı sekans analizi ile doğrulanmıştır. His-tag kuyruğu ve amonyum sülfatla çöktürme işlemi proteinlerin kısmi olarak saflaştırılması için yeterli olmuştur. Sadece VP1 proteini yeterli düzeyde immün yanıt oluşturmuştur. Sonuç: Bu tez kapsamında, VP1 ve VP2 proteinlerine ek olarak, önceki Nörovirus aşı çalışmalarından farklı, ilk defa epitoplardan oluşan bir polipeptit ve Norovirüsün yapısal olmayan bir geni (p22) rekombinant olarak üretilmiş ve immünojenitesi araştırılmıştır. VP1 dışındaki rekombinant proteinlerde yeterli immunojenik yanıtın oluşmamasının, kullanılan doz, bağışıklama sayısı veya adjuvan uygulaması ile ilgili olabileceği düşünülmüştür.

Özet (Çeviri)

Objective: This research was carried out in order to obtain recombinant antigenic proteins that can be vaccine candidates of Norovirus and to investigate the immune response that may occur with animal experiments. Material and Methods: The VP1, VP2, p22 and polypeptide (EP123) sequences of the norovirus were amplified in PCR with specific primers. Amplicons were transformed into E. coli BL21 strain after insertion into the pET-30a (+) expression vector. Recombinantly produced proteins were used as antigens for immunization after partial purification with the help of His-tag tail and ammonium sulfate. Antibody response to Norovirus from serum samples of vaccinated mice was determined by indirect ELISA method. Results: The presence of genes transferred by transformation into E. coli was confirmed by sequence analysis. His-tag tail and precipitation with ammonium sulfate were sufficient for partial purification of the proteins. Only the VP1 protein elicited an adequate immune response. Conclusion: In this thesis, in addition to VP1 and VP2 proteins, a polypeptide consisting of epitopes different from previous Norovirus vaccine studies, and a non-structural gene (p22) of Norovirus were produced recombinantly and its immunogenicity was investigated. It was thought that the lack of adequate immunogenic response in recombinant proteins other than VP1 may be related to the dose used, the number of immunizations or the adjuvant administration.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    536882

    Aşı adayı toxoplasma gondii GRA8 proteininin oluşturduğu immun yanıt ve korunmanın araştırılması

    Evaluating the immune response and protection conferred by vaccine candidate toxoplasma gondii GRA8 protein

    MUHAMMET KARAKAVUK

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2019

    ParazitolojiEge Üniversitesi

    Parazitoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. MERT DÖŞKAYA

  2. Tez No

    753990

    Aşı adayı yerel BVD virus suşlarında inaktivasyon kinetiğinin belirlenmesi ve deney hayvanlarında immunizasyon çalışmaları

    Determination of inactivation kinetics in vaccine candidate local BVD virus strains and immunization studies in experimental animals

    BERFİN KADİROĞLU

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    Veteriner HekimliğiBursa Uludağ Üniversitesi

    Veterinerlik Viroloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. KADİR YEŞİLBAĞ

  3. Tez No

    534115

    Ağızdan aşı adayı Clostridium difficile yüzey proteini geni slpA'nın Agrobacterium tumefaciens'e aktarılması

    Transferring oral vaccine candidate Clostridium difficile surface protein gene slpA to Agrobacterium tumefaciens

    NEŞE ÇAĞLAYAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2019

    BiyolojiMarmara Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. İBRAHİM İLKER ÖZYİĞİT

    PROF. DR. ZÜHTÜ TANIL KOCAGÖZ

  4. Tez No

    484572

    Şarbon aşı adayı olarak PA83'ün yeni mutant formunun N. benthamiana bitkisinde tasarlanması, ekspsresyonu, saflaştırılması ve karakterizasyonu

    Engineering, expression, purification and characterization of new mutant form of PA83 in N. benthamiana plants as antrax vaccine candida

    RIFAT ÜNGÖR

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2017

    BiyomühendislikAkdeniz Üniversitesi

    Tarımsal Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. TARLAN MAMMEDOV

  5. Tez No

    614261

    Toxoplasma gondii aşı adayı SAG 1 geninin moleküler karakterizasyonu, protein ekspresyonu ve antijenik yapısı

    Molecular characterization, expression and antigenic structure of SAG 1 gene and its protein, a candidate for toxoplasma gondii vaccine

    ABDÜSSAMED AKŞİT

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2019

    ParazitolojiErciyes Üniversitesi

    Tıbbi Parazitoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ALPARSLAN YILDIRIM

Geri Dön