Geri Dön

Bacillus thuringiensis cry ıva ve cry ıvd genlerine ait proteinlerin bacılovirüs ekspresyon vektor sisteminde üretilmeleri

Expression of the combination of cry IV A and crylVD genes of Bacillus thuringiensis in Baculovirus Expression Vector System

PDF İndir

  1. Tez No: 78114
  2. Yazar: REMZİYE NALÇACIOĞLU
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. ZİHNİ DEMİRBAĞ
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyoloji, Biology
  6. Anahtar Kelimeler: Bacillus thuringiensis, crylVA, crylVD, baculovirüs, gen ekspresyon, Bacillus thrungiensis, crylVA, crylVD, baculovirus, gene expression VI
  7. Yıl: 1998
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Karadeniz Teknik Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 57

Özet

ÖZET Bu çalışmada, Bacillus thuringiensis subsp. israelensis's ait insektisidal kristal proteinlerini kodlayan crylVA ve crylVD genlerinin baculovirüs ekspresyon vektör sisteminde ekspresyonları gerçekleştirilmiştir. B. thrungiens'in çoğu suşları spor oluşumu esnasında yüksek oranda insektisidal inklüzyonlar üretirler. Bu inklüzyonlar Diptera, Lepidoptera ve Coleoptera gruplarına ait larvalara karşı toksik özelliğe sahiptirler. Bu nedenle, B. thuringiensis çeşitli tarım bitkilerini zararlılardan korumak amacıyla önemli ölçüde kullanılmaktadır. Ancak, bu insektisidal inklüzyonların saf bir şekilde üretilmeleri ve bunların entegre zararlı yöntemlerinde kullanılmaları sadece zararlı olan böceklerin öldürülmeleri bakımından büyük önem taşımaktadır. B. thuringiensis subsp. israelensis'e ait insektisidal kristal proteinlerini kodlayan crylVA ve crylVD genlerinin kodlayan DNA bölgeleri elde edilerek çoğaltıldı. Bu genleri taşıyan DNA fragmanları birlikte Autographa californica nüklear polihedrozis virüsü (AcNPV, Baculovirüs) transfer plazmidindeki polihedrin (polh) promotorunun önüne klonlandı. Transfer plazmidi yabani tip AcNPV DNA'sı ile birlikte Spodoptera frugiperda böcek hücre kültürüne transfekte edildi. Hücre içerisinde oluşan cryTVA ve crylVD genlerine sahip rekombinant AcNPV“plak”yöntemiyle seçilerek saflaştırıldı. Bu genlerin kodladığı proteinlerin sentezleri poliakrilamid jel elektroforez yöntemiyle tespit edildi.

Özet (Çeviri)

SUMMARY In this study, expression of the genes encoding Bacillus thuringiensis subsp. israelensis insecticidal crystal proteins (ICPs; the combination of cry IV A gene and crylVD gene) in baculovirus expression vector system have been carried on. Various strains of B. thrungiensis produce large amount of insecticidal inclusions during sporilation. These inclusions have toxic effects on the larvae belong to Diptera, Lepidoptera and Coleoptera. For this reason, B. thrungiensis is utilized to protect agricultural plants from noctious insects. However, in order to kill only the harmful insects, but not harmless or beneficial insects, it is essential to produce these ICPs so pure and use them against harmfull insects. The coding sequences of cryTVA and crylVD genes belong to B. thuringiensis were obtained and amplified. The DNA fragments belong to the combination of these genes were cloned into Autographa californica nuclear polyhedrosis virus (AcNPV, Baculovirus) transfer vector in front of polh promotor. The transfer vector and wild-type AcNPV were co-transfected into Spodoptera frugiperda insect cetT culture. The recombinant AcNPV which has the coding regions of crylVA and crylVD genes was selected and purified by plaque assay. The production of the ICPs by recombinant viruses was detected by polyacrilamid gel electrophoresis.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    78176

    Euproctis chrysorrhoea (L.)'nın bakteriyal florasının ve biyolojik mücadele ajanlarının araştırılması

    Investigation bacterial flora and biological control agent of Euproctis Chrysorrhoe

    MUSTAFA YAMAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    1998

    BiyolojiKaradeniz Teknik Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. ZİHNİ DEMİRBAĞ

  2. Tez No

    501714

    β-ekzotoksin geni (thuE) taşıyan yerel Bacillus thuringiensis suşlarının belirlenmesi

    Determinaton of native Bacillus thuringiensis strains carrying β-exotoxin gene (thuE)

    MEHMET ERDEM ÖZER

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2018

    MikrobiyolojiErciyes Üniversitesi

    Tarımsal Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. SEMİH YILMAZ

  3. Tez No

    596180

    Bacillus thuringiensis izolatlarinda parasporin (ps) genlerinin beli̇rlenmesi̇

    Determination of Parasporin (ps) genes in Bacillus thuringiensis isolates

    ENFAL ÇÖMLEKÇİ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2019

    ZiraatErciyes Üniversitesi

    Tarımsal Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. SEMİH YILMAZ

  4. Tez No

    167098

    Cloning of chitinase a gene (chiA) from Serratia marcescens BN10 and its expression in coleoptera-specific Bacillus thuringiensis

    Kitinaz a geninin (chiA) Serratia marcescens BN10'dan klonlaması ve coleoptera-spesifik Bacillus thuringiensiste ifade edilmesi

    SEZER OKAY

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2005

    BiyolojiOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF.DR. GÜLAY ÖZCENGİZ

    Y.DOÇ.DR. MELEK ÖZKAN

  5. Tez No

    68331

    Molecular genetics of cryii-and-crystal protein synthesis in bacillus thuringiensis 8 and cloning of cryi a (c) gene in e.coli

    Bacillus thuringiensis 81'de CRY I ve CRY II kristal protein sentezinin molekülar genetiği ve CRY IA (c) geninin E.Colide klonlanması

    PARVANEH AFKHAMİ

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    1997

    BiyolojiOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. N. G. ALAEDDİNOĞLU

Geri Dön