Bacillus thuringiensis cry ıva ve cry ıvd genlerine ait proteinlerin bacılovirüs ekspresyon vektor sisteminde üretilmeleri
Expression of the combination of cry IV A and crylVD genes of Bacillus thuringiensis in Baculovirus Expression Vector System
- Tez No: 78114
- Danışmanlar: DOÇ. DR. ZİHNİ DEMİRBAĞ
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyoloji, Biology
- Anahtar Kelimeler: Bacillus thuringiensis, crylVA, crylVD, baculovirüs, gen ekspresyon, Genler, Proteinler, Bacillus thrungiensis, crylVA, crylVD, baculovirus, gene expression VI, Bacillus thuringiensis, Genes, Proteins
- Yıl: 1998
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Karadeniz Teknik Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
ÖZET Bu çalışmada, Bacillus thuringiensis subsp. israelensis's ait insektisidal kristal proteinlerini kodlayan crylVA ve crylVD genlerinin baculovirüs ekspresyon vektör sisteminde ekspresyonları gerçekleştirilmiştir. B. thrungiens'in çoğu suşları spor oluşumu esnasında yüksek oranda insektisidal inklüzyonlar üretirler. Bu inklüzyonlar Diptera, Lepidoptera ve Coleoptera gruplarına ait larvalara karşı toksik özelliğe sahiptirler. Bu nedenle, B. thuringiensis çeşitli tarım bitkilerini zararlılardan korumak amacıyla önemli ölçüde kullanılmaktadır. Ancak, bu insektisidal inklüzyonların saf bir şekilde üretilmeleri ve bunların entegre zararlı yöntemlerinde kullanılmaları sadece zararlı olan böceklerin öldürülmeleri bakımından büyük önem taşımaktadır. B. thuringiensis subsp. israelensis'e ait insektisidal kristal proteinlerini kodlayan crylVA ve crylVD genlerinin kodlayan DNA bölgeleri elde edilerek çoğaltıldı. Bu genleri taşıyan DNA fragmanları birlikte Autographa californica nüklear polihedrozis virüsü (AcNPV, Baculovirüs) transfer plazmidindeki polihedrin (polh) promotorunun önüne klonlandı. Transfer plazmidi yabani tip AcNPV DNA'sı ile birlikte Spodoptera frugiperda böcek hücre kültürüne transfekte edildi. Hücre içerisinde oluşan cryTVA ve crylVD genlerine sahip rekombinant AcNPV“plak”yöntemiyle seçilerek saflaştırıldı. Bu genlerin kodladığı proteinlerin sentezleri poliakrilamid jel elektroforez yöntemiyle tespit edildi.
Özet (Çeviri)
SUMMARY In this study, expression of the genes encoding Bacillus thuringiensis subsp. israelensis insecticidal crystal proteins (ICPs; the combination of cry IV A gene and crylVD gene) in baculovirus expression vector system have been carried on. Various strains of B. thrungiensis produce large amount of insecticidal inclusions during sporilation. These inclusions have toxic effects on the larvae belong to Diptera, Lepidoptera and Coleoptera. For this reason, B. thrungiensis is utilized to protect agricultural plants from noctious insects. However, in order to kill only the harmful insects, but not harmless or beneficial insects, it is essential to produce these ICPs so pure and use them against harmfull insects. The coding sequences of cryTVA and crylVD genes belong to B. thuringiensis were obtained and amplified. The DNA fragments belong to the combination of these genes were cloned into Autographa californica nuclear polyhedrosis virus (AcNPV, Baculovirus) transfer vector in front of polh promotor. The transfer vector and wild-type AcNPV were co-transfected into Spodoptera frugiperda insect cetT culture. The recombinant AcNPV which has the coding regions of crylVA and crylVD genes was selected and purified by plaque assay. The production of the ICPs by recombinant viruses was detected by polyacrilamid gel electrophoresis.
Benzer Tezler
- Euproctis chrysorrhoea (L.)'nın bakteriyal florasının ve biyolojik mücadele ajanlarının araştırılması
Investigation bacterial flora and biological control agent of Euproctis Chrysorrhoe
MUSTAFA YAMAN
Yüksek Lisans
Türkçe
1998
BiyolojiKaradeniz Teknik ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ZİHNİ DEMİRBAĞ
- Isolation and characterization of Bacillus thuringiensis from olive tree-related habitats
Zeytinle ilgili alanlardan Bacillus thuringiensis'in izolasyonu ve karekterizasyonu
ÇELENK ÇINAR
Yüksek Lisans
İngilizce
2005
Biyomühendislikİzmir Yüksek Teknoloji EnstitüsüBiyoteknoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ.DR. FAZIL YENİDÜNYA
DOÇ.DR. HATİCE GÜNEŞ
PROF.DR. ŞEBNEM HARSA
- Büyük mum güvesi (Galleria mellonella L.) ya etkili Bacillus thuringiensis suşları ve bunların plazmid içerikleri üzerinde araştırmalar
A Study of bacillus thuringiensis strains effected on creater max moth (Galleria mellonella L.) and their plasmids
MUSTAFA AKÇELİK
Yüksek Lisans
Türkçe
1987
MikrobiyolojiAnkara ÜniversitesiTarım Ürünleri Teknolojisi Ana Bilim Dalı
DOÇ.DR. M. LÜFTÜ ÇAKMAKÇI
- Nar bahçelerinden Bacillus thuringiensis izolasyonu, CRY/VIP gen profillerinin belirlenmesi ve biyoaktivitelerinin araştırılması
Isolation of Bacillus thuringiensis from pomegranate gardens, determination of CRY/VIP gene profiles and investigation of bioactivity
BURCU ŞAHİN
Doktora
Türkçe
2019
BiyolojiMuğla Sıtkı Koçman ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. HATİCE GÜNEŞ
- Kiraz bahçelerinden Bacillus thuringiensis izolasyonu, Cry gen profillerinin belirlenmesi ve parasporinler üzerine çalışmalar
Isolation of native Bacillus thuringiensis strains from cherry orchards, determination of Cry gene profiles and studies on parasporins
MÜJGAN KESİK OKTAY
Doktora
Türkçe
2019
BiyolojiMuğla Sıtkı Koçman ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. HATİCE GÜNEŞ