Geri Dön

Investigation of anti-neurofascin and anti-myelin oligodendrocyte glycoprotein antibodies in patients with chronic inflammatory demyelinating polyneuropathy

Kronik inflamatuar demiyelinizan polinöropatili hastalarda anti-nörofasin ve anti-miyelin oligodendrosit glikoprotein antikorlarının araştırılması

PDF İndir

  1. Tez No: 806645
  2. Yazar: ALİ BURAK KIZILIRMAK
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. ATAY VURAL
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyoloji, Genetik, Nöroloji, Biology, Genetics, Neurology
  6. Anahtar Kelimeler: Kronik enflamatuar demiyelinizan polinöropati, kombine merkezi ve periferik demiyelinizasyon sendromu, otoantikorlar, nörofasin, miyelin oligodendrosit glikoprotein, Chronic inflammatory demyelinating polyneuropathy, combined central and peripheral demyelination syndrome, autoantibody, neurofascin, myelin oligodendrocyte glycoprotein
  7. Yıl: 2023
  8. Dil: İngilizce
  9. Üniversite: Koç Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Sağlık Bilimleri Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: İmmünoloji Bilim Dalı
  13. Sayfa Sayısı: 68

Özet

Kronik inflamatuar demiyelinizan polinöropati (CIDP-KİDP), her yaştan insanı etkileyebilen kronik, immün aracılı bir periferik nöropatidir. KİDP'de yürüme güçlüğü, kol ve bacakta güçsüzlük, uyuşma ve karıncalanma ve titreme görülebilir. CIDP tanısı konan hastaların yaklaşık %2-18'inde, serumda Neurofascin 155 (NF155), Neurofascin 186 (NF186), Contactin1 ve Caspr1 dahil olmak üzere paranodal antijenlere karşı antikorlar saptanabilir ve bu alt grubu seropozitif CIDP olarak tanımlar. Tedavi yaklaşımı bu alt grupta yaygın KİDP'den farklı olabilir, bu nedenle bu hastaların tanımlanması önemlidir. Ancak paranodal antijenlere karşı antikor testleri Türkiye'de bulunmamaktadır. Bu çalışmada öncelikle hastaların serum ve beyin omurilik sıvısında NF-155, NF-186'ya karşı antikor varlığını test etmek için canlı hücre bazlı bir test oluşturmayı amaçladık. Daha sonra, Türkiye'deki anti-NF155 antikoru pozitif CIDP'nin sıklığını ve özelliklerini belirlemek için ülke çapında bir CIDP hasta kohortundan elde edilen serumları bu antikorlar için test etmeyi ve anti-MOG antikorlarını test etmeyi amaçladık. NF proteininin yapısal bütünlüğünü korumak için canlı, sabitlenmemiş hücrelere canlı hücre bazı tahlil yöntemi uygulandı. Başlangıçta NF155-EGFP, NF186-EGFP veya EGFP (kontrol olarak) geni içeren plazmitler, bir transfeksiyon reaktifi kullanılarak HeLA hücrelerine transfekte edildi. Daha sonra hasta serumu veya CSF, transfekte edilmiş hücrelerde inkübe edildi, ardından biotin-konjüge sekonder antikor ile inkübasyon yapıldı. Son olarak, akış sitometrisi ile antikor bağlanmasını saptamak için Alexa fluor-647 konjuge streptavidin eklendi. Ortalama flüoresan yoğunluğunun (MFI) deltası ve oranı, protein ve yalnızca GFP ifade eden hücrelerden elde edilen veriler kullanılarak hesaplandı. Sağlıklı kontrollerden alınan serumlar kullanılarak bir kesme değeri belirlendi. 182 CIDP hastasından alınan serumları test ettik. Hastalar ortalama 41 (21.8) yaşındaydı ve F:E 70/104 idi. 147 hasta yetişkin ve 35 hasta pediatrikti. NF-155-IgG için toplam 11 örnek pozitifti. Bu numuneler arasında, 6/11, baskın izotip olarak IgG4'e sahipti ve bu, anti-NF155 antikor pozitifliğini doğruladı. Literatürde daha önce bildirilen seropozitif CIDP hastalarının klinik özellikleriyle uyumlu olan beş hastada ayrıntılı klinik bilgi mevcuttu. Yedi NF155-IgG4+ hastasından altısı yetişkin ve biri pediatrik hastaydı. Üç hastada IgG4 alt tipine ek olarak IgG2 ve IgG3 antikorları da mevcuttu. Türk kohortunda anti-NF155 antikor pozitifliği sıklığı %3,5 olarak bulundu. Dört hastanın geri kalanında IgG pozitifliği saptanmadı ve üç örnekte düşük IgM pozitifliği saptandı. NF155 IgG4 pozitif bir hastadan alınan BOS da analiz edildi ve BOS'ta da antikorların varlığını gösterdi. CIDP hastalarından test edilen diğer 13 CSF örneğinde, bir örnekte düşük NF155-IgG, NF186-IgG ve MOG-IgG titreleri vardı. Bu hastanın serumu bu antikorlar için negatifti. Test edilen 12 Guillain-Barre Sendromu (GBS) BOS örneğinden iki hastada düşük NF155-IgG titreleri vardı. Sekiz MS hastası ve diğer nörolojik bozuklukları olan 22 hasta arasında, BOS numunelerinin hiçbiri NF155-IgG veya NF186-IgG için pozitif olarak test edilmedi. Ek olarak, CIDP hastalarında MOG antikorlarının varlığını analiz ettik. Dokuz hastada MOG antikorları için serum testleri pozitifti. Hastalardan ikisi çocuktu. Pediatrik hastalara CIDP ve kombine merkezi ve periferik demiyelinizasyon sendromu (CCPD) teşhisi kondu. Erişkin hastalar, ikisine CCPD ve geri kalan beşine CIDP teşhisi konulan kalan yedi vakayı oluşturdu. Serum MOG-IgG pozitif olan dokuz hastada NF155 ve NF186 antikorları negatifti. CIDP ve GBS hastalarından alınan 16 BOS örneğinin analizi, beş hastanın düşük MOG-IgG titresine sahip olduğunu ortaya koydu. Bu hastaların ikisinde serum MOG-IgG sınırda pozitif bulundu. Diğer üç hastada serum pozitifliği saptanmadı. Hem serum hem de BOS MOG-IgG pozitifliği olan hastalardan birinde CCPD, diğerinde CIDP vardı. Sonuç olarak, serum ve BOS'tan anti-NF155 ve anti-NF186 antikorlarını test etmek için canlı hücre bazlı bir tahlil oluşturduk. Ayrıca bu antikorların sıklığını, immünolojik ve klinik özellikleriyle birlikte yetişkin ve pediatrik hastaları içeren geniş bir Türk CIDP hasta kohortunda belirledik. Ek olarak, MOG-IgG'nin CCPD hastalarının yanı sıra CIDP hastalarının serum ve BOS'larında da bulunabileceğini bulduk.

Özet (Çeviri)

Chronic inflammatory demyelinating polyneuropathy (CIDP) is a chronic immune-mediated peripheral neuropathy that can affect people of all ages. Walking difficulty, arm and leg weakness, numbness and tingling and tremor can be seen in CIDP. In around 2-18% of patients diagnosed with CIDP, antibodies against paranodal antigens, including Neurofascin 155 (NF155), Neurofascin 186 (NF186), Contactin1 and Caspr1 can be detected in the serum, identifying this subgroup as seropositive CIDP. Treatment approach can be different is this subgroup compared to common CIDP, therefore, it is important to identify these patients. However, antibody tests against the paranodal antigens are not available in Turkey. In this study, we first aimed to establish a live cell-based assay to test the presence of antibodies against NF-155, NF-186 in the serum and cerebrospinal fluid of patients. Then we aimed to test the sera obtained from a nationwide cohort of CIDP patients for these antibodies, as well as anti-MOG antibodies to identify the frequency and characteristics of anti-NF155 antibody positive CIDP in Turkey. The live cell base assay method was applied to live, unfixed cells to preserve the structural integrity of the NF protein. Initially, plasmids containing NF155-EGFP, NF186-EGFP or EGFP (as control) gene was transfected into HeLA cells using a transfection reagent. Then, patient serum or CSF was incubated the transfected cells followed by incubation with a biotin-conjugated secondary antibody. Finally, Alexa fluor-647 conjugated streptavidin was added to detect antibody binding by flow cytometry. Delta and ratio of mean fluorescent intensity (MFI) was calculated by using the data from protein and GFP-only expressing cells. A cut-off value was determined by using sera from healthy controls. We tested sera from 182 CIDP patients. The patients were 41 (21.8) years old on average, with a F:M of 70/104. 147 patients were adult, and 35 patients were pediatric. A total of 11 samples were positive for NF-155-IgG. Among these samples, 6/11 had IgG4 as the dominant isotype, verifying anti-NF155 antibody positivity. Detailed clinical information was present in five patients, that was compatible with the clinical characteristics of seropositive CIDP patients previously reported in the literature. Among seven NF155-IgG4+ patients six were adults and one was a pediatric patient. IgG2 and IgG3 antibodies were also present in addition to IgG4 subtype in three patients. The frequency of anti-NF155 antibody positivity in the Turkish cohort was found to be 3.5%. In the rest of the four patients no IgG positivity was detected and low IgM positivity was detected in three samples. CSF from one NF155 IgG4 positive patient was also analysed and showed the presence of antibodies in the CSF, as well. In another 13 CSF samples tested from CIDP patients one samples had low titers of NF155-IgG, NF186-IgG and MOG-IgG. This patient's serum was negative for these antibodies. Among 12 Guillain-Barre Syndrome (GBS) CSF samples tested, two patients had low titers of NF155-IgG. Among eight MS patients and 22 patients with other neurological disorders, none of the CSF samples tested positive for NF155-IgG or NF186-IgG. In addition, we analysed the presence MOG antibodies in CIDP patients. Serum tests were positive for MOG antibodies in nine patients. Two of the patients were children. Pediatric patients were diagnosed with CIDP and combined central and peripheral demyelination syndrome (CCPD). Adult patients comprised the remaining seven cases, of which two were diagnosed with CCPD and the remaining five with CIDP. In the nine patients with positive serum MOG-IgG, NF155 and NF186 antibodies were negative. Analysis of 16 CSF samples obtained from CIDP and GBS patients revealed that, five patients had low titers of MOG-IgG. Serum MOG-IgG was found to be borderline positive in two of these patients. In the other three patients, serum positivity was not detected. Among patients with both serum and CSF MOG-IgG positivity, one patient had CCPD and the other had CIDP. In conclusion, we have established a live cell-based assay to test anti-NF155 and anti-NF186 antibodies from serum and CSF. We further identified the frequency of these antibodies in a large cohort of Turkish CIDP patients containing adult and pediatric patients, together with their immunological and clinical characteristics. Additionally, we found that MOG-IgG can also be present in the serum and CSF of CIDP patients as well as CCPD patients.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    767774

    Sinnamik ve Kafeik asit'in anti-kanser etkilerinin malignant mezotelyoma hücrelerinde araştırılması

    Investigation of anti-cancer effects of Cinnamic and Caffeic acid on malignant mesothelioma cells

    DAYK MURATOĞLU

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    BiyolojiGebze Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ASUMAN DEMİROĞLU ZERGEROĞLU

  2. Tez No

    775364

    OZF2 fenotiyazin türevinin anti-kanser ve anti-inflamatuar aktivitelerinin incelenmesi

    Investigation of anti-cancer and anti-inflammatory activities of OZF2 phenothiosin derivative

    ŞULE MERVE ASLAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    BiyoteknolojiMersin Üniversitesi

    Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. FURKAN AYAZ

  3. Tez No

    351964

    Betulinik asit'in anti-proliferatif özelliklerinin araştırılması

    Investigation of anti-proliferative features of betulinic acid

    HÜSEYİN GÜL

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2014

    BiyolojiGebze Yüksek Teknoloji Enstitüsü

    Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. ASUMAN DEMİROĞLU ZERGEROĞLU

  4. Tez No

    691536

    Primer İTP'li olgularda anti-tiroid antikor sıklığının ve klinik etkinliğinin araştırılması

    Investigation of anti-thyroid antibody frequency and clinical efficacy in patients with primary ITP

    AHMET ONUR DEMİRCİ

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2021

    Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıAtatürk Üniversitesi

    Çocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. HANDAN ALP

  5. Tez No

    657525

    Altmış bir ekstrapulmoner örnekteantitüberküloz ilaç duyarlılık sonuçlarınınmgıt yöntemi ile araştırılması

    Investigation of anti-tuberculous drug sensitivity results in sixty-one extrapulmonary samples using the MGIT Method

    SEVTAP ŞENOĞLU

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2013

    Klinik Bakteriyoloji ve Enfeksiyon HastalıklarıSağlık Bakanlığı

    Enfeksiyon Hastalıkları ve Klinik Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. GÖNÜL ŞENGÖZ

    DOÇ. DR. FİLİZ PEHLİVANOĞLU

Geri Dön