Geri Dön

Muşmuladan (Mespilus germanica) izole edilen polifenol oksidaz enziminin aktivitesi üzerine amino asitlerin inhibisyon etkileri

Inhibition effects of amino acids on the activity of polyphenol oxidase enzyme isolated from medlar (Mespilus germanica)

PDF İndir

  1. Tez No: 818476
  2. Yazar: EREN ÖZDEMİR
  3. Danışmanlar: PROF. DR. EMİNE KARAKUŞ, DR. ÖĞR. ÜYESİ ÇİĞDEM BİLEN
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyokimya, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2023
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Yıldız Teknik Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Biyokimya Bilim Dalı
  13. Sayfa Sayısı: 104

Özet

Polifenol oksidaz enzimleri, bakır içeren, oksidoredüktaz sınıfından bir enzim grubudur ve bitkilerde meydana gelen esmerleşme olayından sorumludurlar. Esmerleşme olayı, meyve ve sebzelerin besin değerlerinin düşmesine ve kalite kaybına uğramalarına sebep olmaktadır. Bu durum, ürünlerin raf ömrünün kısalmasına ve ekonomik kayıplara neden olduğu için enzimin inaktivasyonu istenen bir durumdur. Bu çalışmada, farklı amino asitlerin enzim üzerindeki inhibisyon etkileri ile enzim için doğal enzim inhibitörü olma potansiyelleri araştırılmıştır. Çalışmada enzim kaynağı olarak muşmula meyvesi kullanılmıştır. Polifenol oksidaz enzimi, amonyum sülfat çöktürmesi ve diyaliz işlemleri ile kısmi olarak saflaştırılmış ve kinetik sabitleri (Km = 2.5 mM ve Vmax = 12542,46 U) belirlenmiştir. Her amino asit için inhibisyon türleri ve Ki değerleri çizilen Lineweaver-Burk grafikleriyle tespit edilmiştir. IC50 değerleri çizilen doğrusal grafiklerle belirlenmiştir. Substrat olarak katekol kullanılmıştır. İnhibitör olarak kullanılan glisin, L-fenilalanin, L-tirozin, L-sistein, L-serin, L-aspartik asit, L-histidin, L-lizin, L-prolin ve L-metiyonin amino asitleri için IC50 değerlerinin sırasıyla 11.15, 12.43, 5.16, 0.071, 18.13, 12.00, 7.40, 9.71, 3.20 ve 15.00 mM ve Ki değerlerinin de sırasıyla 16.52, 11.20, (2.06 ve 3.48), 0.004, 16.86, (4.48 ve 6.60), 4.37, 7.69, 2.18 ve (5.75 ve 11.86) mM olduğu saptanmıştır. En zayıf ve en güçlü inhibitör etkiye sahip amino asitler sırasıyla L-serin ve L-sisteindir. Amino asitler inhibisyon türlerine göre sınıflandığında glisin, L-fenilalanin, L-prolin, L-serin, L-histidin ve L-lizinin yarışmasız inhibisyon, L-sisteinin yarışmalı inhibisyon ve L-tirozin, L-metiyonin ve L-aspartik asidin ise karışık inhibisyon türlerini gösterdikleri belirlenmiştir. Enzimin, SDS-PAGE tekniği ile molekül ağırlığı için yaklaşık olarak 40 kDa ve 35 kDa olmak üzere iki bant gözlenmiştir. Native-PAGE sonucu 40 kDa ve 70 kDa'da iki bant elde edilmiş ve molekül ağırlıkları 40 ve 70 kDa olan iki izoenzim olabileceği şeklinde yorumlanmıştır.

Özet (Çeviri)

Plant browning is caused by a set of enzymes called polyphenol oxidases, which belong to the copper-containing oxidoreductase class. Fruits and vegetables lose quality and their nutritional value when they are browned. Since this reduces the items' shelf life and results in financial losses, inactivating the enzyme is preferred. In this work, the potential for different amino acids to act as natural enzyme inhibitors for the enzyme and their effects on enzyme inhibition were examined. Medlar fruit was used as enzyme source in the study. By ammonium sulfate precipitation and dialysis, the polyphenol oxidase enzyme was largely purified, and its kinetic constants (Km = 2.5 mM and Vmax = 12542.46 U) were established. The inhibition types and K$_i$ values for each amino acid were determined by plotted Lineweaver-Burk plots. Plotted linear graphs are used to determine the values of the IC50. The substrate used was catechol. The IC$_{50}$ values for the amino acids glycine, L-phenylalanine, L-tyrosine, L-cysteine, L-serine, L-aspartic acid, L-histidine, L-lysine, L-proline and L-methionine used as inhibitors were 11.15, 12.43, 5.16, 0.071, 18.13, 12.00, 7.40, 9.71, 3.20 and 15.00 mM respectively. The Ki values were also found to be 16.52, 11.20, (2.06 and 3.48), 0.004, 16.86, (4.48 and 6.60), 4.37, 7.69, 2.18 and (5.75 and 11.86) mM, respectively. L-serine and L-cysteine are the amino acids that have the weakest and most potent inhibitory effects, respectively. When the amino acids were classified according to inhibition types, glycine, L-phenylalanine, L-proline, L-serine, L-histidine and L-lysine showed uncompetitive inhibition, L-cysteine showed competitive inhibition and L-tyrosine, L-aspartic acid and L-methionine showed mixed inhibition types. The molecular weight of the enzyme was determined by the SDS-PAGE method as two bands, roughly 40 kDa and 35 kDa. Native-PAGE resulted in two bands at 40 kDa and 70 kDa and this result was interpreted as two isoenzymes with molecular weights of 40 and 70 kDa.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    818490

    Muşmula (Mespilus germanica) polifenol oksidaz enziminin saflaştırılması ve karakterizasyonu

    Purification and characterization of medlar (Mespilus germanica) polyphenol oxidase enzyme

    AYŞİN ÇAVDAR

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    BiyokimyaYıldız Teknik Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ ÇİĞDEM BİLEN

    PROF. DR. EMİNE KARAKUŞ

  2. Tez No

    518044

    Sirke üretim prosesinin bazı yabani meyvelerin biyoaktif özelliklerine etkisi

    Effects of vinegar production process on bioactivity of some traditional fruits

    ESMA SEVDE HAYKIR

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2018

    Gıda MühendisliğiYıldız Teknik Üniversitesi

    Gıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. OSMAN SAĞDIÇ

  3. Tez No

    436591

    Musmulanın (Mespilus germanica L.) celikle çogaltılmasi

    Propagation of medlar by cuttings (Mespilus germanica L.)

    ESMA TEZEL

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2016

    ZiraatOrdu Üniversitesi

    Bahçe Bitkileri Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. SAİM ZEKİ BOSTAN

  4. Tez No

    692745

    Gölgede, mikrodalga, konvektif ve kombine mikrodalga-konvektif kurutma yöntemleri kullanılarak kurutulmuş muşmula meyvesinin kurutma kinetiği ve kalite parametreleri açısından incelenmesi

    Investigation of dried medlar fruit in terms of drying kinetics and quality parameters using natural, microwave, convective and combined microwave-convective drying methods

    BEGÜM ARKAİN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2021

    ZiraatBursa Uludağ Üniversitesi

    Biyosistem Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. İLKNUR ALİBAŞ

  5. Tez No

    745293

    Bazı ayva klon anaçlarının muşmulada büyüme, meyve verim ve kalitesi üzerine etkileri

    The effects of some quince clonal rootstocks on growth, yield and fruit quality of medlar

    YAKUP MERT KUL

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    ZiraatOndokuz Mayıs Üniversitesi

    Bahçe Bitkileri Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. AHMET ÖZTÜRK

Geri Dön