İnsan olfaktör mukozadan elde edilen nöral kök hücrelerin dopaminerjik nöron benzeri hücrelere farklılaştırılması
Differentiation of human olfactory mucosa-derived neural stem cells into dopaminergic neuron-like cells
- Tez No: 819375
- Danışmanlar: DR. ÖĞR. ÜYESİ ONUR UYSAL
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Moleküler Tıp, Nöroloji, Tıbbi Biyoloji, Molecular Medicine, Neurology, Medical Biology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2023
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Eskişehir Osmangazi Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kök Hücre Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Kök Hücre ve Doku Yenilenmesi Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: 129
Özet
Başlık: İnsan olfaktör mukozadan elde edilen nöral kök hücrelerin dopaminerjik nöron benzeri hücrelere farklılaştırılması Amaç: Bu tez çalışmasında, in vitro kök hücre izolasyonu yöntemleri gerçekleştirilerek; insan olfaktör mukozadan (iOM) nöral kök hücrelerin izole edilmesi, çoğaltılması ve karakterizasyon analizlerinin gerçekleştirilerek, belirli nörotrofik faktörlerin etkisi altında in vitro ortamda dopaminerjik nöron benzeri hücrelere farklılaştırılması amaçlanmıştır. Yöntem: İnsan olfaktör mukozadan nöral kök hücreler (iO-NKH) izole edilip, karakterizasyonları için immunofenotipik ve MTT analizleri gerçekleştirildi. iO-NKH'ler, 3B kültüre edilerek nörosferik yapılar oluşturuldu. Nörosferlerin karakterizasyon analizleri için immunofenotipik ve nöronal farklılaştırma analizleri gerçekleştirildi. Daha sonra iO-NKH'ler in vitro dopaminerjik nöron benzeri hücrelere farklılaştırıldı. Farklılaştırma analizi sonrası, dopaminerjik nöron benzeri hücrelerin immunofenotipik ve genotipik karakterizasyon analizleri yapıldı. Bulgular: iOM'den NKH izolasyonu gerçekleştirilerek NKH'lere özgü hücre belirteçlerinin (CD56, CD133, SOX2 ve NESTİN) pozitif ekspresyonları gösterildi. Karakterizasyon analizleri için nöronal ve glial yönde farklılaştırılan nörosferlerin, nöronal ve glial hücrelere özgü hücre belirteçleri (TUBB3, GFAP, NG2) immunofloresan işaretleme ile pozitif olarak gösterildi. İn vitro dopaminerjik nörona farklılaştırılan iO-NKH'lerin dopaminerjik nörona özgü protein (TH) ve gen (Dat, TH, Pitx3, Nurr1) ile karakterizasyonu için immunositokimyasal ve qRT-PCR analizleri gerçekleştirildi. Sonuç olarak dopaminerjik nörona özgü proteinin (TH) pozitifliği ve genlerinin (Dat, TH, Pitx3, Nurr1) ekspresyonunun anlamlı ölçüde arttığı gözlendi. Sonuç: Elde edilen sonuçlara göre, nörodejeneratif hastalıklarda hücre replasman tedavilerinde kullanılabilecek, hücre kültürlerine dayanıklı, nöronal ve glial yönde farklılaşma gösteren, elde edilmesi kolay ve az maliyetli nöral kök hücre kaynağı oluşturulabileceği sonucuna ulaşıldı.
Özet (Çeviri)
Title: Differentiation of neural stem cells derived from human olfactory mucosa into dopaminergic neuron-like cells Aim: The aim of this thesis was to isolate neural stem cells from human olfactory mucosa (hOM) by performing in vitro stem cell isolation methods and to differentiate the cultured stem cells into dopaminergic neuron-like cells under the influence of certain neurotrophic factors in vitro by performing cultivation, proliferation and characterization analyses. Methods: Neural stem cells (hO-NCs) were isolated from human olfactory mucosa and immunophenotypic and MTT analyses were performed for their characterization. hO-NCs were cultured in 3D to form neurospheres. Immunophenotypic and neuronal differentiation assays were performed for characterization analyses of neurospheres. Then hO-NSCs were differentiated into dopaminergic neuron-like cells in vitro. After differentiation analysis, immunophenotypic and genotypic characterization analyses of dopaminergic neuron-like cells were performed. Results: Results: Isolation of NSCs from hOM was performed and positive expression of NSCs-specific cell markers (CD56, CD133, SOX2 and NESTIN) was demonstrated. For characterization analyses, neurospheres differentiated in neuronal and glial direction were positively expressed with immunofluorescent labeling of neuronal and glial cell-specific cell markers (TUBB3, GFAP, NG2). Immunocytochemical analysis and RT-PCR analysis were performed for the characterization of hO-NSCs differentiated into dopaminergic neurons in vitro with dopaminergic neuron-specific protein (TH) and gene (Dat, TH, Pitx3, Nurr1). As a result, the positivity of dopaminergic neuron-specific protein (TH) and expression of genes (Dat, TH, Pitx3, Nurr1) were significantly increased. Conclusions: According to the results obtained, it was concluded that a resistant to cell culture, neuronal and glial differentiation, easy to obtain and low-cost neural stem cell source that can be used in cell replacement therapies in neurodegenerative diseases can be created.
Benzer Tezler
- Epidermal büyüme faktör reseptörlerinin fötal olfaktör mukozadaki dağılımının immünohistokimyasal olarak gösterilmesi
Immunohistochemical localizationof epidermal growth factor receptors in fetal olfactor mucosa
ÇİĞDEM ELMAS
Yüksek Lisans
Türkçe
1999
MorfolojiGazi ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. DENİZ ERDOĞAN
- İnsan olfaktör kök hücrelerin izolasyonu kültürünün yapılması karakterizasyonu ve hasar görmüş fasiyal sinirin (ratlarda) rejenerasyonuna etkisinin incelenmesi
Isolation, culture and characterization of human olfactory stem cells and investigation of their effect on regeneration of damaged rat facial nerves
OLGA NEHİR ÖZTEL
Doktora
Türkçe
2014
BiyomühendislikYıldız Teknik ÜniversitesiBiyomühendislik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ADIL ALLAHVERDIYEV
- Olfaktor sistem anatomisinin beyaz cevher diseksiyonutekniği ve anterograd yolak takibi yöntemi ile incelenmesi
Research of olfactory system anatomy BY white matterdissection technique and anterograd tract tracing method
NECATİ TATARLI
Doktora
Türkçe
2022
AnatomiMarmara ÜniversitesiNörolojik Bilimler Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MUSTAFA İBRAHİM ZİYAL
PROF. DR. SAFİYE ÇAVDAR
- Koyun beyninde olfaktör sistem anatomisinin beyaz cevher disseksiyonu tekniği ile gösterilmesi
White matter dissection of olfactory system in sheep
AHMET FATİH ATİK
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2012
AnatomiMarmara ÜniversitesiNöroşirürji Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. AŞKIN ŞEKER
- İnsan püberte sürecinde rol alan yeni bir genin belirlenmesi
Identification of a novel gene taking role in puberty
LEMAN DAMLA KOTAN
Doktora
Türkçe
2014
BiyoteknolojiÇukurova ÜniversitesiBiyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ALİ KEMAL TOPALOĞLU