Zymomonas mobilis levansukraz geninin Lactococcus Lactis konakçısına klonlama çalışmaları
Cloning strategies of Zymomonas mobilis levansucrase gene into Lactococcus lactis expresson host
- Tez No: 829153
- Danışmanlar: DOÇ. DR. BURCU KAPLAN TÜRKÖZ
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Gıda Mühendisliği, Food Engineering
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2023
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Ege Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Gıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Gıda Mühendisliği Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: 126
Özet
Levan ve levan tipi fruktooligosakkaritlerin oluşumunu katalizleyen levansukraz enzimleri (E.C.2.4.1.10) glikozit hidrolazlar (GH68) ailesine ait olan bakteriyel hücre dışı enzimlerdir. Levansukraz enzimi birçok mikroorganizma tarafından üretilebilmektedir. Bu tez çalışmasında Zymomonas mobilis NRRL B-14023 levansukrazının geninin Lactococcus lactis ekspresyon sistemine moleküler klonlanması ve rekombinant üretiminin incelenmesi hedeflenmiştir. Bu amaçla, pLEB825 plazmidine PnisA promotörü altında Z. mobilis levansukraz geni klonlanarak L. lactis hücresine transfer edilmesi için araştırmalar yapılmıştır. Z. mobilis levansukraz geninin pLEB825 plazmidine entegrasyonu için restriksiyon enzim kesimi ve ligasyon reaksiyonları farklı koşullarda denenmiştir. Elde edilen rekombinant plazmidler tez çalışmasında ara konakçı olarak kullanılan transformasyon veriminin daha yüksek olduğu Escherichia coli TG1 hücrelerine aktarılmıştır. Escherichia coli TG1 hücrelerinden izole edilen rekombinant plazmidler ve doğrudan ligasyon karışımları kompeten L. lactis hücrelerine aktarılması için elektroporasyon denemelerine tabi tutulmuştur. Sonuç olarak, bu çalışma Z. mobilis levansukrazının gıdalar için güvenli konakçı sisteminden olan L. lactis ekspresyon sistemine klonlanması için ilk adımları atmayı amaçlamaktadır. Bu araştırma, gelecekte biyoteknoloji ve endüstriyel uygulamalarda levansukraz enzimlerinin üretimi ve kullanımı açısından önemli bir adım olabilir.
Özet (Çeviri)
Levansucrases (E.C.2.4.1.10), which catalyze the formation of levan and levan-type fructooligosaccharides, are bacterial extracellular enzymes belonging to the family of glycoside hydrolases (GH68). Levansucrase enzyme can be produced by many microorganisms. In this thesis, it was aimed to investigate the molecular cloning and recombinant production of Zymomonas mobilis NRRL B-14023 levansucrase in Lactococcus lactis expression system. In the recombinant production studies of the enzyme, the cloning of the gene region encoding the Z. mobilis NRRL B-14023 levansucrase protein into the plasmid pLEB825 under the PnisA promoter and the resulting recombinant plasmids were transferred to L. lactis NZ9000 cells was investigated. For that purpose, different conditions were investigated in the restriction enzyme and ligation reactions of the Z. mobilis levansucrase gene and the pLEB825 plasmid. The recombinant plasmids obtained were transferred into Escherichia coli TG1 cells with higher transformation efficiency, which were used as intermediate hosts in the thesis study. Electroporation experiments were performed to transfer the obtained recombinant plasmids to competent L.lactis cells. In conclusion, it has been reported the investigation of the cloning and recombinant production of Z.mobilis levansucrase in L. lactis expression system, which has recently emerged as a promising host for the production of recombinant proteins. This research represents an important advancement in the production and utilization of levansucrase enzymes in future biotechnology and industrial applications.
Benzer Tezler
- Zymomonas mobilis ile levansukraz enziminin üretimi ve saflaştırılması
Production and purification of levansucrase enzyme by Zymomonas mobilis
ÖZLEM ERDAL
Yüksek Lisans
Türkçe
2016
Gıda MühendisliğiEge ÜniversitesiGıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MEHMET YEKTA GÖKSUNGUR
- Zymomonas mobilis'ten elde edilen levansukraz enzimi ile fruktooligosakkarit üretimi ve elde edilen ürünün püskürtmeli kurutucuda kurutulması
Zymomonas mobilis'ten elde edilen levansukraz enzimi ile fruktooligosakkarit üretimi ve elde edilen ürünün püskürtmeli kurutucuda kurutulmasi
MİTHAT KURBAN
Yüksek Lisans
Türkçe
2013
Bilim ve TeknolojiEge ÜniversitesiGıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. M.YEKTA GÖKSUNGUR
PROF. DR. ŞEBNEM TAVMAN
- Zymomonas mobilis ile levan üretimi ve üretim parametrelerinin optimizasyonu
Production of levan by Zymomonas mobilis and optimization of process parameters
MEHMET SELİM ŞILBIR
Yüksek Lisans
Türkçe
2013
BiyoteknolojiEge ÜniversitesiGıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MEHMET YEKTA GÖKSUNGUR
- Zymomonas mobilis levansukrazının üretimi, saflaştırılması ve kristalizasyonu
Production, purification and crystallisation of Zymomonas mobilis levansucrase
GÜLER SÖZGEN
Yüksek Lisans
Türkçe
2019
Gıda MühendisliğiEge ÜniversitesiGıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ BURCU KAPLAN TÜRKÖZ
- Zymomonas mobilis NRRL B-14023 bakterisi ile şeker pancarı melası ve kuru üzümden etanol üretimi
Başlık çevirisi yok
ÜLKÜ BAŞER