Desellülerize dental pulpa ve gelma doku iskelelerinin apikal papilla kök hücrelerinin rejeneratif potansiyeli üzerine etkisinin değerlendirilmesi
Evaluation of the effect of decellularized dental pulp and gelma tissue scaffolds on the regenerative potential of apical papilla stem cells
- Tez No: 939790
- Danışmanlar: DOÇ. DR. FUNDA ÇAĞIRIR DİNDAROĞLU
- Tez Türü: Diş Hekimliği Uzmanlık
- Konular: Diş Hekimliği, Dentistry
- Anahtar Kelimeler: apikal papilla kök hücresi (APKH), desellülerize dental pulpa (DDP), jelatin metakrilat (GelMA), rejeneratif endodontik tedavi (RET), apical papilla stem cell (SCAP), decellularised dental pulp (DDP), gelatin methacrylate (GelMA), regenerative endodontic treatment (RET)
- Yıl: 2025
- Dil: Türkçe
- Üniversite: İzmir Katip Çelebi Üniversitesi
- Enstitü: Diş Hekimliği Fakültesi
- Ana Bilim Dalı: Çocuk Diş Hekimliği Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Amaç: Bu çalışmada; liyofilize desellülerize dental pulpa (DDP) ve jelatin metakrilat (GelMA) hidrojel doku iskelelerinin; apikal papilla kök hücrelerinin (APKH) rejeneratif potansiyeli üzerine etkisini incelemek ve pulpa-dentin benzeri doku oluşumuna etkisini karşılaştırmak amaçlandı. Gereç ve Yöntem: APKH, 14-18 yaş aralığındaki sağlıklı hastaların çekilmiş gömülü immatür üçüncü büyük azı dişlerinin apikal papillalarından (n=18) eksplant/mekanik ayrıştırma yöntemi ile izole edildi. DDP, ortodontik nedenlerle çekilmiş tek köklü küçük azı dişlerinden (n=18), Triton X-100 ve SDS içeren kimyasal desellülerizasyon protokolü ile elde edildi. DDP örnekleri, liyofilize edilerek histolojik ve immünohistokimyasal boyamalar, SEM analizi, protein içeriği ve rezidüel DNA ölçümleri ile karakterize edildi. %10 (w/v) GelMA ve %0,5 (w/v) Irgacure 2959 karıştırılarak Omnicure S2000 cihazı ile fotopolimerizasyon gerçekleştirildi. APKH'ler; odontojenik farklılaşma ortamındaki GelMA hidrojel ve liyofilize DDP doku iskelelerine ekilerek 7, 14, 21. günlerde pulpa-dentin benzeri doku oluşumu; hematoksilen & eozin, masson trikrom ve immünohistokimyasal (dentin matriks proteini-1, dentin sialofosfoprotein, alkalen fosfataz) boyamalar kullanılarak ışık mikroskobu ile değerlendirildi. Gruplar arasındaki farklılıkların değerlendirilmesi için tek yönlü varyans analizi (One-way ANOVA) ve bağımsız örneklem t-testi (Student's t test) kullanıldı. Bulgular: Liyofilize DDP'nin tek başına uygulandığı gruba kıyasla, GelMA hidrojel ile kombine edildiğinde hücre canlılığında istatistiksel olarak anlamlı bir artış gözlemlendi (p<0,05). Tüm doku iskelesi gruplarında, DSPP, DMP-1 ve ALP skorlamaları açısından, kontrol grubu ve 14. gün arasında istatistiksel olarak anlamlı bir fark tespit edilemezken (p>0,05), 21. günde 14. güne kıyasla istatistiksel olarak anlamlı derecede artış olduğu tespit edildi (p<0,05). 21. günde, liyofilize DDP-GelMA hidrojel grubunda en yüksek ve GelMA grubunda ise en düşük seviyede ölçüldüğü rapor edildi (p<0,05). Sonuç: Liyofilize DDP ve GelMA hidrojel doku iskelelerinin birlikte kullanımı; APKH'lerin canlılığını, farklılaşmasını ve pulpa-dentin benzeri doku oluşumunu desteklemekledir. GelMA hidrojeli rejeneratif endodontik tedavi (RET) prosedüründe pulpa rejenerasyonu için liyofilize DDP'ye alternatif olarak kullanılabilir. Ancak daha öngörülebilir ve klinik olarak uygulanabilir bir doku iskelesi geliştirmek için ileri klinik araştırmalara ihtiyaç vardır.
Özet (Çeviri)
Objective: The aim of this study was to investigate the effect of lyophilized decellularised dental pulp (DDP) and gelatin methacrylate (GelMA) hydrogel scaffolds on the regenerative potential of apical papilla stem cells (SCAPs) and to compare their effect on pulp-dentin-like tissue formation. Material and Method: SCAPs were isolated from the apical papilla of extracted impacted immature third molars (n=18) of healthy patients aged 14-18 years by explant/mechanical separation method. DDP was obtained from single-rooted premolars (n=18) extracted for orthodontic reasons by chemical desellularisation protocol containing Triton X-100 and SDS. DDP samples were lyophilised and characterised by histological and immunohistochemical staining, SEM analysis, protein content and residual DNA measurements. 10% (w/v) GelMA hydrogel and 0.5% (w/v) Irgacure 2959 were mixed and photopolymerisation was performed with Omnicure S2000 device. SCAPs were seeded on GelMA hydrogel and lyophilized DDP tissue scaffolds in odontogenic differentiation medium and pulp-dentin-like tissue formation was evaluated by light microscopy using haematoxylin & eosin, masson trichrome and immunohistochemical (dentin matrix protein-1, dentin sialophosphoprotein, alkaline phosphatase) staining on days 7, 14, 21. One-way analysis of variance (One-way ANOVA) and independent sample t-test (Student's t test) were used to evaluate the differences between the groups. Results: A statistically significant increase in cell viability was observed when combined with GelMA hydrogel compared to the group in which lyophilized DDP was applied alone (p<0.05). In all scaffold groups, there was no statistically significant difference between the control group and day 14 in terms of DSPP, DMP-1 and ALP scores (p>0.05), while a statistically significant increase was detected on day 21 compared to day 14 (p<0.05). On day 21, it was reported that the highest level was measured in the DDP-GelMA hydrogel group and the lowest level in the GelMA group (p<0.05). Conclusion: The combined use of lyophilized DDP and GelMA hydrogel scaffolds promotes the viability and differentiation of SCAPs and the formation of pulp-dentin-like tissue. GelMA hydrogel can be used as an alternative to lyophilized DDP for pulp regeneration in regenerative endodontic treatment (RET) procedure. However, further clinical research is needed to develop a more predictable and clinically applicable scaffold.
Benzer Tezler
- Biyomalzeme kullanımına yönelik sığır sıs deselülerizasyonu ve sıçanlarda kritik boyutlu tam kalınlık yara iyileşme modelinde etkinliğinin değerlendirilmesi
Decellularization of bovine sis for biomaterial use and assessment of efficacy in a rat critical-size full-thickness wound repair model
MAHMUT PARMAKSIZ
- Tendon hücreleri kullanılarak hazırlanan allograftların sıçan aşil tendonu rejenerasyonu üzerindeki etkilerinin araştırılması
Investigation of the effects of allografts contstructed with tendon cells on rat achilles tendon regeration
CANSIN GÜNGÖRMÜŞ
- Simvastatin loaded porous hydroxyapatite based microcarriers for bone tissue engineering
Kemik doku mühendisliği uygulamalarına yönelik simvastatin yüklü gözenekli hidroksiapatit temelli mikrotaşıyıcılar
MERVE GÜLDİKEN
Yüksek Lisans
İngilizce
2014
BiyoteknolojiOrta Doğu Teknik ÜniversitesiBiyoteknoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. AYŞEN TEZCANER
PROF. DR. CANER DURUCAN
- Kalp dokusu kaynaklı biyomalzemelerin geliştirilmesi ve hücre kültürlerinde kullanılması
Development of cardiac tissue-based biomaterials and their use in cell cultures
HATİCE ERCAN
- Development of vascularized adipose tissue construct based on adipose tissue extracellular matrix and silk fibroin
Yağ dokusu hücredışı matriksi ve ipek fibroininden damarlı adipoz doku konstrüktü geliştirilmesi
ALİŞAN KAYABÖLEN
Yüksek Lisans
İngilizce
2015
BiyomühendislikOrta Doğu Teknik ÜniversitesiBiyomedikal Mühendisliği Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. AYŞEN TEZCANER
DOÇ. DR. FATİH ZOR
