Geri Dön

Establishment of induced pluripotent stem cell-derived white adipose tissue spheroid culture as a model system

Bir model sistem olarak indüklenmiş pluripotent kök hücre kaynaklı beyaz yağ doku sferoid kültürünün eldesi

  1. Tez No: 940163
  2. Yazar: ÖZÜM BEGÜM BÖKE
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. AYŞEGÜL DOĞAN
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyoteknoloji, Biotechnology
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2024
  8. Dil: İngilizce
  9. Üniversite: Yeditepe Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 113

Özet

Adipoz doku, memelilerde bulunan sinir ağı ile çevrilmiş bağ dokulardan birisi olup enerji depolamadaki rolü ile bilinir. Enerji depolamanın yanında, adipoz doku bağışıklık savunması, hormon salgılanması, mekanik destek sağlanması ve termogenez gibi görevlerde de yer almaktadır. Karmaşık yapısı göz önünde bulundurulduğunda, dokunun in vitro modellenmesi, adipogenez ve adipoz doku ile ilişkili hastalıkların mekanizmalarının anlaşılmasında önemli rol oynamaktadır. Bu tezde, bir model sistem olarak indüklenmiş pluripotent kök hücre (iPSC) kaynaklı nöromezodermal progenitörler kullanılarak beyaz yağ doku (WAT) sferoid kültürü başarıyla oluşturulmuştur. iPSC ve iPSC kökenli NMP' ler moleküler özelliklerine göre karakterize edildikten sonra grubumuz tarafından geliştirilen uygun farklılaşma protokolü uygulanarak WAT sferoid kültürü elde edilmiştir. Olgun WAT sferoidleri, morfolojik yapıları, histolojik özellikleri, lipid birikim kapasiteleri, protein ifadesi, hücresel canlılık, lipid içeriği, gen ifadesi ve ultrayapısal özellikleri bakımından detaylı bir şekilde karakterize edilmiştir. Bunula beraber, olgun WAT sferoidlerinin koşullandırılmış besiyeri (CM) de transmisyon elektron mikroskobu ve trigliserit içeriği kullanılarak karaterize edilmiştir. Sonuçlara göre, CM içerisinde ekstraselüler vezikül benzeri yapılar bulunmaktadır ve CM yüksek seviyede trigliserit içermektedir. WAT Sferoid CM' nin fonksiyonel etkilerini değerlendirmek içinde β-TC-6 ve ASC52-telo hücreleri CM ile muamele edilmiştir. Verilere göre CM takviyesi β-TC-6 hücrelerinin insulin salgısını arttırırken ASC52-telo hücrelerinin adipogenez sürecine kayda değer bir değişikliğe sebep olmamıştır. Son olarak sferoidler lipolizi indükleyen olan lityum klorür (LiCl) ile muamele edilmiştir fakat dikkate değer bir sonuç elde edilememiştir. Sonuç olarak bu çalışma ilk kez iPSC türevli WAT sferoidlerinin başarıyla üretildiğini göstermekte ve hem sferoidlerin hem de onların salgıladığı moleküllerin detaylı karakterizasyonunu sunarak adipöz doku araştırmaları için önemli bilgiler sağlamaktadır.

Özet (Çeviri)

Adipose tissue is one of the innervated specialized connective tissues found in mammals and is primarily known for its role in energy storage. Apart from energy storage, the functions of adipose tissue also include thermogenesis, immune defense, hormone secretion, and mechanical support. Due to its complex nature, modeling the adipose tissue in vitro plays a tremendous role in further deciphering the mechanisms behind the diseases and adipogenesis process. Here in this thesis, induced pluripotent stem cell (iPSC)-derived white adipose tissue spheroid culture as a model system was successfully established. After iPSCs and iPSC-derived neuromesodermal progenitors (NMPs) were characterized according to their molecular features, white adipose tissue (WAT) spheroids were generated using the appropriate differentiation protocol developed by our group. Then, mature WAT spheroids were characterized according to morphological structure, histological features, lipid accumulation capacities, protein expression, cellular viability, lipid content, relative mRNA expression, and ultrastructural features. After the characterization, the conditioned medium (CM) of the mature WAT spheroids was also characterized by transmission electron microscope and triglyceride content. According to the results, extracellular vesicle-like structures were detected in the CM of mature WAT spheroids alongside the high levels of triglyceride content. To further evaluate the effects of mature WAT spheroid CM as an indicator of functional adipose tissue, β-TC-6, and ASC52-telo cells were treated with the CM. The data showed that the CM supplementation to β-TC-6 cells increased insulin secretion, while no significant alternations were observed in terms of adipogenesis in ASC52-telo cells. As a last step, the response of mature WAT spheroids to LiCl, which is a lipolysis-inducing agent, was evaluated. Overall, the findings of this thesis highlight the generation of iPSC-derived WAT spheroids for the first time in literature as far as is known and the detailed characterization of both the spheroids and their secretome.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    783430

    Regulatory role of aplnr signaling in migration and differentiation of mesoderm tissue and mesenchymal stem cells

    Aplnr sinyalinin mesoderm doku ve mezenkimal kök hücre farklılaşmasındaki ve migrasyonundaki düzenleyici rolü

    HATİCE BURCU ŞİŞLİ

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2023

    BiyomühendislikYeditepe Üniversitesi

    Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. AYŞEGÜL DOĞAN

  2. Tez No

    654465

    CCl4 ile oluşturulan deneysel akut hepatittemezenkimal kök hücre infüzyonununetkinliğinin ve hepatosite farklılaşmasınındeğerlendirilmesi

    The evaluation of mesenchymal stem cellinfusion efficacy and hepatocytedifferentiation in experimentalCCl4 induced acute hepatitis

    ÖZLEN BEKTAŞ

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2006

    GastroenterolojiKaradeniz Teknik Üniversitesi

    İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. DOĞAN YUSUF UZUN

  3. Tez No

    944151

    Burdur Mehmet Akif Ersoy Üniversitesi Veteriner Fakültesi öğrencilerinde self servis işitme taraması ve gürültüye bağlı işitme kaybı farkındalığının değerlendirilmesi

    Evaluation of self-service hearing screening and awareness of noise-induced hearing loss among students of Burdur Mehmet Akif Ersoy University Faculty of Veterinary Medicine

    DERYA KOCA

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2025

    FizyolojiBurdur Mehmet Akif Ersoy Üniversitesi

    Fizyoloji (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ÖZKAN ŞİMŞEK

  4. Tez No

    137968

    B6 vitamininin AGE oluşumu üzerine etkilerinin, STZ diabetik deneysel hayvanlarının böbrek dokularında incelenmesi

    Effects of vitamin B6 on formation of AGE in renal tissues of STZ induced diabetik rats

    SUAT HAYRİ KÜÇÜK

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2003

    Biyokimyaİstanbul Üniversitesi

    Biyokimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. GÜLDEN BURÇAK

  5. Tez No

    911592

    Sera gazı emisyonu azaltılmasında karbon ticaretinin rolü

    The effect of the emission trade on reduction of greenhouse gas emissions

    HASAN UZATICI

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2024

    Çevre MühendisliğiGebze Teknik Üniversitesi

    Çevre Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. NİHAL BEKTAŞ

Geri Dön