Geri Dön

Targeting the promoter of the cell division cycle 20 (CDC20) gene to develop oncolytic adenoviruses for cancer therapy

Hücre bölünme döngüsü 20 (CDC20) geninin promotörünü hedef alarak kanser tedavisi için onkolitik adenovirüsler geliştirilmesi

  1. Tez No: 961995
  2. Yazar: BİLGİ ERBAY
  3. Danışmanlar: PROF. DR. GEORGE ERIC BLAIR
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Biyoloji, Biology
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2022
  8. Dil: İngilizce
  9. Üniversite: University of Leeds
  10. Enstitü: Yurtdışı Enstitü
  11. Ana Bilim Dalı: Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 363

Özet

Cerrahi, radyoterapi ve kemoterapideki ilerlemelere rağmen, çoğu kanser hastasının seyri kötüleşmeye devam etmektedir. Kanser olgularının yaklaşık %50'si mutant p53 genine sahiptir. P53'teki mutasyon, transkripsiyon faktörü işlevinin kaybına ve kontrolsüz hücre bölünmesine ve karsinogeneze yol açmaktadır. Bu nedenle, kanser hücrelerinde p53 yolaklarını hedefleyen terapötik stratejilerin geliştirilmesi kanser tedavisi için faydalı olabilmektedir. İnsan hücre bölünme döngüsü 20 (CDC20) geni p53 tarafından transkripsiyonel olarak baskılanmaktadır. CDC20 proteini, hücre döngüsünün G2'den M fazına geçişinin düzenlenmesinde rol oynamaktadır. CDC20 geninin birçok kanserde upregüle olduğu bildirilmiştir. Bu nedenle, gen bazlı kanser tedavilerinin geliştirilmesi amacıyla CDC20 promotör elemanlarının kullanılması, p53-negatif kanserleri ortadan kaldırmak için yeni bir strateji sağlayabilmektedir. Onkolitik Adenovirüsler kanser tedavisi için umut verici bir yaklaşım sunmaktadır. Çalışmada, Adenovirüs early E1A promotörünün, 200bp veya 1000bp CDC20 promotörü elemanları ile değiştirildiği iki onkolitik Adenovirüs geliştirilmiştir. Bu rekombinant virüsler, virüsün hücre tropizmini genişletmek için Ad5 fibresinin Ad35 fibresiyle değiştirildiği kimerik bir Adenovirüs (Ad5/F35) kullanılarak üretilmiştir. Bu Adenovirüslerin p53 pozitif veya sağlıklı hücreler üzerinde azaltılmış sitotoksik etkileri ve p53-negatif kanser hücrelerini seçici olarak öldürüp öldüremeyeceğinin keşfedilmesi amaçlanmıştır. Geliştirilen bu iki yeni onkolitik Adenovirüsün seçici replikasyon ve hücre öldürme yetenekleri iki izojenik kanser hücre dizisi (HCT116-p53+/+ ve HCT116-p53-/-) üzerinde belirlenmiştir. Monolayer (2D) ve birlikte kültüre edilmiş üç boyutlu (3D) hücre sistemlerinde Ad5/F35-CDC20(1000) rekombinant virüsü HCT116-p53+/+ hücrelerine ve kanser olmayan hücrelere (MCF-10A, MRC5) kıyasla HCT116-p53-/- hücrelerinde yaklaşık iki kat artmış replikasyon ve hücre öldürme kabiliyeti göstermiştir. Ad5/F35-CDC20(200) virüsü de HCT116-p53-/- hücrelerinde önemli ölçüde replikasyon ve hücre öldürme yeteneği göstermiştir. Ayrıca, her iki onkolitik Adenovirüs de, iki boyutlu hücre sistemlerinde p53-pozitif akciğer kanseri hücrelerine (A549) kıyasla p53-negatif akciğer kanseri hücrelerinde (H1299) daha fazla öldürme ve replikasyon kabiliyeti göstermiştir.

Özet (Çeviri)

Despite advances in surgery, radiotherapy and chemotherapy, the outlook for many patients with common cancers remains poor. Approximately 50% of cancers have a mutant p53 gene. Mutation in p53 leads to loss of transcription factor function and uncontrolled cell division and carcinogenesis. Therefore, therapeutic strategies that target p53 pathways in cancer cells may be of benefit in cancer therapy. The human cell division cycle 20 (CDC20) gene is transcriptionally repressed by p53. Its protein product is involved in the regulation of the G2 to M phase transition of the cell cycle and is upregulated in many cancers. Therefore, use of CDC20 promoter elements to drive gene-based cancer therapies may provide a new strategy to eradicate p53-negative cancers. Oncolytic Adenoviruses offer a promising approach to cancer treatment. Here we designed two oncolytic Adenoviruses in which the viral immediate early E1A promoter was replaced by 200bp or 1000bp elements of the CDC20 promoter. These recombinant viruses were generated from a chimeric Adenovirus type 5 and type 35 (Ad5/F35), in which the Ad5 fibre was replaced with that of Ad35 to expand the cell tropism of the virus. It is aimed to discover whether these Adenoviruses can selectively kill p53-negative cancer cells with reduced cytotoxic effects on p53-positive or non-cancer cells. Selective replication and cell killing abilities of the two novel oncolytic Adenoviruses were determined on two isogenic cancer cell lines (HCT116+/+ and HCT116-/-). In two-dimensional and in co-cultured three-dimensional cell systems, Ad5/F35-CDC20(1000) showed approximately two-fold increased replication and cell killing ability in HCT116-/- cells compared to HCT116+/+ cells and non-cancer cells (MCF-10A, MRC5). Ad5/F35-CDC20(200) also showed significant replication and cell killing in HCT116-p53-/-. Also, the two oncolytic Adenoviruses indicated increased killing and replication ability on p53-negative lung cancer cells (H1299) compared to p53-positive lung cancer cells (A549) in two-dimensional cell systems.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    817604

    The quest for better cancer therapies:Identification of transcription factor involvement in ATP7B regulation via dCas9-Apex2 (Caspex), TOX4 as a potential regulator of Cisplatin resistance

    Cisplatin direncini aşma arayışı: ATP7B düzenlemesinde transkripsiyon faktörlerinin dCas9-Apex2 (Caspex) Aracılığıyla Belirlenmesi ve Cisplatin Direncinde Bir Düzenleyici Olarak TOX4'ün tanımlanması

    BATUHAN ALTAY

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2023

    BiyolojiKoç Üniversitesi

    Hücresel ve Moleküler Tıp Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. CEYDA AÇILAN AYHAN

    DOÇ. DR. NATHAN ALLAN LACK

  2. Tez No

    852607

    Kekik yağının mide kanserindeki antikanser rolünün epigenetik açıdan değerlendirilmesi

    Epigenetic evaluation of thyme oil anticancer effect in gastric cancer

    FATMA SÖĞÜTLÜ

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    Tıbbi BiyolojiEge Üniversitesi

    Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. ÇIĞIR BİRAY AVCI

  3. Tez No

    355346

    Characterization and promoter identification of metastasis associated protein 1 in human colorectal carcinoma cell lines

    Metastasis associated protein 1' in kolorektal kanser hücre hatlarında karakterizasyonu ve promotor belirlenmesi

    SEDA TUNÇAY ÇAĞATAY

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2014

    BiyolojiOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Biyoloji Bölümü

    DOÇ. DR. SREEPARNA BANERJEE

  4. Tez No

    375114

    DNA metiltransferaz ve metil bağlayan bölge proteinlerini hedefleyen miRNA gen polimorfizmlerinin akciğer kanseri ile ilişkisinin belirlenmesi

    Determination of association between polymorphisms of miRNA genes targeting dna methyltransferases and methyl binding proteins with lung cancer

    CANSU ÖZBAYER

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2014

    Tıbbi BiyolojiEskişehir Osmangazi Üniversitesi

    Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. İRFAN DEĞİRMENCİ

  5. Tez No

    632234

    Investigation of proteins associated with circadian rhythms using CRISPR-CAS9 technology and proximity labeling

    CRISPR-CAS9 teknolojisi ve yakınlık etiketlendirmesi kullanılarak sirkadiyen ritim ile ilgili proteinlerin incelenmesi

    FATMA YILMAZ

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2020

    BiyolojiGebze Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. NURİ ÖZTÜRK

Geri Dön