Geri Dön

Büyüme hormonunun SMN2 gen ekspresyonu üzerindeki etkisinin araştırılması

Determination of the effect of gh on SMN2 gene expression

PDF İndir

  1. Tez No: 975937
  2. Yazar: DİLARA YÜCEDAL
  3. Danışmanlar: PROF. DR. AHMET ARMAN
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Genetik, Nöroloji, Genetics, Neurology
  6. Anahtar Kelimeler: Spinal musküler atrofi, İnsan büyüme hormonu, Spinal muscular atrophy, Human growth hormone
  7. Yıl: 2025
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Marmara Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Tıbbi Genetik Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

Amaç: Spinal Müsküler Atrofi (SMA), survival motor nöron (SMN) proteininin yokluğu veya yetersizliğinden kaynaklanan nörodejeneratif hastalıktır. SMN proteini, %100 fonksiyonel üreten SMN1 ve yalnızca %10 fonksiyonel üreten SMN2 genlerinden sentezlenir. SMN1 genindeki delesyon veya mutasyon yetersiz protein üretimi ile sonuçlanır ve hastalık kendini gösterir. SMN2 kopya sayısının hastalığın klinik şiddeti üzerinde etkisi olduğu bilinmektedir. SMN2 gen ekspresyon seviyelerinin artırılması SMA için potansiyel bir tedavi olarak ortaya çıkmıştır. Bu çalışmada, Çin hamster yumurtalık (CHO) hücrelerinde raportör kullanarak büyüme hormonunun (GH) SMN2 promotör aktivitesi üzerindeki etkisi incelenmiştir. Gereç ve Yöntem: Bu çalışmada, GH'ye yanıt veren raportör yapının gen ifadesine etkisini incelemek için SMN2 geninin üç promotör bölgesi (588 bp, 1,036 bp ve 1,705 bp uzaklıkta) kullanılmıştır. Bu bölgeler spesifik SMN2 primerleri ile Polimeraz Zincir Reaksiyonu (PCR) ile çoğaltılmıştır. SMN2 promotör PCR ürünleri T4 DNA ligaz ile promotörsüz Promega Lusiferaz Raportör Vektör 3 (pGL3)'e klonlanmış ve DH5α hücrelerine transforme edilmiştir. Pozitif koloniler koloni PCR ile ve plazmidlerdeki SMN2 promotör insertleri SMN2 spesifik primerlerle PCR ile doğrulanmıştır. Plazmidler CHO hücrelerine transfekte edilmiştir. Lusiferaz genini uyaran SMN2 promotörünü ifade eden CHO hücreleri 24 saat boyunca büyüme hormonu ile muamele edilmiş ve ardından CHO hücrelerinin lusiferaz aktivitesi ölçülmüştür. Bulgular: SMN2 promotörleri içeren tüm raportör yapılar büyüme hormonuna yanıt vermiştir. Büyüme hormonu, 1,036 bp SMN2 promotörüne sahip raportör yapı içeren lusiferaz genini indüklemiştir ve bu bölgede yüksek düzeyde gen ekspresyonu gerçekleşmiştir. Ancak, büyüme hormonu ile muamele edilen ve insert içermeyen plazmid ile karşılaştırıldığında, büyüme hormonunun 1,705 bp SMN2 promotörüne sahip lusiferaz geninin gen ekpreyonunu baskıladığı görülmüştür. Sonuç: Bu bulgular, büyüme hormonunun hSMN2 ifadesini hSMN2 promotörüne bağlı bir şekilde modüle edebileceğini önermektedir. GH, hSMN2 ifadesini artırarak SMA tedavisi için potansiyel bir hormon adayı olabilir.

Özet (Çeviri)

Objective: Spinal Muscular Atrophy (SMA) is a neurodegenerative disease caused by the absence or deficiency of the survival motor neuron (SMN) protein. SMN protein is synthesized from two genes: SMN1, which produces 100% functional protein, and SMN2, which produces only about 10% functional protein. Deletions or mutations in the SMN1 gene result in insufficient protein production and disease onset. The copy number of SMN2 is known to influence the clinical severity of SMA. Increasing SMN2 gene expression has emerged as a potential therapeutic approach for SMA. In this study, the effect of growth hormone (GH) on SMN2 promoter activity was investigated using a reporter system in Chinese hamster ovary (CHO) cells. Materials and Methods: To examine the effect of a GH-responsive reporter construct on gene expression, three promoter regions of the SMN2 gene (located 588 bp, 1.036 bp, and 1.705 bp upstream) were used. These regions were amplified by Polymerase Chain Reaction (PCR) with specific SMN2 primers. The PCR products of SMN2 promoters were cloned into the promoterless Promega Luciferase Reporter Vector 3 (pGL3) using T4 DNA ligase and transformed into DH5α cells. Positive colonies were identified by colony PCR, and SMN2 promoter inserts in the plasmids were confirmed by PCR with SMN2-specific primers. The plasmids were then transfected into CHO cells. CHO cells expressing the SMN2 promoter driving luciferase were treated with GH for 24 hours, after which luciferase activity was measured. Results: All reporter constructs containing SMN2 promoters responded to GH. GH induced the highest level of gene expression luciferase gene for the reporter construct containing the 1.036 bp SMN2 promoter, however, GH suppressed gene expression of luciferase gene for 1.705 bp SMN2 promoter vector when compared to the gene expression of reporter plazmid alone with GH. Conclusion: These findings suggest that growth hormone (GH) can modulate hSMN2 expression in hSMN2 promoter dependent manner. GH may be candidate hormone for SMA treatment by enhancing hSMN2 expression.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    845517

    Kuraklık stresi uygulanan karpuz (Citrillus lanatus (Thunb.) Mansf.) bitkisine giberellik asit (GA3) hormonu uygulamasının etkilerinin araştırılması

    Investigation of the effects of giberalic acid hormone application on watermeon (Citrillus lanatus L.) plant applied to drought stress

    ÖMER KAYMAZ

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    ZiraatVan Yüzüncü Yıl Üniversitesi

    Bahçe Bitkileri Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. FİKRET YAŞAR

  2. Tez No

    33423

    Büyüme hormonunun sıçan overinde Follikülogenesis'e ve ovulasyona etkisi

    The Effect of growth hormone on folliculogenesis and ovulation in rat ovarium

    TANFER TOPARLAK

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    1995

    Tıbbi Biyolojiİstanbul Üniversitesi

    Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. SELMA YILMAZER

  3. Tez No

    80007

    Büyüme hormonunun (rbST) ineklerde süt verimine, sütün kompozisyonuna ve hayvan sağlığı üzerine etkisinin incelenmesi

    Studies on the effect of growth hormone (rbST) on milk yield, milk composition and health of dairy cows

    İSMAİL ABAŞ

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    1999

    Veteriner Hekimliğiİstanbul Üniversitesi

    Hayvan Besleme ve Beslenme Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    PROF.DR. HAYDAR ÖZPINAR

  4. Tez No

    639919

    Büyüme hormonunun parkinson hücre modellemesi üzerinde terapötik ve koruyucu etkisinin incelenmesi

    Investigation of therapeutic and protective effects of growth hormone on parkinson's cell modeling

    KADİR SİNAN ARSLAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2020

    Tıbbi BiyolojiMarmara Üniversitesi

    Tıbbi Genetik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. AHMET ARMAN

  5. Tez No

    33121

    İnsan büyüme hormonunun yara iyileşmesine hitopatolojik etkisini inceleyen deneysel bir çalışma

    Başlık çevirisi yok

    EMRE ERAN

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    1995

    Çocuk Sağlığı ve Hastalıklarıİstanbul Üniversitesi

    Çocuk Cerrahisi Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. NUR DANİŞMEND

Geri Dön