Toksik proteinlere karşı antikor üretimi için farklı immünizasyon protokollerinin etkinliğinin belirlenmesi
Determining the effectiveness of different immunization protocols for antibody production against toxic proteins
- Tez No: 976759
- Danışmanlar: PROF. DR. TAMER YAĞCI, DR. BERTAN KORAY BALCIOGLU
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Mikrobiyoloji, Biyoteknoloji, Microbiology, Biotechnology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2020
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Gebze Teknik Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Bu çalışmada Clostridium botulinum bakterisinin ürettiği botulinum/A toksini ile Ricinus communis bitkisinin ürettiği risin toksinlerine karşı tedavide kullanılmak üzere antikor geliştirme çalışmalarında kullanılmak üzere, bu toksinlere karşı immün farelerin geliştirilmesi amaçlanmıştır. Çok düşük miktarları dahi yüksek toksisiteye sahip olan toksinlerin, ölümcül dozları oldukça düşüktür. Farelerde risin toksini için inhalasyon medyan ölümcül dozu (LD50) 3-5 ug/kg iken, oral doz (LD50) 20 mg/kg'dır. Bu miktar botinum için çok daha düşük olup, BoNT /A için medyan ölümcül doz (LD50) ~ 0,2 ng/kg'dır. Bu toksinler,Hastalık Kontrol ve Önleme Merkezi (CDC) tarafından belirlenen tehlike arz eden toksinler listesine göre, botulinum toksini kategori A, risin toksini ise B kategorisinde yer almaktadır. Botulinum toksinine karşı immün kütüphane geliştirmek için fareler bont/A toksininin antijenik özellik gösterdigi düşünülen B1, B4, B5, B7 ve B9 peptitleri ile immünize edilmiştir. Risin toksinine karşı immünize kütüphane geliştirmek için ise fareler, risin toksin B altbirimi (RTB) geni klonlanmış DNA aşı vektörü olan pVAC1 ile immunize edilmiştir.Botulinum toksini peptitleri hazır olarak alınıp 3 farklı fare ırkına (BALB/C, CD1 ve C57/BL6) immünizasyon yapılmıştır.Risin toksini ise BALB/c fare ırkında immünizasyon için kullanılmıştır. İmmünizasyonların testi“Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay”ile yapılmıştır. Eliza testinde B peptitlerinin immünizasyon kontrolü, immünizasyonda kullanılan peptitlerin kullanımı ile yapılmıştır. RTB için ise Pet30a ekspresyon vektörüne klonlanıp rosetta bakteri hattında üretilip, saflaştırılan RTB proteinleri kullanılmıştır.
Özet (Çeviri)
In this study, it was aimed to develop immune mice against these toxins for use in antibody development studies for use in the treatment against botulinum type /A toxin produced by Clostridium botulinum bacteria and risin toxins produced by Ricinus communis plant that have high toxicity even in very low amounts, lethal doses are quite low. The median lethal dose (LD50) of inhalation for ric in toxin in mice is 3 5 µg / kg, while the oral dose is LD50 20 mg / kg. This amount is much lower for botulinum and the median lethal dose (LD50) for BoNT /A is ~ 0.2 ng / kg. According to the list of dangerous toxins determined by the Center for Disease Control and Prevention (CDC), botulinum toxins are in category A, and ricin toxin is in category B. To develop an immune library against botulinum toxin, mice were immunized with peptides B1, B4, B5, B7 and B9, which are thought to have antigenic parts of bont/A toxin. In order to develop an immunized library against risin toxin, the mice were immunized with pVAC1, Which is DNA vaccine vector, whose clonin ricin toxin B subunit (RTB) gene was cloned. Botulinum toxin peptides were taken by order and immunization was performed to 3 different mouse races (BALB/C, CD1 and C57/BL6). Ricin toxin has been used for immunization in the BALB/c mouse race. Immunization tests was done with“Enzyme Linked Immunosorbent Assay”. The immunization control of B peptides in the ELISA test was done by using the peptides used in immunization. For RTB, RTB gene was cloned into pET30a expression vector and than produced in the rosetta bacteria line and purified. Purified RTB protein was used in the ELISA test.
Benzer Tezler
- Vaccinomics to design a chimeric vaccine candidate against four bordetella species
Dört bordetella türüne karşı bir kimerik aşı adayının tasarımı için vaksinomik yaklaşım
BEYZA USLU
Yüksek Lisans
İngilizce
2026
Biyoteknolojiİstanbul Teknik ÜniversitesiMoleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı (disiplinlerarası)
DR. ÖĞR. ÜYESİ ÇİĞDEM YILMAZ ÇOLAK
- Investigation of cobalt resistance in Rhodobacter sphaeroides at molecular level
Rhodobacter sphaeroides'de kobalt direncinin moleküler düzeyde incelenmesi
GÜNEŞ ATAY
Doktora
İngilizce
2024
Genetikİstanbul Teknik ÜniversitesiMoleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı (disiplinlerarası)
PROF. DR. ZEYNEP PETEK ÇAKAR
- Molecular genetic assessment of immune modulators in eosinophils and t cells both in silico and in vitro utilizing photoacoustic imaging approaches
Fotoakustik görüntüleme yaklaşımlarını kullanarak eozinofiller ve t hücrelerinde bağışıklık modülatörlerinin in siliko ve in vitro moleküler genetik değerlendirmesi
ZÜLAL ÇELİK
Yüksek Lisans
İngilizce
2025
Allerji ve İmmünolojiİstanbul Teknik ÜniversitesiMoleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı (disiplinlerarası)
PROF. DR. CEREN ÇIRACI MUĞAN
- Engineering, production, and characterization of glycosylated and in vivo deglycosylated forms of anti-PA83 in Nicotiana benthamiana
Glikosile ve in vivo deglikosile edilmiş anti-PA83 formlarının Nicotiana benthamiana bitkisinde mühendisliği, üretimi ve karakterizasyonu
DAMLA YÜKSEL
Yüksek Lisans
İngilizce
2020
BiyoteknolojiAkdeniz ÜniversitesiTarımsal Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. TARLAN MAMEDOV
- Development of a combıned recombınant vaccıne formulatıon composed of mannheımıa haemolytıca- lkta epıtope, hıstophılus somnı – P31 and LppB and pasteurella multocıda - plpEC-OmpH fusıons agaınst bovıne respıratory dısease
Mannheimia haemolytica – lkta-epitopu, histophilus somni - p31 ve LppB ve pasteurella multocida - plpEC-OmpH, füzyonlarini i̇çeren kombi̇ne rekombi̇nant bi̇r aşi formülasyonunun geli̇şti̇ri̇lmesi̇
NURİDE TURAN
Yüksek Lisans
İngilizce
2025
MikrobiyolojiOrta Doğu Teknik ÜniversitesiMoleküler Biyoloji Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ GÜLAY ÖZCENGİZ