Geri Dön

Resveratrolün insan diş eti fibroblast aktivitesine etkisinin in vitro olarak incelenmesi

In vitro investigation of resveratrol on human gingival fibroblast activity

PDF İndir

  1. Tez No: 976817
  2. Yazar: BERKAY KILIÇ
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. DUYGU YAMAN
  4. Tez Türü: Diş Hekimliği Uzmanlık
  5. Konular: Diş Hekimliği, Dentistry
  6. Anahtar Kelimeler: Resveratrol, periodontal yara iyileşmesi, anti-fibrotik etki, insan diş eti fibroblastı (HGF), Resveratrol, periodontal wound healing, anti-fibrotic effect, human gingival fibroblast (HGF)
  7. Yıl: 2025
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: İstanbul Üniversitesi
  10. Enstitü: Diş Hekimliği Fakültesi
  11. Ana Bilim Dalı: Periodontoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Periodontoloji Bilim Dalı
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

Amaç: Bu çalışma, periodontal yara iyileşmesi ve fibrotik aktivite üzerine, doğal bir polifenol bileşiği olan resveratrolün etkilerini araştırmak amacıyla gerçekleştirilmiştir. İnsan diş eti fibroblastı (HGF-1) hücrelerinde TGF-ß1 ile uyarılmış in vitro fibrotik model oluşturularak resveratrolün hücre canlılığı ve etkin dozları, yara kapanma hızı ve yara iyileşmesinde yer alan TGF-ß, α-SMA, Tip I kolajen, fibronektin, VEGF ve FGF-2 biyobelirteçlerinin fibroblast hücrelerinden ekspresyonu üzerindeki etkileri değerlendirilmiştir. Gereç ve Yöntem: Fibroblast hücreleri, 10 ng/mL TGF-ß1 ile uyarılmıştır. Fibroblastlar kültüre edilerek farklı doz aralıklarında (1 ng/mL-90 μg/mL) RSV uygulanmış; sitotoksisite ve etkin doz deneyi (IC50) 24., 48. ve 72. saatlerde MTT hücre canlılığı testi ile, 0-72 saat aralığında yara kapanmasına yönelik etkileri ise yara çizik deneyleri ile değerlendirilmiştir. Fibroblastların TGF- ß, α-SMA, Tip I kolajen, fibronektin, VEGF ve FGF-2 ekspresyonları ELISA yöntemi ile 10 ng/mL ve 1-10-40 μg/mL resveratrol dozları uygulanarak 6., 24. ve 48. saatlerde analiz edilmiştir. İstatistiksel değerlendirmede iki yönlü ANOVA ve Tukey testleri kullanılmıştır. Bulgular: Yapılan MTT testlerinde, resveratrolün sitotoksisitesi doz ve zamana bağlı olarak artmış ve nanogram dozlarda etkin bulunmamış, mikrogram dozlarda hücre canlılığı anlamlı oranda azalmıştır (≥20 μg/mL, p<0,05). Yara çizik deneyinde, kontrol gruplarına paralel olarak 72 saatte tüm gruplarda kapanma etkisi görülmüştür. ELISA deneylerinde TGF-ß1 ile uyarılmamış ve uyarılmış fibroblastlarda resveratrol uygulaması, TGF-ß ekspresyonunu doz ve zamana bağlı olarak anlamlı bir şekilde azaltmıştır (p<0,05). ECM proteinlerinden α-SMA üretiminde bir fark gözlenmezken (p>0,05); Tip I kolajen ekspresyonu, uyarılmamış fibroblastlarda 10 μg/mL (6s) ve 10 ng/mL-1 μg/mL (48s) resveratrol dozlarında istatistiksel olarak anlamlı oranda azalmış (p=0,0294, p=0,0462, p=0,0488); uyarılmış grupta bu etki ortadan kalkmıştır. Fibronektin ekspresyonu; uyarılmamış fibroblastlarda 10 μg/mL (6s), 40 μg/mL (24s) ve 10 μg/mL (48s) resveratrol dozlarında anlamlı artış sergilemiş (p=0,0477, p=0,0008, p=0,044); uyarılmış fibroblastlarda bu etki ortadan kalkmıştır. VEGF üretimi; uyarılmış fibroblastlarda 10 ve 40 μg/mL (6s) doz grubunda anlamlı azalma sergilemiştir (p=0,0006; p=0,0087). FGF-2, uyarılmamış fibroblastlarda 1 ve 40 μg/mL (6s) ile 40 μg/mL(24s) doz grubunda anlamlı artış sergilerken (p=0,0169, p=0,0031, p=0,0002); uyarılmış fibroblastlarda böyle bir etki görülmemiştir. Sonuç: Resveratrolün insan diş eti fibroblastlarında düşük dozlarda sitotoksik etki gözlenmezken, yaklaşık 20 μg/mL'den itibaren toksik etki gösterdiği ortaya konmuştur. Bu bileşiğin fibroblastlar üzerindeki anti-fibrotik etkisi TGF-b üzerinden gösterilmekle birlikte, yara iyileşmesinde yer alan diğer bileşenler üzerindeki etkisi sınırlı bulunmuştur.

Özet (Çeviri)

Objective: This study was conducted to investigate the effects of resveratrol, a natural polyphenol compound, on periodontal wound healing and fibrotic activity. An in vitro fibrotic model was established using TGF-ß1 stimulated human gingival fibroblasts (HGF-1) cells to evaluate the effects of resveratrol on cell viability and effective doses, wound closure rate, and TGF-ß, α-SMA, Type I collagen, fibronectin, VEGF and FGF-2 expression. Materials and Methods: Fibroblast cells were stimulated with 10 ng/mL TGF-ß1 solution. Fibroblast were cultured and treated with resveratrol at different dose ranges (1 ng/mL-90 μg/mL); cytotoxicity and effective doses (IC50) were evaluated at 24, 48 and 72 hours using the MTT cell viability assay, while the effects on wound healing between 0-72 hours were evaluated using wound scratch assays. TGF-ß, α-SMA, Type I collagen, fibronectin, VEGF, FGF-2 expressions in fibroblast were analyzed in 10 ng/mL and 1-10-40 μg/mL resveratrol doses; at 6, 24 and 48 hours using the ELISA method. Two-way ANOVA and Tukey tests were used for statistical evaluation. Results: In the MTT assays performed, the cytotoxicity of resveratrol in a dose and time dependent manner and was not effective at nanogram doses; cell viability decreased significantly at microgram doses (≥20 μg/mL). In the wound scratch assay, a closing effect was observed in all groups at 72 hours, parallel to the control groups. In ELISA assays, resveratrol application in TGF-ß1 both normal and induced fibroblasts, significantly reduced TGF-ß expression in a dose and time dependent manner (p<0,05). While no difference was observed in the production of α- SMA among ECM proteins (p>0,05); Type I collagen expression was significantly reduced in normal fibroblasts at resveratrol doses of 10 μg/mL (6h) and 10 ng/mL-1 μg/mL (48h) (p=0.0294, p=0.0462, p=0.0488); this effect was absent in the stimulated group. Fibronectin expression showed a significant increase in normal fibroblasts at resveratrol doses of 10 μg/mL (6h), 40 μg/mL (24h) and 10 μg/mL (48h) (p=0.0477, p=0.0008, p=0.004); while this effect was eliminated in induced fibroblasts. VEGF production showed a significant decrease in stimulated fibroblasts in the 10 and 40 μg/mL (6h) dose groups (p=0.0006, p=0.0087). FGF-2 showed a significant increase in normal fibroblasts in the 1 and 40 μg/mL (6h) and 40 μg/mL (24h) dose groups (p=0.0169, p=0.0031, p=0.0002); no such effect was observed in induced fibroblasts. Conclusions: While no cytotoxic effect was observed at low doses of resveratrol in human gingival fibroblasts, it was found to be exhibit toxic effects at concentrations of 20 μg/mL and above. Although the anti-fibrotic effect of this compound on fibroblasts was demonstrated via TGF-ß effect on other components involved in wound healing was found to be limited.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    736176

    Kök kanalı yıkama solüsyonu olarak resveratrolün e. faecalis biyofilmi üzerine antibiyofilm ve bakteriyel metabolik aktivite etkinliği

    Antibiofilm and bacterial metabolic activity efficacy of resveratrol as root canal i̇rrigation solution on e. faecalis biofilm

    MERVE UYSAL

    Diş Hekimliği Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    Diş HekimliğiSüleyman Demirel Üniversitesi

    Endodonti Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. BULEM ÜREYEN KAYA

  2. Tez No

    689199

    Investigation of the effect of different particle size allografts on human osteoblast cell cultures with resveratrol incubation

    Resveratrol inkübasyonu yapılan farklı partikül boyutlarındaki allogreftlerin insan osteoblast hücre kültürlerine etkisinin incelenmesi

    İSA HAZAR YALDIZ

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2019

    Diş HekimliğiYeditepe Üniversitesi

    Ağız, Diş ve Çene Cerrahisi Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. EDİZ DENİZ

  3. Tez No

    442066

    Effects of resveratrol and quercetin on vitamin d metabolizing cytochrome p450 enzymes

    Resveratrol ve kuersetinin vitamin d metabolizmasında rol alan sitokrom p450 enzimlerine etkileri

    MERVE AKKULAK

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2016

    BiyokimyaOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Biyokimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ORHAN ADALI

    DOÇ. DR. HATİCE GÜNEŞ ÖZHAN

  4. Tez No

    998148

    Diazinonun toksik etkisine karşı resveratrolün koruyucu etkisinin drosophila melanogaster üzerinede değerlendirilmesi

    Resveratrol reduces diazinon-induced oxidative stress and toxicity in drosophila melanogaster

    AMIR MOHAMMAD MUQIM

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2026

    GenetikBartın Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. FAHRİYE ZEMHERİ NAVRUZ

  5. Tez No

    760283

    Deneysel sıçan pankreatik beta hücresi hasar modelinde CTLA-4 proteini ile mezenkimal kök hücrelerin sinerjik etkisinin potansiyel tedavi stratejilerindeki rolünün araştırılması

    Investigation of the role of synergistic effect of CTLA-4 protein and mesenchymal stem cells in potential treatment strategies in experimental rat pancreatic beta cell damage model

    SEMA YUSUFOĞLU NÜRLÜGE

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    BiyoteknolojiKocaeli Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ GÜLÇİN GACAR

Geri Dön