Tavuk karaciğerinden katalaz enziminin saflaştırılması
Purification of catalase from chicken liver
- Tez No: 98155
- Danışmanlar: DOÇ. DR. TÜLİN AYDEMİR
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Kimya, Chemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2000
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Celal Bayar Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 53
Özet
ÖZET Katalaz, kısmi indirgenmiş oksijen türleri ve H202 nin toksik etkisinden dokuların korunmasında önemli rol oynar. Tavuk karaciğer katalazı, NH4(S04)2 çöktürmesi, etanol- kloroform muamelesi, CM-Selüloz ve Sephadex G-200 kromatografisi kullanılarak saflaştırıldı. Jel fiitrasyon kromatografisi ile tavuk karaciğer katalazının molekül ağırlığı yaklaşık olarak 235000 Da bulundu. SDS-jel elektroforezi sonunda tavuk karaciğer katalazının molekül ağırlığı 57500 Da olarak bulundu ve 4 alt birimden oluştuğu tespit edildi. Spesifik aktivite 55765.5 U/mg olarak saptandı. Hem içeriğinin kabaca ölçülmesini sağlayan A407/A270 oranı 0.52 olarak bulundu. Enzimin Km değeri 100 mM olarak belirlendi. Enzimin 7.0-10.0 aralığında geniş bir pH optimumuna sahip olduğu görüldü. Tavuk karaciğer katalaz enziminin optimum sıcaklığı 25 °C olarak tespit edildi. Saflaştırılmış enzim aktivitesi KCN, NaN3, p-merkaptoetanol, DTT, iyodoasetamit tarafından inhibe edildi, fakat sodyum dietilditiyokarbomatın enzimi inhibe etmediği görüldü. vn
Özet (Çeviri)
ABSTRACT Catalase plays a major role in the protection of tissues from toxic effects of H202 and partially reduced oxygen species. It was purified chicken liver by NH4(S04)2 precipitation, ethanol-chloroform treatment, CM-Cellülose, Sephadex G-200 chromatography. The molecular weight of the native chicken liver catalase was estimated by gel filtration to be approximately 235000 Da. SDS-gel electrophoresis results indicated that chicken liver catalase consists of for apparently identical subunits with a molecular weight of about 57500 Da. The specific activity was found to be 55765.3 U/mg. The optical spectrum of the purified enzyme shows a Soret bant at 407 nm characteristic of heme and there was apparent reduction by dithionite. The ratio A407/A270 the index of hematin content relative to protein, was 0.52. The Km was found to be 100 mM. The maximal activity of the enzyme was observed at between 7.0- 10.0. The enzyme has a optimum reaction temperature at 25 °C. The activity of purified catalase is inhibited by azide, cyanide, (3-mercaptoethanol, DTT and iodoacetamide but chicken liver catalase was not inhibited by sodium diethlydithiocarbamate. vra
Benzer Tezler
- The Isolation and purification of superoxide dismutase from chicken liver
Tavuk karaciğerinden süperoksit dismutazın izolasyonu ve saflaştırılması
RAZİYE ÖZTÜRK
Yüksek Lisans
İngilizce
1998
Eğitim ve ÖğretimDokuz Eylül ÜniversitesiKimya Eğitimi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. LEMAN TARHAN
- Tavuk karaciğerinden glutatyon redüktaz enziminin saflaştırılması, karekterizasyonu ve bazı ilaçların etkilerinin incelenmesi
Purification and characterization of chicken glutathione reductase, investigation of effects some drugs on these enzymes
HÜLYA DEMİR
- Tavuk karaciğerinden sorbitol dehidrogenaz enziminin saflaştırılması ve bazı ağır metallerin enzim aktivitesi üzerine etkilerinin incelenmesi
Purification of sorbitol dehydrogenase from chicken liver, and investigation effects of some heavy metal on the enzyme activity
MUSA AKKUŞ
- Glutatyon S-transferaz enziminin tavuk karaciğerinden saflaştırılması karakterizasyonu ve bazı pestisitlerin enzim aktivitesi üzerine etkisi
Characterization of glutathion S-transferase enzyme from chicken liver and the effect of some pesticides on enzyme activity
HAKAN YILMAZ
- Alkoldehidrogenaz (ADH) enziminin tavuk karaciğerinden saflaştırılması ve florisil üzerine immobilizasyonu
Purification of alcoholdehydrogenase enzym from chicken liver and immobilization onto florisil
HAVVA ERSÖZ
